不同浓度PEG-6000对大叶榄仁种实的引发效应

林春光，许天委，李国寅

(琼台师范学院， 海南 海口 571100)

大叶榄仁(TerminaliacatappaL.)为使君子科诃子属高大乔木[1]，果椭圆形，外果皮软木质，内果皮木质坚硬，内有种子一枚[2]。生产上多以种实繁殖，播种后一般需60 d以上才进入发芽盛期[3]，需时较长。长时间的萌发，易使种子受到各种环境因素影响，造成自然状态下发芽率较低，新鲜种实的发芽率仅为25%[4]，同时也不利于生产上快速获取苗木的需要。利用种子引发技术可缩短种子萌发时间，提高发芽率[5-6]。许委天等发现，该技术多见于一些蔬菜、花卉等草本小粒种子的引发[7]，鲜见木本植物特别是核果类植物上的应用，对大叶榄仁种实进行引发处理未见研究。因而本研究利用不同浓度的PEG-6000溶液分别对不去除果皮的种实和去除部分果皮(深达内果皮)的种实进行单因素5水平引发实验，以期获得大叶榄仁种实引发的较好方法。

1 材料和方法

1.1 材 料

供试大叶榄仁种实于2019年7—8月收集自海南成熟果实大小基本一致、果皮完整，不去除果皮自然晒干，在常温、避光、通风、干燥条件下保存，于第2年3月在海口市开展实验。

1.2 方 法

1.2.1引发处理

采取单因素5水平随机处理设计，单因素为引发剂PEG-6000浓度变化，5个水平分别为PEG-6000的5个浓度：0%(H2O，ck)、5%、10%、15%、20%。实验分2组，每组5个处理(表1)，3次重复。每个处理按四分法随机分取30粒种实，第1组各处理所用种实不去除果皮，第2组各处理的种实用自制设备去除外、中果皮和部分内果皮，保证去除果皮的深度基本一致，种子不裸露和损伤。每个处理的种实常温状态下在相应浓度的溶液中浸泡7 d，室温下缓慢回干到原有水平，以减少回干对萌发的影响[8]。

表1 引发处理实验设计

1.2.2萌发实验

用长、宽、高为40 cm×60 cm×26 cm的种植箱，内铺约10 cm厚海苔制作成1个发芽床，海苔以沸水浸泡30 min做灭菌消毒处理。每个发芽床放置1个处理，种实半埋入海苔中，按5行6列排列，种子相互间隔6 cm，种子置床后浇1次透水，每日监测，每5天补水1次，保持海苔面湿润。实验在室内常温自然光条件下进行。

1.2.3指标测定

以果皮开裂，种子露白作为萌发标志[9]，记录每粒种子萌发时间。以120 d为实验时间计算种子发芽率，同时计算平均发芽时间，作为该处理的平均发芽速度，计算公式为：

发芽率(%)=(发芽的种子数/供试种子数)×100%[10]；

平均发芽时间=∑(Dn)/∑n[11]；

式中:D为从种子置床起算的天数(本实验置床之日为0 d)，n为相应各天的发芽粒数。

1.2.4数据分析

利用SPSS 22.0软件进行单因素方差分析，采用Levene方法进行方差齐性检验，采用Least-significant difference(LSD)方法进行多重分析。

2 结果与分析

2.1 果皮留存情况对种实萌发的影响

在不进行PEG-6000引发情况下，仅考虑果皮留存状况对萌发的影响，从试验结果看，处理1-1和处理2-1平均发芽时间分别为78.67 d和74.83 d，对这2个处理的各种实发芽时间均数进行独立样本T检验(置信区间95%)，结果如下(表2)：

表2 处理1-1和处理2-1发芽时间均数T检验

从数据分析可看出，2个处理各种实的发芽时间在方差齐性检测中，F=0.054，显著性P=0.819>0.05，说明这2个处理的样本方差齐性，实验所用的材料具有同质性，可进行对比。查看方差齐性时均数T检验结果，T=0.353，P值(双侧)=0.727>0.05，说明这2个处理的种实平均发芽时间不具显著差异，表明自然状态下，种实是否去除果皮对萌发速度影响不大。但实验数据也显示，去除果皮与否，对种子的萌发率有较大影响，未去除果皮的种实发芽率为30%，部分去除果皮的种实发芽率达到60%。

2.2 不同浓度PEG-6000对不去果皮种实的引发效果

对组1中5个处理各种实的发芽时间均数进行方差齐性检验，Levene统计值=0.454，显著性P=0.769>0.05，方差齐性，各处理间具有同质性，可进行F检验。采用单因素方差分析,结果为F=0.044，显著性P=0.996>0.05，表明任意2个处理间种子发芽时间均值差异不显著，说明在不去除果皮的情况下，不同浓度的PEG-6000对提升大叶榄仁种实萌发速度效果不明显。

从图1可以看出，经PEG-6000处理的种实，发芽率均比对照高，其中10%浓度的PEG-6000处理发芽率最高，达56.67%。但对比不经PEG-6000处理、仅去除部分果皮的种实发芽率(60%)仍有一定的差距。可见果皮存在与否对发芽率的影响较大。

2.3 不同浓度PEG-6000对去除部分果皮种实的引发效果

对试验中组2中5个处理的发芽时间数据进行方差齐性检验，Levene统计值=1.258，显著性P=0.291>0.05，组2各处理间方差齐性，具有同质性，可进行F检验。单因素方差分析结果为：F=5.114，P=0.001<0.01，表明组2各处理间最少有2个处理平均发芽时间存在极显著差异，为此分析采用Least-significant difference(LSD)统计方法进行多重分析，结果如表3所示：

表3 第2组各处理间平均发芽时间多重比较(LSD)

从表3可以看出，部分去除果皮后，经不同浓度的PEG-6000处理，其种子萌发速度与对照组比较，显著性均小于0.05，都存在显著性差异，表明不同浓度PEG-6000均具有引发效应，其中5%浓度的PEG-6000(处理2-2)处理结果最明显，与对照处理(处理号2-1)比较，P=000<0.01,表明两者平均发芽时间有极显著差异，从两者均值差(Mean Difference)可以看出，处理号2-2的平均发芽时间显著少于处理号2-1的种子，见表4。

表4 组2各处理种子平均发芽时间及发芽率

表4数据与统计分析结果一致，经过PEG-6000引发的种实，与对照相比，平均发芽时间缩短了22%以上，发芽率提高17%以上。

3 结论和讨论

3.1 结 论

不同浓度的PEG-6000对大叶榄仁种子均具有引发效应，体现在能显著缩短种子萌发时间和提高发芽率，但是否起到引发作用，引发效果如何，与种子的果皮是否去除密切相关，也与PEG-6000的浓度有关。完全不去除果皮的种子，PEG-6000对其难于起到引发效果，但部分去除果皮后，PEG-6000的引发效果明显，其中，5%浓度的PEG-6000综合引发效果最优，发芽速度提高了45.96%，发芽率提高了23.33%。

3.2 讨 论

常规状态下，大叶榄仁种实不去除果皮或仅部分去除果皮，对种实萌发速度影响不大，但可影响发芽率，这和前人对核果类种子萌发的研究一致。Lipe等[12]的研究表明，核果类木质化的内果皮，具有较强的机械阻力，是核果类如桃种子难以发芽的主要因素。去除内果皮可减少机械阻力，同时改善种子对水分的吸收[13]，从而促进种子的萌发。有研究表明，完全去除果皮(壳)也能促进种子的萌发速度[14]。不过在大叶榄仁育苗生产上，全部去除果皮，一方面由于增加工序，会增加生产成本，另一方面由于大叶榄仁内果皮较硬，与种子有一定的粘联，在去除果皮过程中容易损伤种子，因此在生产中采取完全去除果皮(壳)的方式育苗难于做到。

PEG-6000溶液对保留全部果皮的大叶榄仁种实不具有引发作用，与其厚实的果皮通透性差有关。研究表明，硬实类的果皮，除具有较强的机械阻力外，其透水性、透气性都比较差[13][15-16]，因此，PEG-6000溶液难于渗透果皮对种子起引发作用，而去除部分果皮后，通透性增加，引发效果得以体现，这也是本实验中去除外、中果皮和部分内果皮后，PEG-6000引发效果明显的原因。

PEG-6000对大叶榄仁种实萌发的引发效应除了体现在提高发芽率外，还极大地提高了发芽速度，这一点在生产实践中有较大的意义。一方面缩短育苗时间，减少了长时间萌发中种实发霉腐烂的风险，降低了生产成本；另一方面缩短发芽时间，可进行快速育苗，提高生产效率，同时可促进大叶榄仁种实在室内盆栽制作上的应用[17]，满足普通大众美化环境的需要，从而加大推广应用范围，产生更大的经济效益。