SPE-GC-MS/MS同时测定乌牛早茶叶中13种农药残留

雷海燕

摘要：选取浙江云和县茶叶乌牛早50份，经乙腈提取， 旋转蒸发，用Cleanert TPT固相萃取柱净化，浓缩，内标法定量，采用GC-MS/MS测定13种农药残留。结果表明，50份样品中均未检出13种农药残留，说明该地山区气候优势，乌牛早农残检测率低，为该地茶叶产业发展提供一定的基础理论。

关键词：气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）;固相萃取（SPE）;茶叶;乌牛早;农药残留

中图分类号：O657.7+1;S571.1         文献标识码：A

文章编号：0439-8114（2020）17-0142-03

Abstract： To simultaneously determine 13 pesticides in 50 samples of local tea Wuniuzao. The samples extracted by acetonitrile and dried by rotated， purified by Cleanert TPT column，then subjected to GC-MS/MS using internal standard method. The treated samples pesticide residues were not detected. The results showed that the Wuniuzao of the local mountain area were very low. This paper provides some basic theory for the development of local tea industry.

Key words： GC-MS/MS; SPE; tea; Wuniuzao; pesticide residues

乌牛早比洞庭碧螺春、西湖龙井早上市一个月，在国内早茶市场独占鳌头。中国是茶叶主要的生产、消费和出口国。茶叶农药残留限量值日趋严格，截至2016年12月31日，欧盟对茶叶中农残限量要求已达493项，对未涉及的农残则依据默认标准（0.01 mg/kg） 进行判定[1]。GB 2763—2016 《食品中农药残留限量标准》[2]中茶叶的检测项目也增加至48项，最大残留限量值都有大幅降低。

目前，国内外对茶叶中 OCPs（有机氯农药）残留的检测方法主要采用气相色谱法（Gas chromatography，GC）[3-5]、气相色谱-质谱法（Gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）[6，7]、气相色谱-串联质谱法（Gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）[8-12] 等。气相色谱-三重四级杆串联质谱（Gas chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry，GC-QqQ-MS/MS）具有选择性好、特异性好、灵敏度高、抗干扰能力强和定量准确等优点， 大大提高了化合物定性和定量的准确性[13]。

本试验采用固相萃取-气相色谱-串联质谱法（SPE-GC-MS/MS）测定早茶乌牛早中13种农药残留，为浙江云和县茶叶产业发展提供一定的理论基础。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

乌牛早为市售干制茶，粉碎研磨后备用。

TSQ8000 Evo气相色谱-三重四极杆串联质谱，配电子轰击离子源，赛默飞世尔科技公司;全自动固相萃取仪、全自动平衡浓缩仪;高速离心机，赛默飞世尔科技公司;电子天平，瑞士METTLER TOLEDO公司;超纯水仪，美国 Millipore公司;涡旋振荡器，江苏其林贝尔公司。

13种农药标品;顺式环氧七氯内标，99.36%，德国Dr Ehrenstorfer公司。乙腈、正己烷、丙酮、甲苯均为色谱纯，美国Fisher Chemical公司;Cleanert TPT固相萃取柱，2 g/12 mL，天津博纳艾杰尔科技;无水硫酸钠 （Na2SO4）。

1.2 方法

1.2.1 标准溶液配制 准确吸取1 mL各混合标品于10 mL容量瓶中，用正己烷∶丙酮（1∶1，V∶V）定容，得到浓度为10 mg/L的混合标准储备溶液，储存于-18 ℃备用。准确称取25.0 mg（精确至0.1 mg） 的顺式环氧七氯标准品，用正己烷稀释定容至25 mL，得到浓度为1 000 mg/L 的标准储备液;用正己烷稀释标准储备液，配制成20 mg/L的标准中间液，储存于-18 ℃备用。

1.2.2 样品前处理 准确称取乌牛早样品 2.50 g（精确至0.01 g），置于50 mL聚乙烯离心管中，加入 20 mL 乙腈超声30 min;加入无水硫酸钠 2 g置于旋转蒸发器上振荡提取5 min，离心3 min（5 000 r/min），吸取上清液，转入鸡心瓶，残渣用20 mL乙腈再提取1次，合并提取液，在40 ℃ 水浴下旋转浓縮至约1 mL，待净化。加入20 mg/L顺式环氧七氯内标溶液0.1 mL。

1.2.3 仪器条件 色谱柱为 Agilent HP-5MS （30 m×0.25 mm，0.25 μm）;恒流模式，流速为1.2 mL/min;进样口温度250 ℃;载气为氦气（He），纯度99.999%;初始柱温 50 ℃;进样量 1 μL;溶剂延迟 3 min。EI 离子源温度 230 ℃;EI 源能量为 79 eV;灯丝电流为 35 μA;辅助加热器 280 ℃;四级杆温度150 ℃;淬灭气体（He）流量 2.3 mL/min，碰撞气体N2流量 1.2 mL/min。

用3 mL丙酮、6 mL正己烷依次淋洗弗罗里硅土固相萃取柱，弃去淋洗液，然后用6 mL丙酮-正己烷洗脱，收集全部洗脱液于10 mL试管中，45 ℃氮吹至近干，用丙酮溶解定容至0.5 mL，供上机测定。

2 结果与分析

2.1 各化合物质谱条件优化

该方法检测代谢组分中有同分异构体，碎片分离13 种组分进行全扫描，确定目标农药组分丰度高且质量数较大的离子作母离子，选择SRM模式对待测组分进行扫描（表1）。

2.2 各化合物标准色谱图

按表1确定的各农药质谱参数， 13种农药的标準GC-MS/MS的总离子流色谱见图1。

2.3 各化合物标准曲线

按照 “1.2.3”和“2.1”确定的仪器色谱、质谱条件进行测定，以各农药峰面积相对应的溶液浓度绘制标准曲线。13种农药回归方程及相关系数见表2 。由表2可以看出，13种农药在质量浓度 0.01～1.00 μg/mL线性关系良好，且相关系数均大于0.996 0。

3 结论

采用该方法检测早茶乌牛早样品50 份，未检出13种农药残留。近年来，云和县形成了以食用菌、云和雪梨、茶叶、板栗等为代表的主导产业，茶叶是该县发展的一项新兴产业。据统计，茶园面积        2 017.8 hm2，其中采摘茶园1 540 hm2，总产量 660 t，产值4 765万元[14]。

乌牛早在云和县引种成功，当地种植户充分利用山区光、热、水、气不同的生态环境特点，发展形成了以石塘镇朱村、梅源村为主的茶叶主要种植区域。近年来，政府加大政策支持，2009 年云和县出台了《中共云和县委云和县人民政府关于加快推进农村改革发展的实施意见》，为大力发展高效生态农业，进一步提升农业产业化经营水平，提高云和农业效益和农产品市场竞争力，制定了一系列政策。

乌牛早的种植在一定程度上解决了当地农户就业问题，带来了增收，但茶产业如何更好地推动一二三产业融合，形成完善的农业产业链，需要在提高茶叶的品质和档次方面加强引导，重视农产品质量和不断提高加工技术。

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