包装对三七粉和熟三七粉稳定性的影响研究

刘梦楠 王敏 白玉莹 徐文娟 李春帅 邹秦文 李向日 林瑞超

摘要 目的：通过考察不同包装下三七粉和熟三七粉外观性状、水分及有效成分含量等变化情况，确定包装对三七粉和熟三七粉稳定性的影响。方法：在恒温恒湿箱中对三七粉和熟三七粉进行加速试验，于0、1、2、3、6月对三七粉和熟三七粉外观性状及含水量进行考察，同时以皂苷类成分的含量作为检测指标，利用本课题组前期建立的高效液相色谱法，对三七粉和熟三七粉中的皂苷类有效成分含量进行检测，并统计分析。结果：所有样品经6个月加速试验后观察未见霉变、虫蛀等现象，外观性状基本一致，水分含量增高但其含量仍符合《中华人民共和国药典》（2015版）规定（水分含量≤14%）。三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1含量的总和及熟三七粉中人参皂苷Rk1、Rh4含量的总和无显著减少。真空与非真空2种包装状态对饮片有效成分含量的影响较小，但对饮片的吸湿性有影响。结论：PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜是较理想的包材，能保证三七粉和熟三七粉质量的稳定，真空包装可以显著降低样品的吸湿程度。

关键词 三七粉;熟三七粉;加速试验;有效成分;稳定性

Abstract Objective：To determine the effects of packaging on the stability of Radix Notoginseng powder and cooked Radix Notoginseng powder by investigating the changes of appearance，water content and effective component.Methods：In the constant temperature and humidity box，the accelerated test was carried out on Radix Notoginseng powder and cooked Radix Notoginseng powder.In 0，1，2，3 and 6 months，the appearance character and water content of Radix Notoginseng Powder and cooked Radix Notoginseng Powder were investigated.At the same time，the content of saponins was used as the detection index，and the content of saponins in Radix Notoginseng Decoction pieces was detected and statistically analyzed by the high-performance liquid chromatography established in the earlier stage of our research group.Results：After 6 months of accelerated test，no mildew，moth and other phenomenon were observed in all samples.The appearance of the samples was basically the same.The water content increased，but still met the requirements of Chinese Pharmacopoeia（2015 version）（water content ≤ 14%）.The sum of Ginsenoside Rg1，Rb1 and R1 in Radix Notoginseng Powder and the sum of ginsenoside Rk1 and Rh4 in cooked Radix Notoginseng Powder were not significantly reduced.Vacuum and non-vacuum packaging have little effects on the content of effective components，but have a significant effect on the hygroscopicity.Conclusion：The food grade aluminum-plastic composite film made of PTE / PE is an ideal packaging material，which can ensure the stability of the quality of Radix Notoginseng and cooked Radix Notoginseng.Vacuum packaging can significantly reduce the moisture absorption of the sample.

Keywords Radix Notoginseng Powder; Cooked Radix Notoginseng Powder; Accelerated test; Effective ingredients; Stability

中圖分类号：R283文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.13.008

三七为五加科人参属植物三七Panax notoginseng（Buck）F.H.Chen的干燥根及根茎[1]。其味甘、微苦，性温，归肝、胃经，具有散瘀止血，消肿止痛的功效，始载于明代刘文泰著的《本草品汇精要》一书，继而广泛流传。三七与其他中药材一样，采收后都要经过清洗并干燥。其炮制始载于明代的《万氏女科》，方法为“末”，后《本草求真》载“广产，形如人参者是。有节非。研用良”。三七的现有的饮片规格有三七粉、三七片、熟三七和熟三七粉4种。然三七质地坚硬，为了便于有效成分的溶出，临床多应用粉末规格[2]。三七粉以活血为主，而熟三七粉则以补血力胜。其主要有效成分为皂苷类化合物，药理研究证明其有补血活血、抗肿瘤等功效。目前三七药材、饮片及其中成药制剂的质量评价均已该类成分的含量作为依据。中药饮片贮藏过程中存在容易发霉、虫蛀、走油、变色、气味散失等变质现象，严重影响着中药材及其饮片的质量，进而降低药物的临床疗效[3-5]。药品的稳定性是其质量的重要评价指标之一。皂苷类化合物极性较强，且具有热不稳定性，因此有必要对三七粉和熟三七粉的稳定性进行考察。

为考察在不同包装状态下三七粉和熟三七粉的稳定性，采用PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜作为包装材料，在恒温恒湿箱内对上述三七粉和熟三七粉进行加速试验，于0、1、2、3、6月观察三七粉和熟三七粉外观性状，并计算饮片含水量，利用高效液相色谱法，以皂苷类成分的含量作为检测指标考察饮片有效成分含量的变化情况，为三七粉和熟三七粉的稳定性及质量控制提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

检测器2489（型号：UV/Vis Detector），进样器（型号：Alliance 2695），高效液相色谱仪（美国沃特世公司，型号：Waters-e2695）;色谱柱（型号：Aglient ZORBAX SB-C18）;电热恒温鼓风干燥箱（常州诺基仪器有限公司，型号：DHG-9070A）;分析天平（德国赛多利斯公司，型号：SARTORIUS BS110S）;高速万能粉碎机（北京科伟永兴仪器有限公司，型号：FW-100）;电热恒温水浴锅（北京科伟永兴仪器有限公司，型号：HH-2）;循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司，型号：SHB-III）;电子天平[梅特勒-托利多（上海）有限公司，型号：PL2002];箱式电阻炉（上海树立仪器仪表有限公司，型号：SX4-10）;电陶炉（佛山艾诗凯奇电气有限公司，型号：TL1622）。

1.1.2 试剂

甲醇（分析纯，北京化工厂，批号：20190115）;乙腈[色谱纯，赛默飞世尔科技（中国）有限公司，批号：387L-25963U];三七皂苷R1（上海源叶生物科技有限公司，批号：Y19A7H19708）;人参皂苷Rg1（上海源叶生物科技有限公司，批号：Z21S6X3601）;人参皂苷Rb1（上海源叶生物科技有限公司，批号：Z21D6X6400）;人参皂苷Rk1（成都普斯生物科技股份有限公司，批号：PS010828）;人参皂苷Rh4（成都普斯生物科技股份有限公司，批号：PS010043）;液相所用水为娃哈哈纯净水。

1.1.3 材料

PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜，三七粉及熟三七粉各三批，样品信息见表1。

1.2 方法

1.2.1 样品的制备

将每批三七粉与熟三七粉均分为10份，每份大约10 g，每批分为真空与非真空2种包装状态，每种包装状态下标记5个取样时间点，采用PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜作为包装材料，将上述的三七粉及熟三七粉在（30±2）℃，RH（65±5）%条件下进行试验，在试验期间第0、1、2、3、6个月末取样检测。

1.2.2 不同包装状态三七粉和熟三七粉的外观性状测定

以不同包装状态（真空包装与非真空包装）的三七粉与熟三七粉为考察对象，采用国际潘通色卡对不同包装状态的三七粉与熟三七粉样品进行色泽测定。

1.2.3 不同包装状态三七粉和熟三七粉的含水量的测定

依照《中华人民共和国药典》（2015版）第四部通则0832项下水分测定法中第二法烘干法测定水分。

即分别取真空包装与非真空包装三七粉与熟三七粉，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5 mm，疏松供试品不超过10 mm，精密称定，开启瓶盖在100～105 ℃干燥5 h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30 min，精密称定，再在上述温度干燥1 h，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5 mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）。以上步骤同一规格平行3次。

1.2.4 三七粉和熟三七粉的有效成分含量测定

三七作为生熟异用的典型中药，具有“生消熟补”之别，其在炮制过程中，化学成分和药理作用均发生了明显的改变，因此本研究依据先前研究，分别以人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1作为三七粉中的指标性成分及人参皂苷Rk1、Rh4作为熟三七粉中的指标性成分，根据本实验室建立的高效液相色谱分析方法，分别对其不同加速试验时期进行有效成分含量检测[6-7]。

1.2.4.1 三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的HPLC含量测定

Waters-e2695型高效液相色谱仪，Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（5 μm，4.6 mm×50 mm）;流动相为乙腈（A）-水（B）;流速1.0 mL/min;柱溫30 ℃，检测波长203 nm;梯度洗脱条件为：0～35 min，20%～20%A;35～50 min，20%～30%A;50～80 min，30%～40%A。进样量10 μL。

1.2.4.2 熟三七粉中人参皂苷Rk1、Rh4的HPLC含量测定

Waters-e2695型高效液相色谱仪，Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（5 μm，4.6 mm×50 mm）;流动相为乙腈（A）-水（B）;流速1.0 mL/min;柱温40 ℃，检测波长203 nm;梯度洗脱条件为：0～10 min，19%～33%A;10～30 min，33%～38%A;30～45 min，38%～50%A;45～60 min，50%～60%A。进样量10 μL。

1.2.5 统计学方法

采用SPSS 2.0统计软件对饮片有效成分进行两两比较，对样品有效成分进行方差分析及多样本均数两两比较，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

不同批次非真空包装的三七粉经6个月在恒温恒湿箱中进行加速试验后观察未见霉变、虫蛀等现象，外形基本一致。见表2，三七粉为均匀的灰黄色粉末，第6个月的三七粉水分含量与初始状态的三七粉水分含量差异有统计学意义（P<0.05）。见图1a、图1b，但其含量仍符合《中华人民共和国药典》（2015版）规定（水分含量≤14%）。对3批三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1的总和进行测定，由表1和图1c、图1d可知，第6个月与初始状态的三七粉有效成分含量差异均无统计学意义（P>0.05），说明样品具有稳定性较好，即PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜是较理想的包材，能保证三七粉质量的稳定。

样品采用真空或非真空方式对三七粉进行包装，在恒温恒湿箱中进行加速试验，如表2所示，观察未见霉变、虫蛀等现象，外形基本一致，三七粉为均匀的灰黄色粉末，且第6个月的真空包装与非真空包装的三七粉水分含量差异有统计学意义（P<0.05），见图2a，说明真空包装能降低三七粉的吸湿程度。对比同一批三七粉（S1）的不同包装方式，即采用真空及非真空的包装方式储存，发现不同包装方式的三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1的总和差异无统计学意义（P>0.05），见图2b，说明不同包装方式对三七粉中皂苷成分含量的稳定性影响较小。

不同批次非真空包装的熟三七粉经6个月在恒温恒湿箱中进行加速试验后观察未见霉变、虫蛀等现象，外形基本一致，见表3所示，熟三七粉为均匀的淡黄色或棕红色粉末，第6个月的熟三七粉水分含量与初始状态的熟三七粉水分含量差异有统计学意义（P<0.05），见图3a、图3b，但其含量仍符合《中华人民共和国药典》（2015版）规定（水分含量≤14%）。对3批熟三七粉中人参皂苷Rh4、Rk1的总和进行测定，由表2和图3c、图3d可知，第1、2、3、6月与初始状态的熟三七粉有效成分含量差异均无统计学意义（P>0.05），说明样品稳定性较好，即PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜是较理想的包材，能保证熟三七粉质量的稳定。

样品采用真空或非真空方式对熟三七粉进行包装，在恒温恒湿箱中进行加速试验，如表3所示，观察未见霉变、虫蛀等现象，外形基本一致，熟三七粉为均匀的淡黄色或棕红色粉末，且第6个月的真空包装与非真空包装的熟三七粉水分含量差异有统计学意义（P<0.05），见图4a，说明真空包装能降低三七粉的吸湿程度。对比同一批熟三七粉（P1）的不同包装方式，即采用真空及非真空的包装方式储存，结果见图4，发现不同包装方式的熟三七粉中人参皂苷Rh4、Rk1的总和差异无统计学意义（P>0.05），见图4b，说明不同包装方式对熟三七粉中皂苷成分含量的稳定性影响较小。

3 讨论

药品的稳定性为药品的生产、包裝、贮藏、运输条件提供科学依据，并确定药品的有效期[8-11]。药品包装材料对于药品稳定性、有效期、安全性等的影响至关重要直接影响到药品的产、供、用等[12-14]多个环节，药品包装的目的就是保证药品贮藏过程的质量，中药制剂的包装既要考虑使用方便，更要做到密封防潮，便于贮存[15-16]。

由于三七质地坚硬，为了利于有效成分的溶出，三七的饮片形式为粉末，药材经粉碎后物理特性发生改变，比表面积显著增大，易受温度、湿度、光照等环境因素影响，吸湿性是粉体的固有性质，粉体吸湿后，可产生潮解、聚集、结块，使流动性降低的现象;三七粉和熟三七粉中的主要有效成分为皂苷类化合物，其极性较强，且具有热不稳定性。现有标准对三七粉和熟三七粉的包装贮藏条件描述较简略，因此有必要对其稳定性进行研究，进而为确定适宜的包装贮藏条件及有效期提供参考[17]。经考察，三七粉及熟三七粉现多采用复合膜作为包装材料，具有一定的抗拉强度及延伸率，本课题组采用PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜作为包装材料，其具有密度小、强抗拉性、阻隔气体等优点。

加速试验是在加速条件下进行了稳定性试验，其目的是在较短时间内，了解原料或制剂的化学、物理和生物方面的变化，为制剂包装、运输等条件提供试验依据，并初步预测样品的稳定性[18-19]。加速试验一般应在（40±2）℃，RH（75±5）%条件下进行试验，在试验期间第0、1、2、3、6个月末取样检测，需要阴凉防潮贮藏的样品则在中间条件下，即在（30±2）℃，RH（65±5）%条件下进行试验，由于《中华人民共和国药典》（2015版）规定三七粉的贮藏条件为阴凉干燥处，故本课题组采用（30±2）℃，RH（65±5）%作为试验条件对包装的稳定性进行考察[20-21]。

在加速试验过程中，采用PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜作为包装材料，研究真空与非真空2种包装状态对三七粉和熟三七粉包装稳定性的影响，以三七粉及熟三七粉的外观性状、水分含量、三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1含量的总和及熟三七粉中人参皂苷Rk1、Rh4的总和作为考察指标，在稳定性6个月时，所有样品的外观性状基本一致，水分测定结果虽有统计学差异，但其含量均仍符合《中华人民共和国药典》（2015版）规定（水分含量≤14%），有效成分含量的总和无显著减少，说明粉没有破坏细胞壁，对于皂苷类成分依然有保护作用。由此可见，虽然皂苷类成分和粉末的饮片形式有较强的吸湿潮解性，高温与高强光下稳定性不够，但只要密封，阴凉干燥储存，其质量仍然较为稳定，PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜是较理想的包材，能保证三七粉和熟三七粉质量的稳定。真空与非真空2种包装状态对饮片有效成分含量的影响较小，但对饮片的吸湿性有显著影响，结果显示，真空包装可以显著降低样品的吸湿程度。且由实验结果发现，熟三七粉的吸湿度较三七粉低，可能是由于熟三七粉经过蒸制，其中的大量皂苷类成分脱糖形成稀有皂苷成分，长链的多糖蒸后断裂变成寡糖，因此降低了熟三七粉的吸湿性。通过对三七粉和熟三七粉包装贮藏稳定性的研究，证明三七粉与熟三七粉有较强的吸湿性，应该在阴凉干燥处贮藏，且密封贮藏更佳，为三七粉和熟三七粉生产工艺、包装、储存、运输条件提供了科学依据。

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（2020-06-10收稿 责任编辑：徐颖）