夏文锐,温雪婷,杨 华,肖英平,邹晓庭*
(1.浙江大学动物科学学院,浙江杭州 310058;2.浙江农林大学动物科学学院,浙江杭州 311300;3.浙江省农业科学院农产品质量标准研究所,浙江杭州 310021)
鸭肉是亚洲最重要的肉类来源之一,鸭肉中必需不饱和脂肪酸含量较高,相比于猪肉更健康[1],受到中国和东南亚国家消费者的喜爱。番鸭(Cairina moschata)和北京鸭(Anas platyrhynchos)分别为瘦型与脂肪型肉鸭的典型代表。相比于北京鸭,番鸭的产肉量大,瘦肉率高,其显著特征是胸肌质量大、脂肪含量较低;而北京鸭是我国优良的本土品种,脂肪沉积能力强,适应性强,是北京烤鸭的重要原料[2]。研究发现2 个品种鸭在脂类代谢方面表现出较大差异,北京鸭血清脂质成分的浓度均较高,极低密度脂蛋白(Very Low-Density Lipoprotein,VLDL)浓度高出约2 倍,并且血糖降低[3]。在肉鸡上,已经证实了VLDL 浓度与肥胖存在正相关,并运用于肉鸡育种计划以降低胴体脂肪含量[4]。在水禽上,有研究发现血清甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(High-Density Lipoprotein,HDL)和低密度脂蛋白(Low-Density Lipoprotein,LDL)具有中等遗传力,提示了血清脂质成分具有较大潜力,作为经济性状的间接指标,可用于育种选择[5],但目前对水禽血清脂质指标与胴体瘦肉率的相关性研究较少。本研究旨在比较相同饲养条件下瘦肉型番鸭与脂肪型北京鸭的血糖血脂水平差异,探究血液生化参数与胴体脂肪沉积的关系,旨在为调控肉鸭脂肪沉积和品种选育提供理论参考。
1.1 实验动物及样品采集 将番鸭与北京鸭初生雏鸭分为2 组,每组各160 只,公、母各半,8 个重复,每个重复20 只鸭,在相同条件下饲养70 d。采用多层笼养,自然采光结合人工光照,采用红外线灯加热保温,在1~7、8~14 d 鸭舍温度分别控制在28、25℃,15 d 后降至室温。自由采食全价饲料,常规饲养管理。分别于1、3、7、14、28、42、70 d 每组随机取健康公、母鸭各4 只,测量禁食6 h 后的体重,屠宰取样,采集肝脏、腹脂及胸肌,称重后立即于干冰速冻,于-80℃低温冰箱冷藏。颈动脉取血5 mL,静置后,3 000 r/min 离心15 min 后收集血清。1 日龄番鸭雏鸭由浙江省兰溪市禾旺禽业专业合作社提供,1 日龄北京鸭雏鸭由北京金星鸭业有限公司提供。饲养试验场地由浙江省农业科学院提供。
1.2 测定指标及方法 血清中葡萄糖(Glucose,Glu)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、TG、HDL、LDL、VLDL、磷脂(Lecithin,PL)使用全自动生化仪(迈瑞ВS-420)测定。指标检测所用试剂盒购自中生北控股份有限公司,具体操作按照试剂盒说明进行。参照曾涛等[6]的方法采用氯仿/ 甲醇(2:1)肝匀浆测定肝脏TG 含量。肝体比、腹脂率分别为肝重、腹脂重与活体重的比值。
1.3 统计分析 数据采用SPSS 21.0 软件进行统计分析,采用一般线性模型(GLM)分析日龄、品种以及二者的交互作用;不同日龄间采用One-Way ANOVA 统计分析,不同品种间采用Multiple T-tset 统计分析,差异显著性检验采用Tukey 法;相关性分析使用偏相关分析,控制日龄和品种变量,显著性检验采用双侧检验。数据以平均值±标准误表示。
2.1 番鸭与北京鸭的体重与胸肌重差异 由表1 可见,2 个品种鸭在整个试验期生长发育良好,体重先缓慢增加,14 d 后呈快速增长,除1 d 与70 d 外,番鸭体重在试验期显著低于北京鸭。由表2 可见,番鸭胸肌重在28~42 d 极显著小于北京鸭,在70 d 显著大于北京鸭。
表1 番鸭与北京鸭的体重差异(n=8)
表2 番鸭与北京鸭的胸肌重差异(n=8)
2.2 肝脏和体脂沉积差异 由表3 可见,从出生至14 d,番鸭肝重显著小于北京鸭,随后增长迅速,在28 d 有大于北京鸭的趋势。北京鸭肝脏从出壳后保持较高增长率,42 d 后肝重达到最大值,随后出现减轻。番鸭与北京鸭肝体比均先上升后下降,番鸭肝体比在7~28 d 显著高于北京鸭;两品种鸭的腹脂重和腹脂率均随日龄不断上升,且番鸭在各日龄均低于北京鸭,其中腹脂重在14~28 d 差异显著。
由表4 可见,7~70 d,番鸭与北京鸭肝脏TG 含量呈先上升后下降,分别在14 d 和42 d 达到最大值;除7 d 和70 d 外,番鸭肝脏TG 含量均高于北京鸭,其中14~28 d 差异显著。
2.3 血清生化指标差异及相关分析 由表5 可见,对于血清HDL、TC、PL 含量,番鸭于14 d 上升至最大值,于42 d 降至最小值,北京鸭于28 d 达到峰值水平,其中番鸭HDL、PL 含量于28~42 d 极显著低于北京鸭,TC 含量于28 d 极显著低于北京鸭。番鸭于28 d 的血清LDL 含量极显著低于北京鸭。对于血清TG、VLDL含量,两品种鸭均于14 d 降至最低水平,且番鸭TG含量于28 d 极显著低于北京鸭,VLDL 含量于28~42 d极显著低于北京鸭。两品种鸭的血清Glu 含量均于42 d达到峰值,且番鸭各日龄均高于北京鸭,28 d~70 d 达到显著。品种间血清脂质各成分均表现出极显著差异;除LDL 外,其他血清成分均极显著受日龄影响;品种和日龄的交互作用显著影响血清HDL、LDL、TC 含量。
由表6 可见,肝体比及腹脂率与血清中TG、VLDL 呈极显著正相关,且肝体比与血清HDL、LDL、TC 呈显著负相关;肝脏TG 含量与血清TG、VLDL 呈显著负相关,与血清HDL 显著正相关;肝重和体重均与血清TG、Glu 呈显著正相关。
表3 番鸭与北京鸭肝脏发育与腹脂沉积差异(n=8)
表4 番鸭与北京鸭LTC 肝脏TG 含量差异(n=8)
表5 番鸭与北京鸭血清指标差异 (n=8) mmol/L
表6 血清生化指标与脂肪沉积性状的相关性分析
3.1 番鸭与北京鸭体重差异分析 本研究结果表明,番鸭与北京鸭在整个试验期生长发育良好,与前人的研究一致[7-8],符合家禽生长曲线的一般规律,出雏后生长迅速,表现为指数增长,直至出现增长拐点,此时生长的瞬时速率达到最大,随后生长速度开始减缓,并持续至性成熟,曲线呈“S”型。除1、70 d 外,番鸭体重显著低于北京鸭,两品种鸭70 d 体重差异不显著,可能是由于番鸭的肌肉生长速度加快,番鸭胸肌重在70 d显著大于北京鸭。Zheng 等[9]通过蛋白质组学研究发现,脂肪型鸭与瘦肉型鸭在不同生长阶段的肝脏营养代谢相关通路的表达存在差异,脂肪型鸭在生长早期阶段上调营养代谢相关通路,而瘦肉型鸭则在较晚的生长阶段,因此,脂肪型鸭与瘦肉型鸭不同生长阶段的肌肉与脂肪沉积模式存在差异。这与本研究结果一致,瘦肉型的番鸭相比于脂肪型的北京鸭在生长后期肌肉沉积能力更好。
3.2 脂肪沉积相关指标差异分析 肝脏是水禽脂质从头生成的重要器官,肝脏中脂肪酸与TG 的合成、脂类的转运及氧化,对脂质的合成起着重要作用,机体大部分内源性脂质来源于肝脏[9]。本研究发现,14 d 前北京鸭肝重显著高于番鸭,42 d 时肝重达到最大值后出现显著下降,与鲁凯[7]研究结果相似,这是由于水禽肝脏的发育时期主要在生长早期阶段[10]。此外,胴体组成随着年龄的增长发生变化,两品种鸭肝体比从7 d 后显著下降,这是由于鸭内脏器官(如心脏、肝脏和胃)的重量与体重高度相关[11],但内脏与身体的生长速度存在差异,因此肝体比自7 d 后随年龄增长而降低。本研究中,北京鸭42 d 平均腹脂重即达到47 g,与前人研究的差异可能来源于日粮能量水平不同[12],随着日粮能量水平的增加,腹部脂肪会显著增加[13]。本研究中,番鸭肝体比在7~28 d 显著高于北京鸭,肝脏TG 含量在14~28 d 显著高于北京鸭,而腹脂重和腹脂率均始终低于北京鸭,该结果与Stéphane 等[14]的研究一致,番鸭与北京鸭在过度饲养下,番鸭表出现强烈的肝脏脂肪变性,而北京鸭则不明显。这可能由于番鸭肝脏输出脂质的能力低于北京鸭(血浆TG 水平较低),而北京鸭肝脏中TG 更多地通过VLDL 输出,由血浆中脂蛋白酯酶水解[15],被脂肪细胞和肌细胞摄取并储存,增加脂肪和肌肉组织中的脂质生成,促进肌肉肥育和腹部脂肪沉积[16-17],因而番鸭肝脏储存的脂质比北京鸭更多,肝体比更大,而北京鸭胴体脂肪沉积能力更强,这也部分解释了番鸭的肝脏脂肪变性易感性。
3.3 血清生化指标差异分析 本研究发现,品种对各个脂质指标的影响极显著,番鸭血清TG、TC、PL 及脂蛋白水平均低于北京鸭,其中,VLDL 在28~42 d 差异达到极显著;Glu 水平各日龄均高于北京鸭。该结果与Hermier 等[3]研究一致,即番鸭血清中所有脂质和脂蛋白的浓度均较低,而血糖水平较高。禽类脂肪组织的脂质从头生成能力有限,其生长及脂质沉积主要依赖于肝脏合成并分泌的TG,TG 作为脂蛋白的组分在血浆中运输,其中VLDL 是主要的运输者,因此VLDL 的合成与分泌稳态是调节家禽肝脏与外周脂质沉积的关键点[18]。北京鸭较高的VLDL 水平反映了血浆TG 的可用性,为脂肪细胞合成脂质提供原料补充,促进肝外脂质的沉积。而血糖是血浆中重要的储能物质,为氧化代谢提供能量。与番鸭相比,北京鸭血糖含量低,也与前人研究一致,即脂肪型家禽具有血糖水平较低的特征[3,19]。这种脂肪型或瘦型的遗传倾向取决于基础代谢差异,胰岛素可能是重要的影响因素之一。研究发现,不同品种胰岛素敏感性或血清中胰岛素浓度存在差异[19],脂肪型家禽具有较高的血清胰岛素水平,从而增加肝细胞对葡萄糖摄取与利用以及VLDL 产生与分泌[20],进而对体脂率产生影响。总而言之,相比于番鸭,北京鸭具有较高的血清TG、VLDL 水平和较低的Glu 水平,这解释了其具有更少的肝脏TG 含量和更大的腹脂重,说明北京鸭具有更强的脂质合成与储存能力。
此外,日龄对血清各个脂质成分影响显著(除LDL外),在相同的营养条件下两品种鸭血糖随日龄动态变化趋势一致,血清VLDL 与TG 水平均在14 d 出现显著下降,这是由于日粮由雏鸭饲料更换为油脂含量低的生长前期饲料。家禽合成脂肪的能力有限,机体脂质积累除依赖肝脏从头合成外,肠道对外源脂质摄取也是重要来源,因此日粮能量水平影响鸭的脂质代谢[13-14]。
3.4 脂肪沉积性状与血清生化指标相关性分析 生物体大多数数量性状间存在不同程度的相关性[21],由遗传相关和环境相关共同作用产生。本研究发现,鸭血清TG、VLDL 与肝体比、腹脂率呈极显著正相关,与肝脏TG 含量显著负相关;血清HDL、LDL、TC 与肝体比呈显著负相关。本研究结果与在鸡上的研究一致[22-24],Dong 等[23]在鸡进食状态下,基于VLDL、TG、球蛋白、总胆汁酸和尿酸等构建了多元线性回归模型用于估计腹脂率,其中,血清VLDL、TG 与腹脂率呈正相关。Zhang 等[24]对进食状态下的黄羽肉鸡研究发现,血清TG 和VLDL具有较高的遗传力(0.26~0.60),并且与腹部脂肪性状呈正相关,而TC、HDL 和LDL 与腹脂性状呈高度负相关,其中TG 和LDL 可用于预测鸡的腹脂重与腹脂率。此外虽然较低的血糖水平是禽类合成和储存脂质能力良好的标志,但其遗传力以及与腹脂性状之间的遗传相关性较低,故不被用于育种选择。因此,VLDL 和腹脂率被作为区分瘦肉型和脂肪型肉鸡体系的选择指标[25]。然而目前对水禽的血清脂质成分与胴体性状关联性的研究较少。本研究结果显示,鸭血清TG、VLDL 与肝体比、腹脂率呈极显著正相关,提示其可能作为水禽育种选择中改善体脂含量的间接指标。
本实验结果显示,番鸭肝脏储存的脂质比北京鸭更多,而北京鸭腹脂重与腹脂率更大,胴体脂肪沉积能力更强;脂肪型的北京鸭较瘦肉型的番鸭具有更高的血清脂质与脂蛋白水平,以及更低的血糖水平,血清VLDL、TG 可能作为水禽育种选择中改善体脂含量的间接指标。