金昌地区无偿献血者血液样本血清学和核酸检测情况分析

杨静 梁丹丹

【摘要】目的：了解金昌地区无偿献血者血液样本血清学检测和核酸检测情况。方法：分别用2种ELISA试剂对我市2017年至2019年14038份无偿献血者样本进行HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体、抗-TP检测，对ELISA检测阴性的样本检测HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA。对HBsAg-/HBV-DNA+献血者标本进行血清学补充试验。结果：14038份血液样本ELISA检测共检出阳性188份，阳性率为1.339%，剩余13850份ELISA阴性样本核酸检测检出阳性26份，均为HBV-DNA+。26份HBsAg-/HBV-DNA+样本血清学补充试验中有24份样本抗-HBc呈阳性反应（R），阳性率占92.31%，HBsAg和HBeAg均为阴性。结论：金昌地区无偿献血者血清学检测阳性率较高，献血人群中有较高的梅毒携带者，应采用金标试剂进行献血前筛查。献血者血液样本HBsAg经ELISA检测合格后，通过输血传播HBV风险仍然较高（188/10万），选择ELISA联合核酸检测模式能有效降低血液病毒窗口期、OBI等输血残余风险。

【关键词】血清学检测;核酸检测;无偿献血

[中图分类号]R512.62 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2020）15-00-02

《血站技术操作规程》（2019版）将血液检测策略由原来的两遍酶免修改为HIV、HBV、HCV应至少采用核酸和血清学试剂各检测一次，对于HIV、HBV、HCV酶免检测反应性标本可不再进行核酸检测[1]。本论文对金昌地区无偿献血者血液样本血清学检测和核酸检测情况进行了统计和分析，目的皆在通过数据充分了解样本检测质量，研究制定更为合理的血液检测策略，在降低血液报废率的同时进一步提高血液检测质量。

1 材料与方法

1.2材料 收集我市2017年至2019年无偿献血者血液样本14038份，所有样本经HBsAg胶体金试剂（英科新创（厦门）科技有限公司）和ALT（QL1000多通道生化分析仪）初筛合格。

1.2试剂 ELISA检测HBsAg、抗-HCV、抗-TP分别由北京万泰生物药业和英科新创（厦门）科技有限公司提供。HIV抗原/抗体由BIO-RAD和北京万泰生物药业提供;核酸检测试剂（PCR荧光法）由上海浩源生物科技有限公司提供;质控品均由北京康徹斯坦生物提供。所用试剂和质控血清均在有效期内使用。

1.3仪器 ELISA采用Uranus AE120全自动酶免分析仪（深圳爱康）;核酸检测设备为JANUAS核酸纯化仪，EZ Bead核酸提取仪，ABI7500荧光定量PCR仪。

1.4血清学检测 使用两种厂家试剂对所有样本进行HBsAg、抗HCV、HIV抗原/抗体、抗-TP检测，双试剂检测均为阴性则判定为血清学（ELISA）检测阴性;双试剂阳性或单试剂为阳性及灰区则判定为血清学（ELISA）检测阳性。

1.5核酸检测 采用荧光PCR法对ELISA检测阴性标本进行核酸检测，先用8份样本合并为1个Pool的方式检测HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA，合并检测结果出现反应性时，挑出对应Pool中的样本进行单人份检测，结果为阳性者判定为核酸检测阳性。

1.6血清学补充检测 对核酸检测HBV-DNA+者，血浆袋取样后外送定量检测HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc。

2 结果

2.1血清学（ELISA）检测结果 14038份样本HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体、抗-TP血清学检测，不合格率为1.339%，具体检测结果见表1。

2.2核酸检测结果 ELISA检测均阴性的13850份样本核酸检测检出阳性26份，其中HBV-DNA+26份，阳性率为0.188%，HCV RNA 0份，HIV RNA 0份。

2.3核酸检测阳性样本血清学补充试验结果 26份HBsAg-/HBV-DNA+乙肝五项结果中，24份样本抗-HBc呈阳性反应（R），抗-HBc阳性率为92.31%，检测结果见表2。

3 讨论

14038份样本HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体、抗-TP血清学检出阳性188份，不合格率为1.339%，高于何辉[2]报道的0.64%，其中抗-TP阳性率最高，为0.442%，说明金昌地区献血人群中梅毒携带率人数较多。其次是乙型肝炎病毒（HBV）感染数量较多，阳性率为0.399%，目前乙型肝炎病毒酶免检测试剂主要用于HBsAg的检测，在隐匿性感染、血清转换前窗口期等情况下易发生HBV漏检。第三为丙型肝炎，阳性率为0.370%，高于谢家日[3]报道的0.16%，低于凉山地区0.53%的抗HCV阳性率，我国约有3.2%人口感染HCV，感染人数高除与献血人群结构有关外，还与检测试剂有关，采供血机构用于血液筛查的诊断试剂灵敏度高而特异性又相对较低，因而存在相当比例的假阳性，尤其是ELISA检测单试剂反应性标本，假阳性率更高[4]。第四为艾滋病，此次分析结果显示金昌地区献血者艾滋病阳性率为0.128%，与实际确认阳性率平均为0.142‰（2/14038）比较，低于全国HIV感染率，这与当地的低流行因素有关，但假阳性率偏高，应进一步分析原因。

因血清学抗原抗体检测“窗口期”较长，而核酸检测能显著缩短病毒检测的窗口期，提高病毒的检出率，降低输血传播病毒的残余危险度[5]，本次核酸检测结果中，13850份ELISA检测阴性的血液样本采用核酸检测后，检出阳性样本26份，均为HBV-DNA+，该比例较高（188/10万），说明ELISA联合核酸检测可优势互补，能降低因ELISA“窗口期”漏检而导致的经输血传播HBV的风险，有助于进一步提高血液检测质量。

血清学补充试验中，26例HBsAg-/HBV-DNA+样本有24例抗-HBc呈阳性反应（R），抗-HBc阳性率占92.31%，其中2例（7.69%）仅抗-HBc阳性;6例（23.08%）抗-HBs和抗HBc同时呈阳性反应;11例（42.31%）抗-HBe和抗HBc同时呈阳性反应;5例（19.23%）抗-HBs、抗HBe、抗HBc均呈阳性反应。抗-HBcAb阳性的献血者不宜献血，研究发现这部分献血者处于感染窗口期或属于隐匿性HBV感染。1例（3.85%）抗-HBs呈阳性反应，此类献血者可能之前注射过疫苗但仍被病毒感染。另有1例（3.85%）为HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc均阴性，是否为“窗口期”和或乙肝“隐匿性”感染，还需对献血者进行后续追踪检测[6]，HBsAg和HBeAg均为阴性。

综上所述，我们应增加献血前梅毒快速筛查，降低源头不合格血液的采集，同是应选择联合检测模式对献血者血液标本进行检测，以降低经输血传播病原体风险发生率。

参考文献

[1] 赵艳梅， 李艳， 史志旭， 毕星秀等无偿献血者标本血清学和核酸检测情况分析临床血液学杂志[J]. 2019. 32（8）： 604-608.

[2] 何辉. 韶关市无偿献血者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP检测结果分析[J]. 中国国境卫生检疫杂志， 2019， 42（01）： 56-58.

[3] 谢家日. 南宁地区无偿献血人群HCV筛查阳性情况分析[J]. 检验医学与临床， 2019， 16（15）： 2158-2160-2163.

[4] 王瑞， 葛红卫， 黄力勤， 等. 使用相同抗-HCV ELISA试剂的6家血站实验室灰区设定分析[J]. 中国输血杂志， 2018， 31（2）： 105-109.

[5] 王志宏， 余东娟. 血清学与核酸检测对献血者血液筛查结果的对比分析[J]. 广西医科大学学报， 2017， 34（3）： 452-454.

[6] 何水珍， 苏成豪， 沈理通， 等. 厦门市自然人群中乙型肝炎病毒隐匿性感染状况调査[J]. 中华预防医学杂志， 2015， 49（2）： 132-136.