HPV-DNA结合TCT检查筛查宫颈癌的临床意义

汤海华 区佩雯

【摘要】目的：探讨宫颈癌人乳头瘤病毒（HPV）-DNA基因分型检测结合液基薄层细胞学（TCT）检查筛查宫颈癌的临床意义。方法：本研究纳入2016年1月～2019年12月间在我院进行宫颈癌筛查的疑似宫颈病变者206例作为研究对象，所有患者均行宫颈病理学活检、HPV-DNA基因分型检测、TCT检测，分析诊断结果。结果：TCT联合HPV-DNA分型检测的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均明显高于TCT检测、HPV-DNA分型检测单一检查结果，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：TCT联合HPV-DNA分型检测诊断早期宫颈癌准确率较高，能够为医务人员治疗提供可靠参考依据，可在临床进一步推广。

【关键词】宫颈癌;人乳头瘤病毒;HPV-DNA荧光定量分析;液基薄层细胞学检查

[中图分类号]R737.33 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2020）14-0-02

宫颈癌是世界上居于第二位的妇科恶性肿瘤，仅次于乳腺癌，患者在早期无典型的临床表现，难以及时发现，严重危害女性的身心健康和生活质量。据相关流行病学研究发现，在发展中国家中，宫颈癌的发病率和致死率明显高于其他地区的发病率，且其发病特点有趋向于年轻化的趋势[1]。我国作为典型的发展中国家，宫颈癌一级预防相较于国外较为落后，多数患者仅在出现明显症状后才会到院就医，错过最佳治疗时机，致使病情加重，手术范围扩大，对患者身体造成较大损伤，即使采用化疗、放疗手段仍会加大患者治疗痛苦，严重者甚至危及生命。因此采取何种有效的筛查和诊断方法以提高宫颈癌的诊断准确性，是当前妇科临床关注的重点问题。人乳头瘤病毒（H PV）感染是导致宫颈癌前病变及宫颈癌的主要致病因素[2]。HPV基因分型检测是目前临床筛查宫颈癌的一项较好的技术，而液基薄层细胞学检查（TCT）也是宫颈癌筛查的常用有效方法之一，但二者的诊断效果及经济成本各异。基于此本研究TCT联合HPV-DNA分型检测诊断早期宫颈癌的价值作如下探讨。

1 资料与方法

1.1一般资料 本次研究纳入在我院进行宫颈癌筛查的疑似宫颈病变者206例作为研究对象，病例选取的起始时间为2016年1月，截止时间为2019年12月，患者的年龄区间在35～75岁，平均年龄为（45.50±5.45）岁;产次0～4次，平均（1.89±0.54）次。所有患者行宫颈病理学活检、HPV-DNA基因分型检测、TCT检测，以宫颈病理学活检为检验标准，HPV-DNA基因分型检测、TCT检测作为单一组，以HPV-DNA基因分型检测、TCT检测联合检测作为联合组。

纳入标准：所有研究对象均已婚，临床出现宫颈糜烂、宫颈息肉、白带增多、阴道分泌物增加等症状;均自愿签署知情同意书。排除标准：合并心、肝、肾等重要器官功能障碍者;合并宫颈上皮病变史、宫颈手术或子宫切除史者;精神状态、认知功能异常，无法正常配合实验者。

1.2方法 宫颈病理学活检：在阴道镜下在宫颈3、6、9、12点及可疑区域采集细胞样本进行多点活检，并将样本送至实验室进行病理组织学活检。诊断标准：以宫颈组织病理学检查结果发现有恶性病变。

TCT检测：所有患者均避开月经期，近几天无阴道冲洗、未用药，由妇产科医生用专用宫颈刷采集患者样本，取宫颈管口鳞柱交界部位具有可疑病变区域脱落的细胞，放置于专用的液基细胞保存液，及时送检，采用巴氏染色、晾干封片，用生物安全柜、液基薄层细胞制片分析系统进行检测。诊断标准：子宫颈表面细胞中存在变异细胞。

HPV-DNA基因分型检测：所有患者均避开月经期进行取样检测，将窥阴器插入患者的阴道中;扩开阴道，暴露宫颈，采用专用宫颈刷由妇产科医生探入宫颈管内取样，在宫颈管内旋转5～6圈;将毛刷头折断保存于盛有细胞保存液的无菌专用样本收集管中并及时送检。采用美国D igeneg HPV-DNA检测系统，TL988Real-fimePCR基因扩增仪，台式离心机，用PCR荧光法检测HPV-DNA，标本的提取、扩增、杂交、洗膜及显色等全过要严格参照本试剂盒说明书和仪器标准操作规程进行操作。监测结果在控且“G Lobin位点”与探针均同时显色为此实验结果的有效条件。诊断标准：HPV-DNA感染高危型。

1.4统计学处理 将患者信息输入Excel表格后进行分组。分组数据输入SPSS20.0统计学软件加以处理，定量资料以（_x±s）形式表示，采取t检查对组建数据进行统计分析;定性资料以n，%进行标示，采取χ2 检验进行统计分析;以P小于0.05提示数据有差，具有统计学意义。

2 结果

2.1宫颈病理学活检 结果显示，在206例LCT检查确诊阴性接触性出血患者中，宫颈组织病理学活检，阳性有68例，阴性有138例，早期宫颈癌的诊断率为33.01%（68/206）。

2.2 TCT检测、HPV-DNA分型检测及TCT联合HPV-DNA分型检测 TCT联合HPV-DNA分型检测的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均明显高于TCT检测、HPV-DNA分型检测单一检查结果，差异具有统计学意义（P<0.05），见表1。

3 讨论

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，近几年来，随着女性生活压力的加大以及生育观念的开放等诸多因素影响，其发病人数呈现出逐年上升趋势，降低女性及其家属幸福指数，引起社会各界的广泛关注。由于宫颈癌发病与进程均需经历数年甚至数十年，有学者提出，若在患者发病初期即给予确诊，尽早采取有效治疗措施，遏制病情发展，对于预防宫颈癌变具有十分重要的意义。以往临床上多采用宫颈活检的方法，但具有检测标本收集难、检测时间长的缺陷，假阴性、漏诊现象普遍存在，使用范围具有一定局限性。目前，HPV-DNA基因分型檢测和TCT检测均是临床上常用的筛查早期宫颈癌的方法。

发生HPV感染是诱发宫颈癌的主要危险因素之一，HPV是一组无包膜的双链的DAN病毒，具有较高的特异性，会引起皮肤、黏膜异常增生，并导致多种良恶性病变[3]。目前可通过HPV-DNA基因分型检测测定高危型HPV病毒，可用于筛查在宫颈癌。同传统筛查方法对比，采用DNA荧光定量分析检测方法具有操作简便、快捷、敏感性高、特异性强等优点，不会对患者正常组织产生额外危害，患者在完成检测后也不会表现出明显并发症，获得了医护人员以及患者的广泛认可。因此目前已被广泛用于HPV基因分型检测[4]。同时该方法比传统的宫颈癌筛查方法还可更早的发现宫颈癌前病变，能够预防癌症发生，有利于早期癌前病变的诊断与治疗，能够降低宫颈癌的发病率[5]。TCT检测技术是一种经美国FDA认证的比较先进的宫颈癌筛查方法，在临床上得到了广泛的应用，其可避免血压、宫颈黏液对受检者宫颈标本的干扰，提高其检测的在准确度，在宫颈癌的早诊断、早治疗中有较高的应用价值，可为临床治疗提供更为可靠的依据[6]。但是单独使用HPV-DNA荧光定量分析检测方法和单独的TCT检测减法用于诊断宫颈癌及宫颈高度病变均有一定的漏诊率，因此临床考虑可以将两种方法联合应用[7]。

通过联合检查，可以发挥互补作用，从而提高宫颈癌筛查的准确率和敏感性，并有效反映出肿瘤的恶性程度及生物学行为特点，进而为临床的后续治疗提供有效的指导[8]。本组研究发现，TCT联合HPV-DNA分型检测的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均明显高于TCT检测、HPV-DNA分型检测单一检查结果，差异具有统计学意义（P<0.05）;这一结果与张秀梅[9]的研究结果相一致。宫颈癌处于不断的发展过程，在长期的病变中宫颈细胞会发生形态变化，因而HPV检测比比细胞学有较高的检出率，而将TCT联合HPV-DNA分型检测用于宫颈癌及癌前病变的筛查中可有效提高检出率和敏感性，还可预防宫颈癌的发生。

综上可以看出，TCT与HPV-DNA分型检测两种检查方法已经日趋成熟，但是单独采用TCT检测、HPV-DNA分型检测均存在局限性和不足之处，而通过采取TCT联合HPV-DNA分型检测可以提高诊断的敏感性、特异性和准确性，此方法在临床中有着更高的应用价值。

参考文献

[1] 杨颖， 陈厚霖. 探讨HR-HPV联合TCT检测在宫颈癌筛查中的临床意义[J]. 新疆医学， 2016， 46（9）： 1178-1179.

[2] 李瑛. 肿瘤标志物联合TCT与HPV DNA检测在宫颈癌及癌前病变中的临床意义[J]. 现代中西医结合杂志， 2016， 25（1）： 92-93.

[3] Hu H， Zhao J， Yu W， et al. Human papillomavirus DNA， HPV L1 capsid protein and p16（INK4a）protein as markers to predict cervical lesion progression[J]. Arch Gynecol Obstet. 2019， 299（1）： 141-149.

[4] 陈芬， 蔡德正， 陈派生. 宁德地区HPV联合TCT检测在宫颈癌前病变及宫颈癌筛查中的价值研究[J]. 中国实用医药， 2016， 5（3）： 101-102.

[5] 彭桂英. 研究TCT联合HPV-DNA分型检测在宫颈癌筛查中的应用[J]. 养生保健指南， 2017， 14（22）： 56-57.

[6] 唐移忠， 张书忠， 余险峰， 等. TCT和HPV联合检测在宫颈癌和癌前病变临床筛查的应用价值[J]. 解放军预防医学杂志， 2019， 6（5）： 212-213.

[7] 姚茂琼. TCT和HPV-DNA配合阴道镜在宫颈病变中的临床意义[J]. 中国社区医师， 2016， 32（17）： 131-132.

[8] 任建民. TCT联合HR-HPV检测在宫颈癌及癌前病变筛查中的临床意义[J]. 医学理论与实践， 2019， 8（15）： 86-87.

[9] 张秀梅. 阴道镜下HPV-DNA分型检测和TCT检测在筛查早期宫颈癌和宫颈上皮内瘤r变中的临床意义[J]. 当代医药论叢， 2018， 16（16）： 84-85.