肠炎1号对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者的疗效

郭志伟 徐跃军 唐迎春 车浩 陈艳 黄婷 孙易娜

摘要 目的：觀察肠炎1号中药液对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者的疗效。方法：选取2017年8月至2018年8月武汉市第八医院收治的肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者70例作为研究对象，按随机数字表法随机分为对照组和观察组，每组35例。对照组于美沙拉嗪缓释颗粒常规治疗，观察组在对照组基础上加用肠炎1号中药液。治疗后评估患者治疗前后的临床症状及疗效。检测并比较患者外周血清中T细胞相关炎性反应递质的水平，比较2组治疗前后免疫组织化学阳性细胞分布面积。结果：治疗后，对照组治疗有效率为42.86%，明显高于观察组的65.71%，差异有统计学意义（P<0.05）;2组患者白细胞介素-17（IL-4）和IL-4和IL-10水平较治疗前升高，IL-17和γ干扰素（IFN-γ）水平降低，IFN-γ/IL-4和IL-17/IL-10的比值较治疗前降低，但观察组降幅更明显，差异有统计学意义（P<0.05）。2组患者NLRP-6、Caspase-1、IL-18基因降低，观察组比对照组降低更明显，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：肠炎1号中药液对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎具有较好的治疗效果，并能够促使T细胞Th1/Th2及Th17/Treg介导炎性反应递质朝炎性抑制方向转化。

关键词 肠炎1号中药液;肝郁脾虚型;溃疡性结肠炎;症状积分;IFN-γ/IL-4比值;IL-17/IL-10比值;炎性抑制;治疗效果

Abstract Objective：To observe the effects of Traditional Chinese medicine （TCM） solution of enteritis No.1 on patients with ulcerative colitis of liver stagnation and spleen deficiency.Methods：A total of 70 patients with liver stagnation and spleen deficiency type ulcerative colitis treated in Wuhan No.8 Hospital from August 2017 to August 2018 were selected as the research subjects，and were divided into a control group and an observationgroup according to the random number table method，with 35 cases in each group.The control group received conventional treatment with mesalazine sustained-release granules，and the observation group was supplemented with enteritis No.1 TCM solution on the basis of the control group.After the treatment，the clinical symptoms and efficacy of patients before and after treatment were evaluated.The contents of T-cell-related inflammatory cytokines in the serum of peripheral blood of patients were detected and compared，and the distribution area of immunohistochemically positive cells before and after treatment was compared between the 2 groups.Results：After treatment，the effective rate of treatment was 42.86% in the control group，significantly higher than 65.71% in the observation group （P<0.05）.The levels of IL-4 and IL-10 in the serum of the 2 groups were higher than those before treatment，and the levels of IL-17 and IFN-γ were lower than those before treatment.The ratio of IFN-γ/IL-4 and IL-17/IL-10 in the 2 groups was lower than that before treatment，but the reduction in the observation group was more significant （P<0.05）.The NLRP-6，Caspase-1，and IL-18 genes were decreased in the 2 groups，but observation group was more significantly reduced than the control group （P<0.05）.Conclusion：Enteritis No.1 TCM solution has a good therapeutic effects on ulcerative colitis with liver stagnation and spleen deficiency，and can promote T1 / Th2 and Th17 / Treg-mediated transformation of inflammatory cytokines towards inflammatory inhibition.

Keywords Enteritis No.1; Traditional Chinese medicine liquid; Liver stagnation and spleen deficiency type; Ulcerative colitis; Symptom scores; IFN-γ / IL-4 ratio; IL-17 / IL-10 ratio; Inflammatory inhibition; Therapeutic effects

中图分类号：R289.5;R574.62文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.13.023

溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）好发于大肠黏膜层，临床中患者常以腹痛、腹泻、脓血便等作为首诊症状[1]。研究表明UC的发病机制涉及到遗传、免疫、生活环境及肠道菌群等多种方面，既往研究得出T细胞介导的Th1/Th2，Th17/Treg免疫平衡失调则被公认为UC发病最重要的免疫因素[2]。UC患者在中医中被归属为病变在肠的“痛”“泻”范畴。中医相关研究还表明，溃疡性结肠炎发病多为脾肾虚弱，血瘀气滞为标，UC患者多有情志不畅，肝气郁结[3]。肠炎1号中药液方剂源自《伤寒论》加减，由白头翁、黄柏、黄芪、金银花、地榆炭、侧柏叶、荆芥炭、枳壳、槐花、小薊、柴胡、党参、升麻、当归、陈皮等组成，功效为清热利湿，消肿止痛，益气健脾，收涩止泻，凉血止血，化腐生肌，促进溃疡愈合，治疗效果较好[4-5]，其作用机制目前考虑为利用中医药来调节T细胞介导的炎性反应。我们观察肠炎1号中药液对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者疗效，及对T细胞Th1/Th2及Th17/Treg的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年8月至2018年8月武汉市第八医院收治的肝郁脾虚型溃疡性结肠炎患者70例作为研究对象，按随机数字表法随机分为对照组和观察组，每组35例。对照组中男20例，女15例，年龄18～55岁，平均年龄（40.9±11.2）岁，病程0.5～6年，平均病程（3.4±1.3）年。观察组中男23例，女12例，年龄19～56岁，平均年龄（41.9±13.8）岁，病程1～5.5年，平均病程（3.2±1.5）年。2组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究患者或家属签署知情同意书。并经医院伦理委员会批准（伦理审批号：201708）。

1.2 诊断标准

UC的诊断依据《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见》[6];肝郁脾虚证的诊断标准依据《溃疡性结肠炎中西医结合诊疗指南（草案）》[7]。

1.3 纳入标准

1）符合上述诊断标准;2）无相关心脑肺等合并疾病;3）入选患者年龄范围为17～56岁;4）试验取得患者本人及其家属知情同意。

1.4 排除标准

1）除外UC的其他IBD，如克罗恩病、细菌性痢疾、肠结核等;2）一过性肠炎等疾病，如放射性肠炎、缺血性肠炎等;3）存在严重的循环系统、消化系统、内分泌系统疾病等;4）既往有肠道手术病史;5）既往曾服用糖皮质激素类等药物;6）妊娠哺乳期妇女。

1.5 脱落与剔除标准

脱落标准：研究对象签署知情同意书并筛选合格进入临床试验但没有完成临床试验全程的观察的病例（不良事件、患者失访、患者主动撤回知情同意书）。

剔除标准：违反方案操作病例，违反方案合并用药、资料不全影响疗效及安全性判断。

1.6 治疗方法

对照组患者给于美沙拉嗪缓释颗粒治疗，每日早晚各2次，每次1袋。观察组患者在常规用药基础加用肠炎1号中药液（白头翁30 g、秦皮20 g、黄柏20 g、黄连20 g、黄芪20 g、金银花20 g、地榆炭20 g、侧柏叶10 g、荆芥炭10 g、枳壳10 g、槐花10 g、小蓟10 g、柴胡10 g、党参10 g、升麻10 g、当归10 g、白术10 g、陈皮10 g）治疗，中药处方均由医院中药房提供，将中药煎煮3次，第1次煮1 h，第2、3次各煎煮约40 min，各滤取煎液，合并浓缩，蒸馏水调至全量，分装，115 ℃蒸汽消毒30 min，冷却后贴签即得。该品为棕褐色液体，100 mL/次，2次/d。所有患者均连续用药2个疗程，每个疗程2周。

对照组所用美沙拉嗪缓释颗粒为住院药房提供，产地为上海爱的发制药有限公司（500 mg×10袋）;观察组用白头翁、秦皮、黄连、黄芪、金银花等肠炎1号中药液药材为中药房提供。

1.7 观察指标

观察患者腹痛、腹泻、腹泻次数、脓血便等，临床症状积分评价依据《溃疡性结肠炎中西医结合诊疗指南（草案）》标准。肠镜下黏膜积分评定标准采用Baron评分标准。治疗前后采集2组患者离心外周血，利用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测患者外周血血清中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-17（IL-17）和γ干扰素（IFN-γ）的水平，分析同一样本的不同细胞因子的数据得出IFN-γ/IL-4，IL-17/IL-10的比值。T细胞介导4种炎性反应递质及酶联免疫吸附试验检测试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司。NLRP-6、IL-18及Caspase-1基因等利用PCR及免疫组织化学法检测（HE染色法 ，石蜡切片染色法）。

1.8 疗效判定标准

临床疗效评定：1）完全缓解：患者无相关临床表现，肠镜观察黏膜损伤不可见或活动指数降低不少于95%;2）显效：患者临床表现明显好转，肠镜观察黏膜损伤明显减轻或活动指数降低不少于70%;3）有效：患者临床表现稍有好转，肠镜观察黏膜损伤稍减轻或活动指数降低不少于30%;4）无效：治疗后较治疗前各项指标并无好转或出现加重，或肠镜观察黏膜病变活动指数降低<30%。

1.9 统计学方法

采用SPSS 19.0统计软件分析数据，计数资料采用秩和检验，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，符合正态分布采用t检验，不符合正态分布采用非参数检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者临床症状积分比较

2组治疗后临床症状积分较治疗前降低，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组临床症状积分比对照组降低更明显，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 2组患者临床疗效比较

对照组治疗有效率为42.86%，观察组为65.71%，治疗有效率组间差异有统计学意义（χ2=4.859，P<0.05）。观察组患者临床疗效优于对照组，差异有统计学意义（Z=-2.187，P<0.05）。见表2。

2.3 2组患者T细胞相关炎性反应递质比较

治疗前2组患者T细胞相关炎性反应递质水平差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，IL-4和IL-10水平较治疗前明显升高，IL-17和IFN-γ水平较治疗前明显降低，且观察组较对照组变化更明显，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2.4 2组患者腸镜下Baron评分比较

2组患者治疗前肠镜下Baron评分无统计学差异;给与治疗后评分均较前降低，观察组降低更明显，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4。

2.5 2组患者NLRP-6、Caspase-1、IL-18免疫组织化学阳性细胞分布面积比较

2组患者治疗后NLRP-6、Caspase-1、IL-18基因及免疫组织化学阳性细胞分布面积均降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表5，图1、2。

3 讨论

中医中将溃疡性结肠炎的腹痛、腹泻等归为“泄泻”范畴，起于脾胃肠，病因多与积食湿热、肠气郁结、脾失健运相关，患者多有情志失调不畅，发为本病[8-10]。T细胞在人类机体起到调节免疫的功效，Th1、Th2、Th17、Treg4种T细胞产生不同的细胞因子，Th1/Th2通过抵御各种细胞内外致病因子参与细胞介导的免疫反应[11-13]，Th17通过抵御胞外细菌感染参与介导慢性炎性疾病，Treg细胞主要作用于机体免疫耐受，通过抑制免疫细胞的激活及作用发挥功效[14-17]。Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子可以通过相互作用维持机体平衡，当其相互之间的制约平衡被打破时，机体发生炎性反应，导致疾病[18-20]。本研究发现，与正常机体相比，IBD患者外周血中Th17细胞比例升高，Treg细胞比例降低，且Th17及其分泌的细胞因子的高水平表达，与IBD患者的C反应蛋白（CRP）等各项指标均有关联。Th17细胞可以分泌IL-17A，进而导致IBD炎性反应进一步加重，由此可见T细胞介导的免疫调控机制与IBD类疾病的发生密切相关。

肠炎1号中药液由白头翁、秦皮、黄柏、黄连、黄芪、金银花、地榆炭、侧柏叶、荆芥炭、枳壳、槐花、小蓟、柴胡、党参等组成，具有清热利湿，消肿止痛，益气健脾，收涩止泻，凉血止血，化腐生肌，促进溃疡愈合之功效。肠炎1号中药液用于治疗UC的机制有两方面，一是通过促进血清中Treg比例升高，促使IL-10、TGF-β分泌增多从而保护肠黏膜[21]。二是通过促进CD4+/CD8+T细胞的比值增高进而发挥治疗作用[22-25]。本研究发现，溃疡性结肠炎在常规治疗的基础上加用肠炎1号中药液可以有效改善患者腹痛、腹泻和黏液脓血便的症状，提高UC治疗效果。研究T细胞分泌的相关细胞因子的水平可以发现，肠炎1号中药液的调节机制是升高炎性抑制因子IL-4、IL-10的水平，降低炎性反应递质IFN-γ、IL-17水平，从而抑制炎性反应。肠炎1号中药液在临床中指导治疗肝郁脾虚型UC，可以平衡T细胞介导的炎性反应，控制肠黏膜炎性反应的进展，缓解患者的临床症状。

综上所述，肠炎1号中药液能够促使T细胞Th1/Th2及Th17/Treg介导炎性反应递质平衡朝炎性抑制方向转化。

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（2019-03-07收稿 责任编辑：张雄杰）