血清CTGF 和PDGF-BB 表达与老年特发性间质性肺炎相关性分析

叶舒婷 赵敏华 李梦远 张 英

特发性间质性肺炎（idiopathic interstitial pneumonia，IIP）是一组病因不明的进行性下呼吸道疾病，好发于老年人[1]。该病发病机制复杂，诊治困难，大部分患者因肺纤维化导致肺动脉高压、肺源性心脏病，IIP 缺乏特效的治疗方法，患者生存时间较短[2-3]。血清学标志物是目前常用的一种非创性诊断方法，既往研究显示结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）、血小板衍生生长因子-BB（platelet-derived growth factor-BB，PDGF-BB）与纤维化的发生发展有关[4-5]。本研究检测老年IIP 患者血清中CTGF 和PDGF-BB 表达水平，并分析二者与IIP 的相关性。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2015 年3 月—2019 年10 月在浙江省台州市立医院呼吸内科接受治疗的老年IIP 患者99 例作为研究对象。依据不同病理类型分为特发性肺纤维化（IPF）组53 例；除IPF 外的其他类型IIP（nIPF-IIP）组46 例，其中包括非特异性间质性肺炎（NSIP）18 例，隐源性机化性肺炎（COP）17例，呼吸性细支气管炎伴间质性肺疾病（RB-ILD）11例。另外选择同期在我院进行老年健康体检者40 名作为对照组。本研究方案经台州市立医院伦理委员会审核通过，符合《赫尔辛基宣言》伦理原则。

1.2 纳入标准 （1）均经临床、影像学等检查确诊为IIP 患者：IPF 诊断标准参照《特发性肺纤维化诊断和治疗中国专家共识》[6]，nIPF-IIP 诊断参照美国胸科学会/欧洲呼吸学会官方共识[7]；（2）临床资料完整；（3）年龄≥60 岁；（4）所有研究对象及家属均签署知情同意书。

1.3 排除标准 （1）合并心脏、肾脏等其他器官组织纤维化者；（2）呼吸系统疾病者；（3）合并感染者；（4）免疫系统检查异常者。

2 方 法

2.1 检测指标及方法 （1）一般资料：包括性别、年龄、病程、是否吸烟等；（2）标本提取：次日早晨8:00抽取研究对象空腹状态肘静脉血5mL，置于离心机中以5000r/min 转速离心10min（离心半径为10cm），移取上清液放入2mL 冻存管中，分离血清标记后于-80℃冰箱冻存待测，然后采用SIEMENS ADVIA2400 全自动生化分析仪（德国）检测总胆固醇（TC）（氧化酶法）、三酰甘油（TG）（甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）（匀相测定法）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）（匀相测定法）、超敏C 反应蛋白（hs-CRP）（免疫散射比浊法）以及同型半胱氨酸（Hcy）（氧化酶法）等生化指标，所有试剂盒均购自宁波美康生物科技有限公司（批号150214、160521、160512、161224、170514、150630）；（3）血清CTGF 和PDGF-BB 测定：于相同条件下采集所有研究对象空腹血液标本，分离血清置-80℃保存待测，采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血清CTGF 和PDGF-BB 表达，定量测定试剂盒购自上海亿欣生物科技有限公司（批号150327、150619）。

2.2 统计学方法 应用SPSS 24.0 统计软件，计量资料以均数±标准差（） 表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t 检验；计数资料采用例数（n）和百分比（%）描述，行χ2检验。然后采用ROC 曲线分析血清CTGF、PDGF-BB 表达界限值，采用Logistic 逐步回归分析老年IIP 肺纤维化的相关影响因素，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

3 结果

3.1 三组研究对象一般资料及生化指标比较 三组研究对象hs-CRP 和Hcy 比较，差异有统计学意义（P＜0.05），IPF 组血清hs-CRP 和Hcy 表达水平明显高于对照组和nIPF-IIP 组（P＜0.05），nIPF-IIP 组血清hs-CRP 和Hcy 表达水平明显高于对照组（P＜0.05）；性别、年龄、病程、吸烟、TG、TC、HDL-C、LDLC 等一般资料比较差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性，见表1。

表1 三组研究对象一般资料及生化指标比较

3.2 三组研究对象血清CTGF 和PDGF-BB 表达水平比较 nIPF-IIP 组血清CTGF 和PDGF-BB 表达水平明显高于对照组，IPF 组血清CTGF 和PDGFBB 表达水平明显高于对照组与nIPF-IIP 组（P＜0.05）。见表2。

表2 三组研究对象血清CTGF 和PDGF-BB 表达比较（）

表2 三组研究对象血清CTGF 和PDGF-BB 表达比较（）

注：IPF 组为特发性肺纤维化患者；nIPF-IIP 组为除特发性肺纤维化外的其他类型的特发性间质性肺炎患者；对照组为健康体检者；CTGF 为结缔组织生长因子；PDGF-BB 为血小板衍生生长因子-BB；与对照组比较，aP＜0.05；与nIPF-IIP 组比较，bP＜0.05

3.3 血清CTGF 和PDGF-BB 表达诊断IIP 的ROC曲线分析 由SPSS 24.0 统计软件作ROC 曲线，并根据约登指数计算出两组间的敏感度和特异度。结果显示，血清CTGF 表达对于鉴别IPF 组和nIPF-IIP组以及nIPF-IIP 组和对照组的敏感度和特异度均较高，两组间界限值分别为14.25ng/mL、5.18ng/mL；血清PDGF-BB 表达鉴别IPF 组和nIPF-IIP 组以及nIPF-IIP 组和对照组的敏感度和特异度均较高，两组间界限值分别为59.43pg/mL、25.67pg/mL。14.25ng/mL、5.18ng/mL 为血清CTGF 判别IPF 组和nIPF-IIP 组、nIPF -IIP 组和对照组的标准值，59.43pg/mL、25.67pg/mL 为血清PDGF-BB 判别IPF 组和nIPF-IIP 组、nIPF-IIP 组和对照组的标准值。见表3。

3.4 老年特发性间质性肺炎肺纤维化影响因素Logistic 回归分析 以老年IIP 有无肺纤维化为因变量（否＝0、是＝1），以血清hs-CRP、Hcy、CTGF、PDGF-BB等作为自变量（连续变量形式进入分析）进行二分类Logistic 逐步回归分析可知，患者血清hs-CRP、Hcy、CTGF、PDGF-BB 升高是老年IIP 患者肺纤维化的危险因素（P＜0.05），见表4。

表3 血清CTGF 和PDGF-BB 表达诊断IIP 的ROC 曲线分析

表4 老年特发性间质性肺炎肺纤维化影响因素Logistic回归分析

4 讨论

IIP 疾病谱病因庞杂、分类混乱，诊断与鉴别诊断复杂，治疗非常棘手[8]。多种因素产生的肺损害均可导致肺纤维化的发生（包括毒性物质、自身免疫性疾病、药物、感染和创伤等），众多因素所导致的肺部组织病理学表现各不相同，但均有不同程度的炎症和纤维化[9]。CTGF 是一种在多种纤维增殖性疾病中起关键作用的细胞因子，具有促进成纤维细胞增殖以及参与细胞外基质产生、积聚等功能，对肺纤维的分化增殖具有很强的调控作用，在病理状态下，CTGF 的过度表达与某些增生性或纤维化性疾病的发生密切相关[10-11]。PDGF-BB 是已知最强的促肺纤维化增殖、分化的细胞因子，随着肺纤维化程度的加重，PDGF 表达逐渐增强，可通过转化生长因子（TGF-β）介导作用于结缔组织，对肺纤维化起维持性作用[12-13]。

本研究发现，IPF 组血清CTGF 和PDGF-BB 表达水平高于对照组和nIPF-IIP 组，且nIPF-IIP 组血清CTGF 和PDGF-BB 表达水平明显高于对照组；本研究多因素回归分析也发现，血清CTGF、PDGF-BB升高是老年IIP 患者肺纤维化的危险因素。这表明血清CTGF 和PDGF-BB 表达对肺纤维化的血清学诊断有重要意义。既往研究发现，血清CTGF 启动子中存在Smads 结合元件，该元件突变后，既可以减少CTGF 的基础表达，又可消除TGF-β 诱导的CTGF表达[14]。IIP 患者的血清CTGF 可提供肺纤维化发生发展的信息，并反映血清TGF-β 的生物活性[15-17]。说明血清CTGF 和PDGF-BB 在IIP 的发生发展中起到重要作用。本研究ROC 结果显示，血清CTGF 表达对于鉴别IPF 组和nIPF-IIP 组以及对照组和nIPFIIP 组的敏感度和特异度分别为（82.37%、85.54%，84.25%、85.31%），而血清PDGF-BB 表达鉴别IPF 组和nIPF-IIP 组以及nIPF-IIP 组和对照组的敏感度和特异度分别为（80.56%、87.73%，81.27%、86.52%），由此说明可将CTGF 和PDGF-BB 作为无创评估肺纤维化程度的标记物，联合检测CTGF、PDGF-BB 多种肺纤维化相关血清指标有助于提高血清学肺纤维化诊断的灵敏度及特异度，早期诊断与动态监测肺纤维化对于IIP 的治疗、改善预后具有重要意义。目前对于CTGF、PDGF-BB 在肺纤维化诊断IIP 中的作用报道不多，有待于我们进一步研究。

综上所述，血清CTGF 和PDGF-BB 在老年IIP患者中表达升高，二者联合检测能提高诊断准确性，同时二者表达升高可以作为预测老年IIP 肺纤维化发生风险的标志物。