乌天麻的组织培养技术研究

王仙 陈西亚 袁海燕 郭丽娜

摘要：考察不同培养基（①1/2MS+6-BA1毫克/升+NAA0.5毫克/升+香蕉50毫克/升;②MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1毫克/升十蔗糖了0克/升+琼脂了.2克/升;③MS+NAA2.0毫克/升+6-BA0.5毫克/升+2，4-D1.0毫克/升）对诱导乌天麻愈伤组织生长的影响。结果发现③号培养基最适合乌天麻块茎生长的愈伤组织诱导。

关键词：乌天麻，组织培养，愈伤组织，培养基

乌天麻（Gastrodia elata Blume），为兰科天麻属种应用广泛的名贵中药。在自然条件下主要通过消化外侵的蜜环菌菌丝体过异养生活，无法独立生存。近年来，乌天麻的获取已经从野外采挖发展为人工栽培，但人工栽培产量低，加之乌天麻市场需求量的不断增大，无法满足市场的需求。乌天麻主要通过无性繁殖进行人工栽培，但易感染病毒，经过多代带病毒植株逐年增多，进而引起天麻品种退化和产量下降。目前一般采用有性繁殖方法获得优质乌天麻品种，以达到乌天麻高产稳产的目的，但有性繁殖难度比较大，生产周期长。因此，如何快速繁殖乌天麻是目前产麻区面临的一大难题。

本试验研究乌天麻组织培养技术，以期找出一条简便可行的天麻种麻的快繁途径。

1材料与方法

1.1材料

2018年冬季收获乌天麻的米麻。

1.2方法

将小米麻用自来水冲洗千净后用洗衣粉水再进行深度清洁，然后自来水冲洗10分钟以上，切成块茎，在超净工作台中将其放人0.1%HgCl，（隔夜）消毒10分钟，再用无菌水冲洗7～8次（每次1分钟）。将块茎再次切细放入无菌纸中吸千水分，分别将乌天麻块茎放入培养基中褐化2h，然后置于：①1/2MS+6-BAl毫克/升+NAA0.5毫克/升十香蕉50毫克/升，②MS+6-BA2.0毫克/升+NAA0.1毫克/升+蔗糖30克/升+瓊脂3.2克/升和③MS+NAA2.0毫克/升+6-BA0.5毫克/升+2，4-D1.0毫克/升培养基中培养。MS培养基和1/2MS培养基为植物组织培养中常用的基本培养基，培养基中均含3%蔗糖，0.8%琼脂，pH值为5.5～6.0。

2结果与分析

接种50天后，外植体开始出芽，接种60天后，芽长大为白色，平均每个芽有0.5±0.2厘

米，生长后期芽颜色逐渐加深，生命活力减弱（图1）。由表1可知，乌天麻外植体成活率从高到低依次为：③》②》①，且①号培养基和②号培养基中乌天麻芽体长势差，不能成长为新米麻，③号培养基中乌天麻芽体长势良好，有成长为新米麻的趋势。因此，③号培养基最有利于乌天麻的人工繁殖。

3讨论

在自然条件下，乌天麻的生存和生长必须依赖于蜜环菌，但试验证明乌天麻在无菌条件下也是可以生存和生长的，与陈永勤等的研究结果一致。乌天麻的离体培养比较困难，外植体成活率低，生长慢且容易被污染，尤其是在加有植物激素香蕉的①号培养基中。小米麻经无菌培养50天后开始生长出新米麻，70天后生长出了多个分枝的新米麻，与本研究结果基本一致。本研究中乌天麻切块离体培养60天后在MS和1/2MS培养基上均能出芽，以③号培养基的发芽率最高，②号培养基次之，①号培养基最差;除了③号培养基上的乌天麻块茎能继续生长成具有分枝、多茎节的乌天麻块茎的趋势外，①号和②号培养基均不能继续生长成米

麻。天麻块茎离体培养60天后，在MS和1/2MS培养基上均能出芽，且芽长势以MS培养基最好，本研究结果与之基本一致。

基金项目：六盘水师范

学院大学生项目，项目编号：LPSSYDXS18095。

通讯作者：郭丽娜（1989-），女，博士，副教授，E-mail：15029915935@163.com