藏药“芒涧”基原植物及其生药学鉴别

朱智英 贡保东知 张玉英 廖东波 张亚梅*

1.江西中医药大学，江西 南昌 330004；2. 成都中医药大学， 四川 成都 610072

藏药“芒涧”，又译“芒间”[1]，是藏医传统习用药材，可散热止痛，用于治疗痈疽、疔疮等，为多基原常用藏药品种之一。有关藏药“芒涧”的基原，在不同年代不同书籍中记载不一。藏医药经典著作《新修晶珠本草》记载[1]，“芒涧”以黑黄两类为主，黑者又称“芒涧纳保”、“明涧纳博”[1]、“芒间那保”[3]，其基原植物涉及熏倒牛BiebersteiniaheterostemomMaxim.[1,3]、巴塘紫菀AsterbatangensisBur.et Franch.[2]，但青海省藏药材标准和卫生部药品标准藏药分册-附录仅收载“熏倒牛”[3,4]；黄者又称“芒涧赛保”、“明涧色波”[2]、“明涧色博”[1]，基原植物包括狭叶垂头菊CremanthodiumangustifoliumW.W.Sm[1, 2]、侧茎垂头菊Cremanthodiumpleurocaule(Franch.) R.D.Good[1, 2]、条叶垂头菊CremanthodiumlineareMaxim.[1]、小垂头菊Cremanthodiumnanum(Decne.) W.W.Smith[1,5]、臭蚤草PulicarialisignisDrumm.ex Dunn[5]等，《藏药志》中则将熏倒牛同小垂头菊、臭蚤草一起作“芒涧赛保”基原植物记载[5]。本实验通过研究臭蚤草和熏倒牛的性状、组织构造、HPLC图谱特征，为藏药“芒涧”基原药材的生药学鉴定和质量控制提供理论依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 GZX-9070MBE电热鼓风干燥箱，徕卡Leica RM2245轮转式切片机，XY-200型高速多功能粉碎机，Nikon H550S显微镜，Nikon DS-Ri2显微成像系统，TKY-BMB型石蜡包埋机，Waters高效液相色谱仪-e2695-2998液相检测系统，C18色谱柱，205DU型1/10万电子天平。

1.2 试剂与材料 甘油，苯酚，水合氯醛，明胶，乙醇，甲醇，甲醛，冰醋酸，二甲苯，番红，固绿，加拿大树胶，进口石蜡均为分析纯，GF254薄层板。

所有药材均野外采集，臭蚤草采自西藏自治区日喀则市昂仁县大嘎镇，熏倒牛采自西藏自治区昌都市昌都县柴维乡嘎日村。经江西中医药大学钟国跃研究员鉴定分别为菊科Compositae蚤草属Pulicaria 植物臭蚤草PulicariainsignisDrumm.Ex Dunn和牻牛儿苗科Geraniaceae 熏倒牛属Biebersteinia 植物熏倒牛BiebersteiniaheterostemonMaxim.的干燥全草。标本现存于江西中医药大学中药资源与民族药研究中心标本馆。

2 实验方法

性状鉴别：结合文献和标本对臭蚤草和熏倒牛药材进行性状描述。

显微鉴别：分别取干燥臭蚤草和熏倒牛各两份，1份置水中煮沸，待室温后分拣根、茎、叶，切成0.5 cm长的段或0.3 cm×0.5 cm的方块，制成石蜡切片用于组织显微观察；1份粉碎，过60目，用于两种药材粉末鉴定。

HPLC：取臭蚤草和熏倒牛粉末(过2号筛)各约1 g，置50 mL具塞锥形瓶中，分别加入甲醇25 mL，超声提取30 min，滤过，挥干，分别用5 mL甲醇溶解作为熏倒牛供试品溶液和臭蚤草供试品溶液。色谱条件为Ace-C18 分析柱，水-乙腈(5%～95%)梯度洗脱0～120 min，流速1 mL/min，检测波长203 nm，柱温30 ℃。精密吸取熏倒牛和臭蚤草供试品溶液10 μL注入高效液相色谱仪，按上述条件测定。

3 结果

3.1 药材性状

3.1.1 臭蚤草 带根全草，根状茎粗而长，多分枝，基部具密集白色长毛，包被有枯存叶柄。茎直立或斜升，高5～25 cm，径约2～3.5 mm，密被长毛。基生叶倒披针形，基部渐狭成长柄，茎生叶长圆形或卵圆状长圆形，顶端钝或稍尖，全缘，基部等宽，无柄，半抱茎，长4～8 cm，宽1.2～2 cm，质厚，两面被毡状长贴毛。头状花序单生于茎端，总苞宽钟形，舌状花黄色，外面有毛，两性花，花冠无毛。瘦果近圆柱形，被浅褐色绢毛。无臭，味微苦。如图1所示。

图1 臭蚤草药材照片 图2 熏倒牛药材照片

3.1.2 熏倒牛 带根全草高30～90 cm，全体被棕褐色腺毛和白色短柔毛。根直立，细圆柱状，红褐色。茎单生，上部分枝，表皮黄棕色至棕褐色，质脆易折，断面不整齐，髓白色或空心。叶多破碎，不完整叶片羽状分裂，小裂片狭条状披针形或齿状，皱缩，两面被柔毛。基生叶和茎下部叶具长柄，上部叶柄短或无柄，完整叶片展开为三回羽状全裂，托叶半卵形。圆锥聚散花序，花瓣5，淡黄色，与萼片等长或稍短。花萼5，宿存，黑色，被腺毛和柔毛。蒴果不开裂，成热时果瓣不向上反卷。种子近肾形。味苦，气浓臭。如图2所示。

3.2 显微鉴别

3.2.1 根横切面 熏倒牛根横切面：木栓层细胞3～4列，内含红棕色物质。皮层组织稍宽，多裂隙，细胞切向延长。中柱鞘纤维成束散生，韧皮部稍宽。形成层不明显。木质部宽广，导管多成径向排列。射线多单列，胞壁木化增厚。中央初生木质部导管排列成单列，薄壁组织多裂隙。

臭蚤草根横切面：木栓层细胞数列，部分破裂，皮层细胞排列紧密，形状不一，较熏倒牛根宽广。韧皮部狭窄，呈半圆形，不连续成环，约占根的横切面1/10。形成层成环状，不明显。木质部细胞排列紧密，无裂隙，木质化程度较熏倒牛根更明显，导管多单个散在，呈环状排列。射线细胞2～3列。初生木质部不明显。如图3、4所示。

图3 熏倒牛根横切面 10X

图4 臭蚤草根横切面 10X

3.2.2 茎横切面 熏倒牛茎横切面：表皮细胞1列，长方形，壁厚化，外被腺毛和非腺毛。下皮细胞1列，类似表皮。皮层窄，最内1层细胞增大，壁厚化。维管束外韧形，间断排列成环，束间薄壁组织宽广，细胞壁略微木化增厚。维管束鞘由2～4列后壁组织组成，纤维壁木化增厚明显，胞腔狭小。韧皮部窄。形成层不明显。木质部导管径向排列成4～11列。髓大，成空腔。

臭蚤草茎横切面：表皮细胞1列，外被腺毛和非腺毛，壁厚化明显，被角质层。皮层近表皮处有1～2列厚角组织。皮层宽广，由数列排列疏松的薄壁细胞组成，内皮层不明显。维管束周韧型或双韧型，排列成不规则环状。韧皮纤维呈帽状覆盖韧皮部，韧皮部呈新月形。木质部细胞排列紧密，细胞壁均木质化。髓部细胞大，排列疏松，多破裂成腔隙。如图5、6所示。

图5 熏倒牛茎横切面 20X

图6 臭蚤草茎横切面 20X

3.2.3 叶横切面 臭蚤草叶的上下表皮均由1层类方形或类圆形薄壁细胞组成，外被角质层，可见非腺毛。上下表皮下均有2～3层厚角组织细胞。维管束外韧形。韧皮部略呈半月形，外侧包被维管束鞘。木质部导管呈径向排列。叶肉细胞排列疏松，多有腔隙，栅栏组织和海绵组织分化不明显。和臭蚤草相比，熏倒牛叶上下表皮细胞排列疏松，外被厚的角质层，上表皮偶见非腺毛。皮层未见厚角组织，维管束鞘亦不明显。叶肉细胞中栅栏组织较窄，呈类长椭圆形，海绵组织较宽，呈类圆形。如图7、8所示。

图7 臭蚤草叶横切面 20X

图8 熏倒牛叶横切面 20X

3.2.4 粉末 臭蚤草粉末为土灰褐色。非腺毛和腺毛多见，非腺毛由1～12个细胞组成，节稍膨大，较短略弯曲，壁厚。叶表皮细胞表面观类多角型或类方形，气孔为不定式。纤维木化，多上下交错成束。导管可见螺纹、梯纹、网纹等。花粉粒多见，偶见菊糖结晶。如图9所示。

1.非腺毛 2.叶表皮细胞 3.纤维 4.花粉粒 5.茎表皮细胞 6.菊糖图9 臭蚤草粉末显微特征 40X

熏倒牛粉末为深黄绿色，腺毛和非腺毛多见，腺毛具多列细胞的柄和多细胞球形的头。非腺毛单细胞，基部多弯曲，壁薄。果萼表皮细胞和种皮细胞多见。纤维众多，多破碎，成束或单个存在。可见环纹、螺纹、梯纹等导管，细胞中含有气孔。纤维较多，多成束存在。可见散在的种皮细胞、淀粉粒。如图10所示。

图10 熏倒牛粉末显微图 40X

3.3 HPLC图谱 两种植物的HPLC色谱峰重合度较小，提示成分差异明显。如图11所示。

图11 熏倒牛和臭蚤草高效液相色谱图

4 讨论

在文献记载中，熏倒牛作藏药“芒涧纳保”使用，药用部位为地上部分[3]，作“芒涧赛保”使用时，药用部位则为全草或花序[1]，因此本文对熏倒牛和臭蚤草均进行了全草的生药学鉴别。 有关采收期，“芒涧纳保”有夏秋采收的描述[3]，“芒涧赛保”则记载有7～8月采[2]，因此选择8月采集两种植物，故可以在臭蚤草粉末中看到诸多花粉粒，而熏倒牛此时果实多已成熟，叶多脱落，故粉末中可见多数种皮细胞，而少见叶表皮。在全草性状鉴别中，臭蚤草叶全缘，瘦果近圆柱形；熏倒牛完整叶片展开为三回羽状全裂，小裂片狭条状披针形或齿状，蒴果不开裂，种子近肾形。在组织构造方面，臭蚤草根横切面皮层和木质部细胞排列紧密，无裂隙，木质化程度较熏倒牛根更明显；茎皮层宽广，内皮层不明显，维管束周韧型或双韧型，韧皮纤维呈帽状覆盖韧皮部，韧皮部呈新月形；叶上下表皮均有2～3层厚角组织细胞。熏倒牛根木栓层内含红棕色物质，皮层组织多裂隙；茎横切面维管束外韧形，束间薄壁组织宽广，维管束鞘由2～4列厚壁组织组成，髓大，成空腔；叶上下表皮细胞排列疏松，外被厚的角质层，偶见非腺毛。HPLC图谱显示二者所含主要成分差异明显，研究表明，熏倒牛主要含有黄酮及其苷类成分[6]， 臭蚤草则主要含有倍半萜类[7]。

综上所述，臭蚤草与熏倒牛干燥药材性状特征，根、茎、叶横切面显微特征以及HPLC谱图特征均可显示二者其独特鲜明的植物形态、组织构造及成分差异，可作为其生药学鉴定和质量控制的依据。考虑到文献记载“芒涧”有多种基原植物，因此，在后续研究中须尽可能的收集齐全各基原植物，并进行生药、化学、药理等全面深入的研究，从而为藏药“芒涧”质量标准制定提供系统科学的依据。