酶底物法检测生活饮用水总大肠菌群的效果观察

马惘卿 包蕾（通讯作者） 吴林蔚 向正华 郑超

（云南省玉溪市疾病预防控制中心 云南 玉溪 653100）

生活饮用水能够维持人体细胞形成，促进身体机能新陈代谢，还能够调节细胞组织和血液。按照我国食品安全标准规定显示，在饮用水中不再保留菌落总数。过度杀菌或者控制卫生指示菌可能会在一定程度上增加饮用水当中的酸盐含量，导致风险因素发生。饮用水能够促进人体吸收，并且将体内废弃物排除掉[1]。生活饮用水会直接影响人们的生活与生存，加大饮用水微生物检测力度，能够提升饮用水安全性。此次研究主要是探讨分析生活饮用水总大肠菌群检验使用两种不同检验方法的应用效果，现将此次研究报告作如下汇报：

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择某检验科所抽检的水样共计500 份，随机分为对照组和研究组，每组共有水样250 份。对饮用水进行细菌检验，采集水样于相应试管内。

1.2 方法

对照组水样采用总大肠菌群多管发酵法，具体如下：此种方法需要通过生化培养，选取10ml 水样共计5 份，接种于乳糖蛋白胨培养液中（10ml），之后选取样本接种到乳糖蛋白胨培养液中，选择样本于生理盐水中混合均匀，选择样本于培养箱内培养。对处理的水样进行检测和双料培养[2]。将水样放置于培养箱内，时间控制在20h 左右。阴性标准：培养管无产酸产气；阳性：培养管产酸产气。之后按照MPN 检索表，对水样中的总大肠菌群MPN 值进行报告。

研究组应用酶底物法，具体措施如下：选取水样100ml，添加2.7g 培养基粉末，混合均匀。待其完全溶解后，需要放置于培养箱（36 摄氏度）内，培养时间控制在24h。将无菌稀释瓶中置入100ml 水样，添加2.7g 培养基粉末，混合均匀。待其完全溶解后，选择灭菌试管（10 支，15×10mm），通过无菌吸管从稀释瓶中吸取水样10ml，置入试管内，并且放置于培养箱（36摄氏度）内，培养时间控制在24h。观察培养后的水样，当试管内水样变为黄色，表示存在总大肠菌群。当试管内水样非黄色时，则表示无总大肠菌群[3]。

1.3 统计学方法

采用专业统计学软件（SPSS20.0）处理和分析所有患者数据资料，采用χ2检验计数资料，并且使用百分比表示，P＜0.05为差异显著，有统计学意义。

2.结果

在分别检验两组样品之后，对照组检验合格率为95.2%；研究组检验合格率为97.6%，差异不具有统计学意义（P＞0.05），见表。

表 两种方法检测样品的合格率比较

3.讨论

生活饮用水在人类生产生活中占据重要地位，在经济发展过程中，也带来了严重的环境污染问题，导致饮用水微生物污染问题加剧。生活饮用水微生物检测指标能够对水质生物污染进行评价。因此为了维护生活饮用水安全性，必须采用快速有效的方法进行检验。总大肠菌群是需氧菌和厌氧菌在生长期间，促使乳糖发酵，且产生革兰阴性无芽孢杆菌。总大肠菌群不仅存在于粪便当中，也存在于其他环境中[4]。总大肠菌群的检测，对于检测人员的技术水平、检测设备以及检测环境的要求比较高，且检测时间比较长，因此在实际应用过程中，能够提升总大肠菌群的准确性。现阶段，在检验生活饮用水中的总大肠菌群时，多应用酶底物法和多管发酵法，以上两种方法的检测结果均具备准确性。当水质达标时，能够确保人们安全放心地饮用水源，还能够对生活饮用水的安全与质量进行监督。当饮用水存在处理不达标和不洁净问题时，就会导致水中出现微生物细菌污染。当生活饮用水供应管道产生破损，二次供水存在问题时，就会污染生活饮用水。所以必须注重生活饮用水的微生物细菌检验。通过此次调查检验能够看出，不管是多管发酵法，还是酶底物法，都能够提升检验结果的准确性，酶底物法应当作为生活饮用水微生物污染总大肠菌群的快速检验方法。酶底物法用于清洁水样中，能够快速检测结果，特别是对于应急水样。当水样的稀释倍数越高时，检测结果会存在下降趋势。当水样稀释倍数比较低时，且误差比较小，则可以应用酶底物法。

通过此次研究结果能够看出，对照组检验合格率为95.2%，研究组检验合格率为97.6%，两组水样在检验合格率上不存在显著差异，P ＞0.05，差异不具有统计学意义。比较分析不同检测方法发现，多管发酵法的操作时间比较长，且检测步骤复杂，必须进行验证试验。酶底物法便于操作，且检测结果获得时间短，能够应用到常规快速检测中。不同检验方法的结果一致性不存在显著差异，即两组方法的检测数据基本一致，只是在检验数据上存在差异性。酶底物法检验可以应用到大批量快速检测中，且检验过程中不会受到污染影响，能够对水样的微生物污染情况进行准确检测和判断。

综上所述，总大肠菌群多管发酵法和酶底物法的检测结果具备一致性特点，但是酶底物法便于操作，因此可以作为水质污染的微生物总大肠菌群的标准评价方法。