化学发光法与酶联免疫吸附法进行HIV抗体检测效果分析

李续亮

（山西省肿瘤医院检验科，山西 太原 030013）

HIV是导致艾滋病（AIDS）主要因素，关于HIV的传播目前已成为社会公共卫生重点防护对象。AIDS作为免疫缺乏综合征，能够严重损害患者的免疫系统，导致免疫功能最终丧失[1]。HIV主要由血液、性传播以及母婴三个主要途径传播，目前性传播成为最主要的传播方式，尤其是男男性传播。早期发现HIV病毒可以提高治疗效果，帮助医生确诊并制定方案。目前关于HIV病毒的筛查方法主要结合实验室HIV抗体检查进行明确，本次研究将ELISA以及ECLIA应用其中，分析两种监测方法的应用效果。结合我院110怀疑HIV感染者展开研究，资料如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年11月～2019年12月我院110怀疑HIV感染者作为研究对象。所有受检者均接受酶联免疫吸附（ELISA）及化学发光（ECLIA）检测。受检者中男58例，女52例，年龄（19～58）岁，平均年龄（38.5±6.3）岁，是否有性生活（是87例，否23例）。采取血液标本后不经溶血和清亮处理，在2～6摄氏度恒温下储存。

1.2 方法

1.2.1 ELISA

采取双抗原夹心法，准备聚苯乙烯板，并将抗体与蛋白质稀释后加入实验反应孔中[2]，规格为0.1 mL/孔，加入后放置在4摄氏度恒温状态下储存12 h，取出聚苯乙烯板后将反应孔中溶液倒出，将反应孔充分洗涤（使用缓冲液），将待检标本加入孔内，流出空白孔以及对照孔，其余孔内加酶标抗体放置在37摄氏度恒温状态下60 min，随后使用TMB溶液显色。

1.2.2 ECLIA

采取KPS-PM型号的化学发光法分析仪，首先展开免疫分析，其次制作抗原并结合辣根过氧化氢物酶完成标记。清洗试剂盒后将受检标本加入，并将发光底物加入展开检测。

1.3 评价指标

对所有受检血样标本均行ELISA及ECLIA检验，根据检测结果评估两种监测方法下的确诊率、误诊率以及漏诊率。以最终的免疫印迹（WB法）试验结果作为金标准，评估两种检测方法的可信度。

1.4 统计学方法

2 结 果

经ELISA及ECLIA检验后发现，与金标准的确诊率（92.7%）相比，ECLIA检验后确诊率（91.8%）更接近，漏诊率为（0.9%），误诊率为（0.9%）；ELISA检验后确诊率为（82.7%），漏诊率为（4.5%），误诊率为（5.5%）。与ECLIA相比误诊率以及漏诊率相对较高，确诊率较低，检测结果存在差异，差异有统计学意义（P＜0.05）。如表1。

表1 ELISA及ECLIA检验结果评价[n（%）]

3 讨 论

HIV病毒感染存在三个分期（急诊期、无症状期、艾滋病期），不同阶段患者所表现的症状类型存在差异。目前关于HIV病毒的检查主要结合实验室抗原检查为主，除此之外机体免疫功能检查，致病性感染以及病原体检查也是常用手段，但相比之下HIV抗体检测的临床可信度更高。其中主要包括ELISA及ECLIA两种，但目前HIV检测的干扰因素增加，临床检验结果的可信度仍待考究。检测时较高的特异度以及敏感度均是证明检验方法可靠的有力依据，而本文结合最终的WB法试验结果作为金标准，观察两种检验方法的诊断准确率及误诊和漏诊率。

研究结合我院110怀疑HIV感染者作为研究对象，结果发现：ECLIA检验后确诊率较ELISA高，漏诊率误诊率较ELISA低，检测结果存在差异，差异有统计学意义（P＜0.05），这说明ECLIA检验HIV时的可信度相对较高。国内临床诊断HIV感染时主要以血清病毒抗体检测为标准，抗HiV抗体是判断患者有无感染的重要依据，而将病毒与相关抗原作为辅助手段，这是因为HIV难以被完全清除，一般患者将终生持续感染，所以检测体内抗体，便能判断病毒存在与否。以往常采用胶体金法予以检测，具有仪器设备少、检测成本低以及快速简单的应用优势，然而胶体金法尚存在敏感性低、难以实施实验室质控、无统一检测标准等缺点，所以极易漏检，不过可用于小型实验室，用以检测急症患者或HIV抗体。另外，ELISA在检测HIV时具有下列优势：（1）可结合抗体/抗原，保留其免疫活性；（2）能够形成酶标记抗体/抗原，既保留其免疫活性，也可保留酶的活性；（3）按照测定流程将酶标记抗体/抗原、受检样本置于固相载体上，可促成免疫复合物形成；（4）经由洗涤作用，能够分离免疫复合物，使固相载体上的物质达成一定比例，再加入底物，可以生成有色产物，有助于明确待测物质水平；但是由于ELISA需要分离结合态抗体/抗原、游离态抗体/抗原，所以检测时需反复洗板并加样，可增大误差概率，并且由于酶标板孔间有所差异，也容易增大变异系数，导致假阳性率升高，此外，ELISA操作繁琐，往往需要1～2 h才能得到结果，所以判断难度较大。ECLIA是结合了电化学发光技术、生物素-亲和素技术以及磁性微珠包被技术的一项检测技术，具有较高灵敏度，能够大幅减少批间、批内误差，获取准确临床结果，并且由于检测期间在流动、封闭的系统中实施，可避免交叉污染，加之试剂稳定，所以结果较为可靠；另外，需要特别提出的是，ECLIA分析时间较短，仅需20 min便能得出临床结果；此外，较之ELISA，ECLIA可测定较大线性范围，能够高出ELISA4个数量级，可预防前带倒钩所致假阴性情况，重复性以及稳定性均十分突出，便于批量化分析，可缩短诊断窗口期，不过不容忽视的是，ECLIA应用成本较高，难以在基层医院推广。

综上所述，HIV检测时采取化学发光法与酶联免疫吸附法两种检验方法后，所获得的检测结果存在差异，其中ECLIA的检验结果更有可信度，但ECLIA不适合室间质控的检测，容易发生漏检。