地中海贫血基因+血红蛋白电泳联合在地中海贫血孕前诊断中的应用价值研究

陈达富，李景松，杨月星，郭 敏

台山市人民医院检验科，广东 台山 529200

地中海贫血是一种临床常见贫血疾病，主要是由珠蛋白基因表达障碍，引起肽链合成完全抑制或受限的一种显性遗传性溶血性疾病，具有发病率高、分布范围广泛、危害严重等特点，逐渐受到临床高度重视［1-2］。孕妇带有地贫基因容易遗传到下一代，如果夫妇双方均有地贫生出重度地贫的几率会大大增加。基因诊断是目前临床确诊地中海贫血的主要手段，但由于耗费高、时间长，无法在基层医院广泛推广开来［3-4］。血红蛋白电泳是目前临床诊断地中海贫血的常用方法，两种方法单一检测的检出率较低，基于以上背景，本文进一步探究地中海贫血诊断中地中海贫血基因+血红蛋白电泳的应用价值，具体如下。

1 资料与方法

1.1 基本资料

2018年1月—2019年10月为研究时段，医院伦理委员会已批准本项研究，纳入病例是台山市人民医院收治的1 758例孕妇地中海贫血患者作为实验组，以及同期门诊体检的1 758例健康女性作为对照组。实验组：年龄在22～43岁，年龄均值为（34.52±3.41）岁；BMI（体质量指数）是20～26 kg/m2，BMI均值为（23.16±1.04）kg/m2。对照组：年龄在23～43岁，年龄均值为（34.49±3.39）岁；BMI是21～26 kg/m2，BMI均值为（23.18±1.02）kg/m2。两组相比差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

纳入标准：（1）年龄在18周岁以上；（2）生命体征稳定、精神正常；（3）无器质性病变；（4）患者、家属均已签署与本项研究有关的知情同意书。

排除标准：（1）未开展研究前进行补血治疗者；（2）合并恶性肿瘤者；（3）存在酒精、药物滥用史者；（4）合并血液、内分泌、免疫系统疾病者；（5）合并心力衰竭、呼吸衰竭者；（6）存在认知、精神、心理障碍者；（7）合并感染性、传染性疾病者、遗传性球形细胞增多症者。

1.2 方法

地中海贫血基因：抽取所有患者2～5 ml空腹静脉血，以EDTA-Na2抗凝后混匀后送检。以PCR扩增仪（型号：ABI3100）提取血液样本DNA，由江门市妇幼保健院完成检测。血红蛋白电泳：抽取所有患者2～5ml空腹静脉血，以EDTA-Na2抗凝后混匀，以海伦娜V8血红蛋白电泳仪检测HbF、HbA2、HbA，试剂均为配套试剂，操作严格按操作规程完成检测。

1.3 观察指标与判定标准

对比实验组、对照组血红蛋白电泳结果，对比地中海贫血基因、血红蛋白电泳单独检测与联合检测对α型地中海贫血以及β型地中海贫血检出率。HbF正常参考值是0%～10%，HbA2正常参考值是2.0%～3.5%，HbA正常参考值是97%～98%［5-6］。

1.4 统计学方法

数据采用SPSS 25.0软件进行统计分析，，计量资料以均数±标准差（±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对比实验组、对照组血红蛋白电泳结果

实验组1 758例患者中，疑似802例α型地中海贫血，占45.62%（802/1758）；疑似956例β型地中海贫血，占54.38%（956/1758）。α型地中海贫血患者HbA2明显低于对照组，对照组明显低于β型地中海贫血患者（P＞0.05）。对照组患者HbF明显低于a型地中海贫血患者，α型地中海贫血患者HbF明显低于β型地中海贫血患者（P＞0.05）。β型地中海贫血患者HbA明显低于α型地中海贫血患者，α型地中海贫血患者患者HbA明显低于对照组（P＞0.05），见表1。

表1 对比实验组、对照组血红蛋白电泳结果（±s） %

表1 对比实验组、对照组血红蛋白电泳结果（±s） %

1.32±0.251.45±0.26 α型地中海贫血（n=802）β型地中海贫血（n=956）94.38±3.66实验组（n=1 758）5.65±0.69 5.19±0.41 92.52±1.62对照组（n=1 758）0.92±0.05 2.58±0.16 97.85±2.46

2.2 对比地中海贫血基因、血红蛋白电泳单独检测与联合检测检出率

地中海贫血基因、血红蛋白电泳联合检测检出率明显高于单独检测（P＜0.05），见表2。

表2 对比地中海贫血基因、血红蛋白电泳单独检测与联合检测检出率 例（%）

3 讨论

地中海贫血主要是由于血红蛋白基因突变所致，具体表现为血红蛋白表达较少或红细胞数目减少［7］。血红蛋白在人体生命活动中具有重要作用，可以向机体各个组织、脏器输送氧气，如果血红蛋白缺乏，则机体很难维持正常的生命活动，正常工作以及生活等均造成了不良影响［8-9］。地中海贫血的发病率具有一定的地域性，南方的发生率明显高于北方，而α型的发生率明显高于β型［10］。目前，我国对于地中海贫血的孕妇尚无特效的治疗方法，每年都会有大量的重症地中海贫血新生儿出生，给社会以及家庭带来沉重负担［11］。因此加强产前筛查，及早检出地中海贫血，及早进行对症治疗，对于提高优生优育质量具有重要意义。

孕妇地中海贫血患者早期临床症状不典型，极易被患者忽视，如果没进行产前检查，容易生出地贫小孩，对自身以及胎儿生命安全均构成了一定威胁［12-13］。血红蛋白电泳试验检测，α型贫血患者HbA2以及HbA明显较低，但HbF却明显较高，而β型贫血患者HbA2以及HbF相对较高，HbA相对较低［14］。血红蛋白电泳试验可以对机体血红蛋白表达情况做出准确的评估，具有特异性高、操作方便、迅速等优点，但是容易受到操作者水平、检测时间、标本处理等因素的影响［15］。而地中海贫血基因检测是目前临床诊断该病的金标准，随着我国PCR技术的不断发展，地中海贫血基因可准确的检测出基因的缺失和突变，具有较高的应用价值的，但是地中海贫血基因检测成本高、操作复杂，无法在临床中广泛推广开来。从本研究结果可知：地中海贫血基因、血红蛋白电泳联合检测检出率明显高于单独检测。提示地中海贫血基因、血红蛋白电泳联合检测，在孕妇地中海贫血诊断中检出率较高，对产前筛查地中海贫血减少地贫儿的出生有重要意义。

综上所述，孕妇地中海贫血诊断中采纳地中海贫血基因、血红蛋白电泳联合检测，可显著提高检出率，为产前筛查地中海贫血减少地贫儿提供一定的科学依据，值得将该检测方法进一步推广。