Carisolv 去龋效果的体外研究

汪婷婷，李虎

（苏州大学附属口腔医院，江苏 苏州）

0 引言

随着粘结材料的不断发展，去龋的洞型制备逐渐转向保守，即微创治疗。Carisolv 化学机械法就是其中的一种。目前，多数研究认为Carisolv 能够保留更多的牙体组织[1]，但是关于Carisolv 的去龋效果仍有争议[2,3]，以往研究多采用扫描电镜观察去龋后的洞底形态，本研究采用牙齿脱钙组织切片进行评价，从组织病理学角度评价Carisolv 的去龋效果。

1 材料和方法

1.1 主要材料和仪器

（1）主要材料

Carisolv 凝胶（赛维生物有限公司，深圳）；Carisolv 手工器械（MediTeam Dental AB，Sweden）；苏木素-伊红染色液。

（2）仪器

DM4000B 正 置 显 微 镜（Leica，Germany）；Rm2265 全自动半薄轮转切片机（Leica，Germany）；低速硬组织切片机（IsoMet，USA）；高速涡轮手机；低速涡轮手机

1.2 方法

1.2.1 离体牙收集

从门诊收集拔除的龋坏恒磨牙，龋病的诊断标准依照WHO 制定的口腔流行病调查标准[4]，根据龋病的“色、形、质”三方面的变化，以质变为准，用探针探及底部发软，龋损进展至牙本质层。所有牙齿用自来水清洗干净后，1 牙放1 生理盐水小瓶储存，置4℃冰箱保存，备用。

1.2.2 去龋操作

将收集好的45 个离体牙随机分为三组，分别采用如下操作：（1）A 组（空白组）

15 个离体龋坏磨牙用0.9%生理盐水冲洗窝洞后，不做任何处理。

（2）B 组（实验组）

用Carisolv 化学机械法去龋，15 个离体牙，将Carisolv的凝胶混匀，注入少量凝胶到龋洞内，约30s 后，选择合适的Carisolv 工具，刮除龋坏组织，重复上述步骤直至凝胶不再浑浊为止。以不卡住锋利的探针认为去龋完全，再用0.9% 生理盐水冲洗窝洞即可，备用。

（3）C 组（对照组）

用传统机械法去龋，15 个离体牙使用慢速球钻磨除所有龋坏组织，去龋干净的标准同B 组，用0.9%生理盐水冲洗窝洞，备用。

1.2.3 制作牙齿切片

离体牙去龋完成后，用低速硬组织切片机先截去牙根，然后沿牙冠近远中方向将龋洞分为前、中、后3 块，制作脱钙样本，每部分各制20 张切片，厚5μm，即每个离体牙共60 张切片，HE 染色。

1.2.4 评价

（1）评价标准

在200×的视野下，切片窝洞底被染成蓝色的牙本质小管认为是“感染的牙本质小管”，根据其数目分为以下4 个等级：0 分：无感染的牙本质小管；1 分：1- 感染牙本质小管；2分：10-感染牙本质小管；3 分：20-感染牙本质小管。

（2）观察视野选取及评分

每个牙齿的窝洞分为3 块，每个窝洞块各制20 张切片。从每个窝洞块的切片中各随机选取2 张切片，即每个牙齿选6 张切片，按上述评分标准进行评分。所有的切片由1 位观察员独立进行盲评，计算6 张切片的平均得分，作为该牙齿的去龋效果的最终得分，评价去龋的彻底性。

1.3 统计学方法

数据录入采用Epidata3.1 软件，统计学分析软件用SPSS 13.0，经方差齐性检验，知方差不齐（P=0.003）。经秩和变换后，多样本的比较采用Kruskal-Wallis H 秩和检验；组间两两比较，对数据重新编秩次，采用S-N-K 法进行检验，检验水准ɑ=0.05。

2 结果

2.1 去龋结果

每个离体牙的切片，随机选取6 张切片后，按上述标准进行观察和评分，求出6 张切片的平均值，作为该离体牙去龋效果的得分。

A 组（空白组），90 张切片，562 个评分视野，评分以“3 分”最多，均值得分（2.835±0.0602），该组的牙齿切片内可见牙本质小管被破坏，甚至呈串珠样，融合的牙本质小管内充满细菌等坏死物（见图D）。

B 组（实验组），90 张切片，648 个评分视野，评分以“0 分”最多（见图A），该组总均值为（0.2492±0.2306）。（见图B）

C 组（对照组），90 张切片，621 个评分视野，评分以“0 分”最多，该组总均值得分（0.3117±0.2207）。（见图C）

图1 不同等级的评分结果（200×，HE）

用SPSS 软件，经方差齐性检验，方差不齐（P=0.003）。采用Kruskal-Wallis H 秩和检验，显示组间有差异（F=29.980，P=0.000）；对数据重经编秩次，用S-N-K 法进行组间两两比较，A 组和B 组、C 组之间差异有统计学意义，B组和C 组之间差异无统计学意义。3 组离体牙的切片评分视野得分情况见表1。

表1 3 组离体牙去龋后切片的评分情况

2.2 去龋后形态

本研究制备牙齿纵向切片，亦能够清晰地反映去龋后窝洞底形态的变化，Carisolv 去龋后的洞底形态凹凸不平，648个评分视野，574 个视野凹凸不平（88.58%）；机械组则较为平坦，621 个视野，418 个视野较平坦（67.31%），经χ2检验，差异有统计学意义（χ2=84.07，P=0.000）。

2.3 去龋时间

B 组（实 验 组）和C 组（对 照 组）去 龋 时 间 分 别 为（262.08±53.44）s 和（68.25±24.33）s，即（3.5-5.2）min 和（0.7-1.5）min，实验组长于对照组，经t 检验，两者差异有统计学意义（t=11.435，P=0.000）。

3 讨论

3.1 染色方法的选用

临床去龋过程中采用触觉和视觉相结合的办法，用肉眼观察是否去净龋坏组织，但是该法常与必须去除的龋坏牙本质量不相对应[5]。临床上仅通过肉眼无法判断牙本质小管是否被感染，本研究通过组织学方法从微观角度进行观察。正常成熟牙本质内的有机物以胶原蛋白为主，该胶原不易被酸性溶液溶解[6]，经脱钙处理后，牙本质小管的形态则较好地保留下来[7]。因此本研究采用牙齿脱钙切片观察去龋后窝洞内感染牙本质的情况。

3.2 关于评分标准

关于切片的评分标准尚未有统一标准[8,9]。本研究依据洞底的内染成蓝紫色的牙本质小管，该深染颗粒物内除有细菌外，可能还有牙本质碎屑，认为该牙本质小管被“感染”，并根据其数目的多少将其划分为4 级，该标准既能反映去龋后洞底牙本质小管内的细菌，又能对其数量进行简单的估计。结果显示Carisolv 组和机械组两种去龋方法的效果差异无统计学意义，本研究结果与Banerjee 等[10]和Pai 等[11]采用扫描电镜观察机械法和Carisolv 化学机械法的结果相似，说明该评分标准可靠。

3.3 关于洞底的形态

本研究通过牙齿纵切片观察，Carisolv 化学法去龋后的窝洞洞底形态，有88.58%的视野显示洞底凹凸不平，而机械组有67.31%的洞底形态较为平坦。Tsanova 等[12]用扫描电镜观察，均显示Carisolv 去龋后的洞底凹凸不平，有少量的玷污层。且多数研究认为去龋后的洞底形态不会对材料的粘结固位产生不良影响[13-15]。

本研究分别用Carisolv 化学机械法和传统机械法去龋，Carisolv 的凝胶需要先作用一段时间后，方可手工操作，耗时明显较机械组长，这也是限制Carisolv 在临床广泛应用的一大因素。本研究采用体外实验，且事先将釉牙本质界以上的龋坏组织去净，然后分组，组间均衡，只比较两组的去龋时间。Carisolv 组的时间比传统机械组长，但是时间在5min 以内，临床尚可接受。总之，Carisolv 化学机械法能够有效地去除龋坏组织，达到临床的去龋效果，去龋过程不特别依赖涡轮机，因此对于有牙科畏惧的患者不失为一种很好的治疗方法。