HIK1083、MUC6蛋白在宫颈微偏腺癌中的表达及意义

陈婷婷，袁军，任鹏，傅亚军

（嘉兴市妇幼保健院，浙江 嘉兴314000）

宫颈微偏腺癌（minimal deviation adenocarcinoma of cervix，MDA）发病率低，极少见，肿瘤细胞分化好，无恶性细胞学特征，液基细胞学（TCT）和HPV检测几乎无法作出诊断，容易漏诊。早期由于缺乏明显的临床及病理学特征，确诊时多已处于晚期，故预后差[1]。HIK1083是一种新单克隆抗体，能识别胃表面粘液胶层中Ⅲ级粘蛋白中的一种特异性糖残基（α-GluNAc残基）。黏蛋白（Mucin6，MUC6）是由上皮细胞分泌的一类高分子量的蛋白，主要表达于胃体、胃窦的基底部腺细胞。本研究旨在探讨HIK1083及MUC6在MDA中的表达与意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2006年1月-2018年12月术后经病理证实为MDA的标本30例作为MDA组，均未经放疗和化疗，年龄42-69岁，平均56岁。另外选择本院同期因子宫肌瘤或腺肌病手术切除全子宫的标本30例作为正常宫颈黏膜组，年龄39-73岁，平均56岁。所有病理标本均经两位以上资深病理专家共同确诊。

1.2 方法 标本来源：HIK1083抗体购自Kanto Chemical公司（鼠源，IgM型），MUC6单克隆抗体购自北京中杉金桥生物技术有限公司，二抗、DAB显色剂购自福州迈新生物有限公司。石蜡标本切片成4mm，一抗浓度为1：20，以SP法行免疫组织化学染色，二抗浓度严格按照SP试剂盒说明，抗原修复采用高压热修复法。每次实验均设阳性对照和阴性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。免疫组化：200和400倍显微镜下随机选取5个视野，根据组织细胞的染色强度和阳性细胞数进行综合评分，HIK1083及MUC6阳性染色为棕黄或棕褐色颗粒，定位于肿瘤细胞的胞浆内，同时HIK1083有不同程度的核表达：（1）染色强度评分。无染色，阴性，得0分；浅棕色，弱阳性，得1分；棕色无背景着色或深棕色伴有背景着色，中等阳性，得2分；深棕色不伴背景着色，强阳性，得3分；（2）阳性染色细胞数评分。无阳性染色细胞，得0分；阳性染色细胞数≤25%，得1分；阳性染色细胞数25%～50%，得2分；阳性染色细胞数＞50%，得3分。染色强度评分与阳性染色细胞数评分两者乘积为最终评分：0分为阴性 （记0分）；1-2分为弱阳性 （记1分）；3-4分为中等阳性（记2分）；6-9分为强阳性（记3分）。最终评分0-1分判定阴性表达，2-3分判定阳性表达。

1.3 统计学处理 采用SPSS17.0统计软件对数据进行统计分析，计数资料以百分率表示，并采用χ2检验。

2 结果

宫颈微偏腺癌组HIK1083、MUC6的阳性表达率均高于正常宫颈黏膜组，差异有统计学意义（P＜0.01）。详见表1。HIK1083及MUC6在宫颈微偏腺癌中的阳性表达详见图1-2。

表1 两组HIK1083及MUC6的阳性表达[n（%）]

3 讨论

MDA又称“恶性腺瘤”，是发生于子宫颈的一种极高度分化的腺癌，与HPV感染无关[2]，早期诊断十分困难，误诊率和漏诊率较高，临床应予重视。目前，MDA的确诊主要依靠病理组织形态学（图3），但基层医院因缺乏经验容易漏诊；常用的免疫标记物包括 P16、P53、Ki-67、CEA 等，但特异性不高。

图1 HIK1083免疫染色阳性（SP×200）

图2 MUC6免疫染色阳性（SP×200）

图3 MDA（HE×200）

最近的研究发现，MDA的细胞形态、免疫表型与胃黏膜相似[3]，2014年WHO将其归类到高分化的粘液腺癌（胃型），由于曲妥单抗对HER2阳性的胃癌有效，使人们对MDA的认识有了重大的突破。国外研究发现，HIK1083和MUC6在MDA中有异常表达[4-5]，但国内罕见报道。本文采用免疫组化法对照观察MDA与正常宫颈黏膜中HIK1083和MUC6的表达，发现HIK1083在两组的阳性表达率分别为90%和10%，MUC6在两组的阳性表达率分别为93.3%和16.7%，两组间差异均有非常显著性意义（P＜0.01），提示在宫颈粘液上皮组织转变为MDA的过程中，可能出现了胃型粘液上皮的分化，从而表达了HIK1083、MUC6，故可作为MDA早期诊断的参考指标。

本研究还发现，MDA虽归为胃型腺癌，但也有不同的地方，胃型腺癌的肿瘤分化越高HIK1083、MUC6表达越高；肿瘤分化低则其表达低甚至缺失。这可能是MDA经历了如下进展过程：正常的宫颈黏膜→分叶状宫颈腺体增生（被认为是一种原位的癌前病变）→转化为MDA→进展为分化差的胃型腺癌[6]。在这个过程中，胃粘液蛋白的表达是阶段性的，可能和临床中表现为粘液样排出物有密切的关系，并可解释以上观点。此外，有较多研究者指出，MDA虽归为胃型腺癌，但这种病变可能是一种系统性疾病而非独立的病变：其可以累及生殖道内外多个部位，如伴发胃癌[3]、卵巢粘液性肿瘤[7]等，也与 Peutz-Jeghers（P-J）综合征[8]有关联，并发现其具有LKB1/STK11基因的胚系突变。MDA是否具有特定的分子基因改变还有待进一步研究证实。