佳木斯地区RhD阴性献血者不规则抗体筛选及鉴定结果分析

王 丽

黑龙江省佳木斯市中心血站 154007

Rh血型系统属红细胞血型系统，具有极高多态性，其中，C、c、D、E、e这5种抗原在临床上与输血关系密切[1]。D抗原免疫原性较强，而RhD阴性者接触过D抗原后产生抗体的概率也相对较高[2]。筛查RhD阴性者的不规则抗体种类与性质及其产生率，对保障此群体接受输血时的安全具有重要意义。基于此，本文分析RhD阴性献血者不规则抗体的筛选与鉴定结果，旨在探讨对此群体行不规则抗体筛选的价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年1月—2019年1月佳木斯地区血液中心内经间接抗人球蛋白试验确定为RhD阴性献血者(无亲缘关系)360例的血液标本共360份。所有献血者中，男196例，女164例；年龄19～55岁，平均年龄(37.07±15.55)岁。

1.2 试剂与仪器 (1)试剂：选用单克隆IgM抗D血型定型试剂(上海血液生物医药有限公司)作为初步筛查试剂；选用人源单克隆IgG抗D血型定型试剂(上海血液生物医药有限公司)、单克隆IgG+IgM抗D血型定型试剂(加拿大Dominion公司；英国Millipore公司)确定血型；选用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体筛查细胞与谱细胞(上海血液生物医药有限公司)行不规则抗体筛选与特异性鉴定；选用单克隆抗C、抗c、抗E、抗e试剂(上海血液生物医药有限公司)对含不规则抗体献血者行Rh表型鉴定。(2)仪器：离心机(久保田-2200)、卡式离心机及孵育器(瑞士达亚美)。

1.3 方法 (1)确认血型：选用单克隆IgM抗D试剂以微量盐水法进行初步筛查，选用3类抗D试剂对初步认定为RhD阴性的标本行间接抗人球蛋白试验，只要产生凝集反应则确认为阳性，均未产生凝集反应则为阴性。(2)不规则抗体筛选与特异性鉴定：选用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型抗体筛查细胞以微柱凝胶法行不规则抗体筛选；选用谱细胞根据试管法，微柱凝胶法，对筛选结果为阳性的标本行特异性鉴定。(3)Rh表型鉴定：选用50μl RhD阴性标本的3%～5%红细胞，分别加入50μl的单克隆抗C、抗c、抗E、抗e试剂，混匀后离心15s，立即观察，有凝集反应为阳性，无则为阴性。

2 结果

2.1 不规则抗体筛选与鉴定结果 360份RhD阴性血标本中，15份(4.17%)含有不规则抗体，其中抗D抗体占比最高，为93.33%(14/15)。见表1。

表1 不规则抗体筛选与鉴定结果

2.2 含不规则抗体标本的Rh表型分布状况 15份含有不规则抗体中，Rh表型则为ccdee(53.33%)、Ccdee(33.33%)、CcdEe(6.67%)、CCdee(6.67%)；ABO血型系统的分布状况为A型(26.67%)、B型(6.67%)、AB型(20.00%)、O型(46.67%)。见表2。

表2 含不规则抗体标本的Rh表型分布状况[n(%)]

3 讨论

不规则抗体指血清中除抗A、抗B外的血型抗体，其在分布上具有复杂性、多态性等特点，不同人群不规则抗体的产生率与特异性分布也存在一定差异。目前，临床上认为Rh血型系统是红细胞血型系统中最为复杂的一种，且重要程度仅亚于ABO系统[3]。Rh血型具有较高免疫原性，抗原抗体不匹配的输血会导致自身免疫性溶血性贫血、溶血性输血反应或新生儿溶血病等病症的发生[4]。此外，RhD阴性者的不规则抗体产生率较高，故对RhD阴性者行不规则抗体筛选与鉴定，对完善地区稀有血型资料库与提升临床输血治疗的安全性具有重要意义。

车进等[5]学者对北京地区的RhD阴性献血者行不规则抗体筛选，结果检出不规则抗体3例(1.2%)。于金涛等[6]学者分析河北省血液中心的RhD阴性血标本，结果显示不规则抗体的检出率为2.41%，以抗D抗体为主，Rh表型以ccdee、Ccdee为主。本文结果显示，360份RhD阴性血标本中，4.17%含有不规则抗体，且以抗D抗体为主，RhD阴性献血者则主要分布于ABO血型系统的O型中，且表型以ccdee为主。与车进等、于金涛等的研究结果相比，本文的不规则抗体检出率偏高，且同样以抗D抗体为主。Rh血型系统中，D抗原免疫原性最高，故抗D抗体也相对多见。RhD阴性者通常会因妊娠、输血、不明原因的免疫作用而出现抗体。Rh阴性血的产妇怀有RhD阳性的胎儿时，若发生母体血液循环中进入胎儿红细胞的现象，母体免疫系统即会做出反应，产生抗体以清除胎儿红细胞D抗原[7]。临床上，行反复输血的患者可因外来Rh抗原刺激而出现抗体，下次输血时则容易发生无法匹配到相合血液的现象，影响治疗效果，甚至导致患者死亡[8]。因此，依靠本文数据可完善地区的稀有血型资料库，有利于为存在Rh抗体的患者匹配相应血型，且明确Rh阴性血者的Rh表型分布在ABO血型中的状况，可指导医护人员有计划、有目的地选择血液标本进行筛选，进而大幅提高工作效率，缩短筛选耗时，为拯救危急患者争取宝贵时间。

综上所述，佳木斯地区RhD阴性献血者的不规则抗体检出率较高，且以抗D抗体为主，RhD阴性献血者主要分布于ABO血型系统的O型中，表型以ccdee为主；此结果有利于完善该地区RhD阴性人群的血液资料库，便于临床匹配血型与进行Rh同表型输血，进而提高治疗效率与安全性。