高频重复经颅磁刺激对重度抑郁患者血清mir-124、mir-214及炎性因子水平的影响

付可登 李松华 胡媛媛 陈蒙恩

[摘要] 目的 探討高频重复经颅磁刺激（HF-rTMS）对重度抑郁患者血清微小RNA-124（mir-124）、微小RNA-214（mir-214）及炎性因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响。 方法 选取2017年6月～2019年6月本院精神科收治的重度抑郁患者70例，按照随机数字表法将其分为对照组35例和研究组35例。两组均在口服盐酸度洛西汀肠溶胶囊基础上，对照组接受伪HF-rTMS治疗，研究组接受真HF-rTMS治疗，每周治疗5 d;两组均连续治疗8周。分别于治疗前后评估汉密尔顿抑郁量表24项（HAMD-24）评分及临床总体印象量表（CGI）评分，测定血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平，并记录不良反应情况。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测血清mir-124、mir-214水平，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清IL-6、TNF-α水平。 结果 治疗后两组HAMD-24、CGI评分均显著低于治疗前（P<0.05），且研究组明显低于对照组（P<0.05）。治疗后两组血清mir-124、mir-214水平均显著低于治疗前（P<0.05），且研究组明显低于对照组（P<0.05）。治疗后两组血清IL-6、TNF-α水平均显著低于治疗前（P<0.05），且研究组明显低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率相比，差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 应用HF-rTMS可显著改善重度抑郁患者精神状况，降低血清mir-124、mir-214水平，减轻炎症反应。

[关键词] 抑郁症;经颅磁刺激;度洛西汀;微小RNA-124;微小RNA-214;炎性因子

[中图分类号] R743.3          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2020）16-0103-04

Effects of high-frequency repetitive transcranial magnetic stimulation on serum levels of mir-124， mir-214 and inflammatory factors in patients with severe depression

FU Kedeng   LI Songhua   HU Yuanyuan   CHEN Meng'en

Department of Psychiatry， Ningbo Psychiatric Hospital， Ningbo   315032， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of high frequency repetitive transcranial magnetic stimulation（HF-rTMS） on serum microRNA-124 （mir-124）， microRNA-214 （mir-214） and inflammatory factor interleukin- 6 （IL-6）， tumor necrosis factor-α （TNF-α） levels. Methods A total of 70 patients with severe depression treated in our psychiatry department from June 2017 to June 2019 were selected and divided into the control group and the study group by the random number table method，with 35 cases in each group.On the basis of oral duloxetine hydrochloride enteric-coated capsules in both groups， the control group received pseudo-HF-rTMS treatment，and the study group received true HF-rTMS treatment. The treatment was carried out for 5 days per week， and both groups were treated continuously for 8 weeks.The Hamilton Depression Scale （HAMD-24） score and the Clinical Global Impression Scale（CGI） score were evaluated before and after treatment; serum mir-124， mir-214 and IL-6， TNF-α levels were measured， and adverse reactions were documented. Real-time fluorescence quantitative PCR （qRT-PCR） was used to detect serum mir-124 and mir-214 levels， and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to determine serum IL-6 and TNF-α level. Results The HAMD-24 and CGI scores of the two groups after treatment were significantly lower than those before treatment（P<0.05）， and the study group was significantly lower than the control group（P<0.05）.The levels of serum mir-124 and mir-214 in the two groups after treatment were significantly lower than those before treatment（P<0.05）， and the study group was significantly lower than the control group（P<0.05）. The levels of serum IL-6 and TNF-α in the two groups after treatment were significantly lower than those before treatment（P<0.05）， and the study group was significantly lower than that in the control group（P<0.05）. There was no significant difference in the incidence of adverse reactions between the two groups（P>0.05）. Conclusion The application of HF-rTMS can significantly improve the mental status of patients with severe depression，decrease serum levels of mir-124 and mir-214，and relieve inflammation.

[Key words] Depression; Transcranial magnetic stimulation; Duloxetine; microRNA-124; MicroRNA-214; Inflammatory factors

抑郁症是一种常见的情感障碍或心境障碍，发病原因复杂，临床主要表现为情绪低落，重度抑郁患者可出现自杀念头或行为。高频重复经颅磁刺激（high frequency repetitive transcranial magnetic stimulation，HF-rTMS）是一种无痛、安全可靠的抗抑郁治疗手段[1]。研究发现HF-rTMS治疗可能使西酞普兰、帕罗西汀等抗抑郁药物更快发挥作用，明显改善患者临床症状[2]。且有研究报道[3]，HF-rTMS治疗重度抑郁发作急性期患者效果显著，可显著降低汉密尔顿抑郁量表17项（hamilton depression scale-17 items，HAMD-17）评分。但HF-rTMS治疗对重度抑郁患者血清微小RNA-124（microRNA-124，mir-124）、微小RNA-214（microRNA-214，mir-214）及炎性因子水平的影响尚不清楚。鉴于此，本研究通过检测治疗前后重度抑郁患者血清mir-124、mir-214及白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平，分析HF-rTMS治疗对重度抑郁患者血清mir-124、mir-214及炎性因子水平的作用，以期为临床治疗提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年6月～2019年6月本院精神科收治的重度抑郁患者70例作为研究对象，其中男31例，女39例;年龄18～55岁，平均（33.56±7.88）岁;病程2～7个月，平均（5.04±1.37）个月。纳入标准[4]：（1）均符合重度抑郁相关诊断标准[5];（2）近期未接受抗抑郁药治疗;（3）临床资料完整;（4）自愿参与研究。排除标准[3]：（1）合并其他精神疾病者;（2）服用度洛西汀过敏者;（3）近2周内有炎症、发热史者;（4）伴有严重躯体疾病者;（5）妊娠、哺乳期女性。按照随机数字表法将70例重度抑郁患者分为对照组35例和研究组35例。对照组中，男17例，女18例;年龄18～55岁，平均（33.74±7.95）岁;病程2～7个月，平均（4.96±1.28）个月。研究组中，男14例，女21例;年龄18～54岁，平均（34.01±7.82）岁;病程2～7个月，平均（5.11±1.40）个月。本研究符合本院医学伦理委员会标准，患者均签署《知情同意书》，且对照组和研究组临床资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

两组患者均口服盐酸度洛西汀肠溶胶囊（上海上药中西制药有限公司，国药准字H20061263，規格：20 mg）治疗，2次/d，20 mg/次。

1.2.1 研究组  研究组在基础治疗上接受真HF-rTMS治疗，使用Rapid2 rTMS治疗仪（购自英国Magstim公司）进行治疗，直径为70 mm风冷“8”字型线圈，通过“标准5 cm法”确定左侧背外侧前额叶位置，以确定刺激靶点;刺激频率为10 Hz，刺激强度为100%运动阈值，每次治疗3000个刺激脉冲，1次/d，30 min/次，每周治疗5 d。

1.2.2 对照组  对照组在基础治疗上接受伪HF-rTMS治疗，将治疗仪线圈旋转90°与刺激靶点相切，作为伪刺激治疗;研究组患者的线圈中心平行于刺激靶点头皮切线，并紧贴在头皮上，作为HF-rTMS治疗。两组患者均连续治疗8周。

1.3 观察指标

1.3.1 评估汉密尔顿抑郁量表24项（Hamilton depression scale-24 items，HAMD-24）评分及临床总体印象量表（Clinical general impression scale，CGI）评分[6]  采用HAMD-24评分评估患者精神状况，<9分为正常，≥9分且<20分为可能抑郁，≥20分且<35分为抑郁，≥35分为严重抑郁症。采用CGI评分评估患者病情严重程度，评分越高病情越严重。

1.3.2 血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平测定  分别于治疗前后清晨收集患者空腹静脉血，各4 mL，离心（3000 r/min，半径6 cm）15 min，提取血清，保存于-70℃冰箱备用。采用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）检测血清mir-124、mir-214水平，以U6为内参，反应条件为95℃、2 min，95℃、5 s，56℃、5 s，72℃、35 s，反复进行35个循环;运用2-ΔΔCt计算mir-124、mir-214相对表达量。采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）测定血清IL-6、TNF-α水平，试剂盒均购自上海瑞番生物科技有限公司。

1.3.3 不良反应情况  治疗过程中不良反应主要有头痛、恶心、耳鸣、嗜睡、便秘及食欲减退，对症处理后明显好转。

1.4 统计学方法

采用SPSS18.0软件分析数据。计数资料用百分率（%）描述，行χ2检验;计量资料用均数±标准差（x±s）描述，行t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后HAMD-24、CGI评分比较

治疗前两组患者HAMD-24、CGI评分相比，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗后两组患者HAMD-24、CGI评分均明显低于治疗前（P<0.05），且研究组显著低于对照组（P<0.05）。见表1。

2.2 两组患者治疗前后血清mir-124、mir-214水平比较

治疗前两组患者血清mir-124、mir-214水平相比，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗后两组患者血清mir-124、mir-214水平均明显低于治疗前（P<0.05），且研究组显著低于对照组（P<0.05）。见表2。

2.3 两组患者治疗前后血清IL-6、TNF-α水平比较

治疗前两组患者血清IL-6、TNF-α水平相比，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗后两组患者血清IL-6、TNF-α水平均明显低于治疗前（P<0.05），且研究组显著低于对照组（P<0.05）。见表3。

2.4 两组患者不良反应发生情况比较

两组患者不良反应发生率相比，差异无统计学意义（P>0.05）。见表4。

3 讨论

HF-rTMS是一种利用磁场产生电流治疗抑郁症的有效措施，具有无创、操作简便等优势[7]。研究发现HF-rTMS可通过提高人皮质兴奋性，使血清脑源性神经营养因子水平明显升高，以影响大脑皮质代谢，这可能是HF-rTMS治疗抑郁患者的基础[8]。另有研究认为，抑郁患者通常左侧背外侧前额叶功能异常减弱，因而理论上可利用HF-rTMS刺激左侧背外侧前额叶位置治疗抑郁症[9]。胡希文等[10]研究报道，抑郁发作患者HF-rTMS治疗后HAMD评分明显降低，且可使抗抑郁药物加速起效。本研究结果发现，治疗后两组患者HAMD-24、CGI评分均远低于治疗前，且研究组远低于对照组，与胡希文等[10]研究类似，提示HF-rTMS的应用可明显改善重度抑郁患者精神状况和病情严重程度。

研究发现微小RNA（microRNA，miRNA）的异常表达可能参与抑郁症的发生、发展[11，12]。mir-124是中枢神经系统中含量最多的一种miRNA，在发育及成熟的神经系统中均有表达，其中大脑皮质中含量最高[13]。袁梅菊等[14]研究报道，首发抑郁症患者外周血mir-124水平异常升高，其水平变化可有效反映患者治疗效果，检测外周血mir-124水平有利于诊断抑郁症及评估患者预后。赵勇等[15]研究发现，抑郁症患者外周血mir-124表达水平远高于健康对照组，其水平异常升高可作为临床诊断抑郁症的有效指标。而mir-214是miRNA中一员，位于人染色体1q24.3，在心血管疾病伴抑郁症患者发生、发展中起重要作用。陈劲松等[16]研究报道，老年急性心肌梗死患者血清mir-214表达水平明显高于健康人群，其水平升高参与急性心肌梗死发生。本研究结果发现，治疗后两组患者血清mir-124、mir-214水平均远低于治疗前，且研究组患者血清mir-124、mir-214水平远低于对照组，与袁梅菊等[14]、赵勇等[15]、陈劲松等[16]研究结果相似，提示HF-rTMS治疗可显著降低重度抑郁患者血清mir-124、mir-214水平，考慮可能与HF-rTMS的应用能加速抗抑郁药物起效有关。

相关研究发现[17]，miRNA可通过抑制IL-6、TNF-α等细胞因子，抑制机体炎症反应，参与抑郁症发生、发展。抑郁症患者常伴有免疫功能下降，使促炎细胞因子水平明显升高，从而影响患者神经内分泌功能[18]。IL-6是一种单链糖蛋白，可在应激反应下参与多种生物学功能[19]。刘梅等[20]研究发现，低频重复经颅磁刺激治疗后，脑卒中所致抑郁症患者血清IL-6水平显著低于治疗前，可明显改善脑卒中抑郁症状。而TNF-α由单核细胞和巨噬细胞产生，可通过促进中性粒细胞黏附刺激机体炎症反应的发生，参与多种疾病的病理、生理过程。陆梅娟等[21]研究报道，抑郁症患者血清TNF-α水平异常升高，且经帕罗西汀治疗后其水平明显降低，其水平变化可用于评估抑郁症的严重程度。本研究结果发现，与治疗前相比，治疗后两组患者血清IL-6、TNF-α水平均显著降低，且治疗后研究组患者血清IL-6、TNF-α水平远低于对照组，与刘梅等[20]、陆梅娟等[21]研究相似，提示在口服盐酸度洛西汀肠溶胶囊基础上使用HF-rTMS治疗，对降低重度抑郁患者血清炎性因子IL-6、TNF-α水平具有积极作用。此外，重度抑郁患者在口服盐酸度洛西汀肠溶胶囊基础上应用HF-rTMS治疗，并不会明显增加治疗过程中不良反应，提示联合应用HF-rTMS安全性较高。

综上所述，重度抑郁患者使用HF-rTMS治疗效果好，可明显改善患者精神状态，治疗效果可能与患者血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平降低有关。本研究仅初步证实HF-rTMS治疗对重度抑郁患者血清mir-124、mir-214及IL-6、TNF-α水平的作用，其具体作用机制应扩大样本继续研究。

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（收稿日期：2020-01-13）