高危型HPV检测联合TCT检查用于宫颈癌筛查的应用探究

王金玲，张燕萍，魏 瑛

（民勤县妇幼保健计划生育服务中心，甘肃 民勤 733399）

宫颈癌是威胁女性生命安全的妇科恶性肿瘤类型之一，也是目前唯一一个病因明确的癌症之一，从宫颈癌前病变发展到宫颈癌至少有5～20年的时间。因此临床十分重视对女性宫颈癌的筛查工作，致力于早期发现宫颈癌前病变阻止其进一步演变为宫颈癌，以期做到早发现、早诊断、早治疗，以改善各期预后，降低患者死亡率[1]。宫颈癌的发生与宫颈感染人乳头状瘤病毒密切相关，有资料显示，有90%以上的宫颈病变患者是因长期持续高危型HPV感染所致[2]。因此，检测患者的高危型HPV感染情况对于宫颈癌筛查有重要意义。而TCT检查也是临床筛查患者宫颈目前有无病变的常用方式，取患者宫颈细胞制作涂片，于镜下进行细胞学检查，能够有效发现异常细胞的存在[3]。本研究对疑似宫颈病变患者联合采用高危型HPV检测与TCT检查，分析其应用效果，报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

以2017年7月至2019年7月我县农村妇女免费宫颈癌筛查出的来本院进行咨询及相继就诊的78例疑似宫颈病变患者为研究对象。纳入标准：患者均有异常阴道出血、分泌物增加等典型症状；患者均知晓研究，愿意参与并配合相关工作；排除有宫颈手术史、子宫切除术史的患者。患者均已婚，年龄在 33～59 岁，平均（47.55±3.61）岁；孕次在 1～4次，平均（2.45±0.51）次。

1.2 检查方法

于非月经期采集患者的宫颈细胞标本，嘱患者采集前1天避免性行为，3天内避免阴道冲洗或用药。检查时各项操作均严格按照操作规程进行。

高危型HPV检测方法：用窥阴器轻轻暴露患者宫颈，清除过多分泌物，使用专用采集器具收集宫颈脱落细胞，将其置于专用标本储藏瓶中，贴好标签后保存待检。检测所用试剂盒由上海之江生物科技股份有限公司提供 （国械注准20153400044），可检出16型、18型、31型等15种类型的高危型HPV的DNA核酸片段,以荧光PCR法进行检测。若检测结果显示，RLUs/CO≦1.0则判断为阴性，若RLUs/CO＞1.0则判断为阳性。

TCT检查方法：采用TCT制片机对标本进行加工，制作成直径2cm的薄层细胞涂片，并采用乙醇（浓度95%）进行固定，采用巴氏染色剂染色后，由经验丰富的检验科医师进行显微镜下细胞学检查。依据细胞学分类标准对患者病变情况进行分类，若存在非典型鳞状细胞、鳞状上皮内瘤变、鳞状上皮癌，则诊断为TCT检查阳性。

1.3 观察指标

以病理检查结果为金标准。在组织病理学检查中，依据患者宫颈上皮鳞状细胞情况将其分为5级，即：正常或良性炎症、CIN（宫颈上皮非典型增生）Ⅰ级、CINⅡ级、CINⅢ级、鳞状细胞癌。将正常或良性炎症者设为阴性，其他为阳性。观察与病理学检查比较，采用高危型HPV检测与TCT检查在宫颈癌筛查中的阳性检出率，并计算其灵敏度与特异度。灵敏度=真阳性/（真阳性+假阴性）；特异度=真阴性/（真阴性+假阳性）

1.4 统计学处理

使用SPSS20.0统计学软件，计数资料用n（%）表示，采用χ2卡方值进行比较，若P＜0.05则差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 病理检查、高危型HPV检测、TCT检查结果

病理检查显示，78例患者中11例为阴性 （正常或良性炎症者），67例为阳性，其中，CINⅠ级者12例，CINⅡ级者35例，CINⅢ级者17，鳞状细胞癌3例。高危型HPV检测结果显示阳性66例，阴性12例。TCT检查结果显示阳性52例，阴性26例。

2.2 高危型HPV检测与TCT检查对相应级别的宫颈癌前病变患者的检出情况

从表1可见，高危型HPV检测对于阴性患者有54.55%的阳性检出率，其准确率较低，TCT检查则对阴性患者的阳性检出率为0，准确度较高。单一使用高危HPV检测或TCT检查对CINⅢ级患者及鳞状细胞癌的检查准确性较高，均达90%以上，对CINⅠ级、CINⅡ级患者的阳性检出率则较低。而联合高危HPV与TCT检查对CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级的阳性检出率均达到90%以上。

表1 高危HPV检测与TCT检查对相应级别的宫颈癌前病变患者的检出情况[n（%）]

2.3 高危型HPV检测与TCT检查在宫颈癌筛查中的检出率比较

高危型HPV检测在宫颈癌筛查中的灵敏度为89.55%（60/67）， 特异度为 45.45%（5/11），TCT 检查的灵敏度为 77.61%（52/67），特异度为 100.00%（11/11），高危HPV+TCT检查的灵敏度为98.51%（66/67），特异度为100.00%（11/11），详见表2。经统计学分析，高危HPV+TCT检查的灵敏度显著高于高危HPV检测和TCT检查，差异有统计学意义 （χ2=4.79、13.91，P＜0.05）。

表2 高危HPV检测、TCT检查与病理学检查结果的比较

3 讨论

宫颈癌是一种常见女性癌症类型，发病率仅次于乳腺癌，且近年来，随着女性性观念、生育观念等变化，其发生率有明显增高趋势，患者群体也越来越年轻化[4]。HPV感染是该疾病最主要的致病因素，目前临床虽已研制出HPV疫苗，但因其成本较高，加至还未被大多数适宜人群所接受，目前尚未实现普及[5]。因此，临床仍十分重视对于宫颈癌的筛查，以做到提前预防，及时发现癌前病变，以便有效控制宫颈癌的发生率、改善其预后。

本研究对78例疑似宫颈病变患者采用高危型HPV检测与TCT检查进行筛查，并以病理学检查为金标准进行比较，结果显示，高危型HPV检测、TCT检查均可在宫颈癌筛查中有较好效果，对CINⅢ级及宫颈癌患者的检出率较高；对CINⅠ级、CINⅡ级的检出率则稍低。而联合两种方式进行筛查，其对不同程度癌前病变的检出率均可达90%以上，可见联合高危型HPV检测与TCT检查在宫颈癌筛查中有更高应用价值。HPV属于一种双链DNA病毒，是女性生殖系统感染的常见病毒，尤其性活跃者的感染率更高，若感染长时间持续存在，则成为宫颈癌的致病因素。HPV病毒依据其致癌可能及生物学特性，可分为高危、低危两种类型，其中，高危型HPV持续感染是宫颈癌的主要致病因素。因此采用高危型HPV检测可获得较高敏感性，有效发现患者的HPV感染情况，聚焦高风险人群。但HPV检测也具有一定局限性。由于部分HPV感染者可在8～24月内自行清除病毒，不会发展为持续状态，因此仅采用HPV检测易出现误诊情况，假阳性较多[6]。从本文结果可见，单采用高危HPV检测对阴性患者的阳性检出率达到54.55%，其诊断特异度仅为45.45%，可见假阳性较高，将其单独应用于宫颈癌筛查中的效果不够理想。而TCT检查也是宫颈癌筛查中的常用方法，是利用细胞形态学对标本进行评估和判断，通过采集患者宫颈脱落细胞，并进行涂片制作、染色等操作，可使宫颈细胞均匀地分布于玻片上，再于显微镜下观察其细胞形态，可及时发现非典型鳞状细胞、鳞状上皮内瘤变等异常情况，从而作为宫颈癌筛查的依据[6]。但该方式操作流程较复杂，在制作涂片、染色、镜下检测等过程中，受到人为因素影响较大，易出现细胞重叠、细胞数量过少、炎症背景杂乱等问题，影响检测结果的准确性[7]。采用高危型HPV检测与TCT检查相结合，则可从生物学、细胞形态学检测两个方面对患者的宫颈病变情况进行评估达到协同作用，发现患者是否存在感染高危型HPV的病因及目前宫颈的结果情况，使其相辅相成，从而提高诊断的敏感性[8]。本研究可见，高危HPV检测与TCT检查在宫颈癌筛查中的灵敏度均达到75%以上，联合检查的灵敏度（98.51%）显著高于单一采用高危HPV检测（89.55%）或TCT检查（77.61%），且差异显著（P＜0.05），可见联合高危HPV检测与TCT检查在宫颈癌筛查中的应用价值优于单一使用某一种检查方式，可提高筛查的敏感性，减少漏诊。

综上所述，将高危型HPV检测联合TCT检查应用于宫颈癌筛查，可从生物学、细胞形态学上对患者目前宫颈病变情况进行评估，可有效提高其筛查敏感性，有助于及时发现宫颈癌前病变，进而指导临床及早规范诊治宫颈癌前病变改善其预后，从而显著降低宫颈癌的发生率，在条件允许的情况下，期待此联合筛查方案也能在我们民勤县农村妇女免费宫颈癌筛查中推广普及，从而提高我县宫颈癌前病变的检出率，大大降低我县宫颈癌的发生率。