不同标线对水产品中氧氟沙星和恩诺沙星残留量测定的影响比较

李春青 高丽娜 时文博 钱坤 陈建

摘 要：本文比较了使用液质测定水产品中氧氟沙星和恩诺沙星时，使用基质标线和试剂标线对检测结果的影响。经过比较后，笔者认为两种标线的决定系数（R2）都能达到0.999以上，都满足对于实验的准确性要求，两种标线配制方式没有显著差别。基质标线斜率略小于试剂标线，测定同一样品时给出的结果会略有不同，但该项差别尚在误差允许范围内。

关键词：氧氟沙星;恩诺沙星;基质;标线;比较

1 实验部分

1.1 仪器和设备

AB 5500Qtrap液质联用仪、IKA T-25均质机、Sigma 3-18ks高速离心机、N-EVAP-112氮吹仪。

1.2 标准品

参照农业部1077号公告-1-2008配制氧氟沙星和恩诺沙星混合标准工作液（1.0 μg/mL）以及混合内标工作液（1.0 μg/mL）[1]。

1.3 色谱条件

①色色谱柱：Kinetex F5，内径2.1 mm，柱长100 mm，粒径2.6 μm;②柱温：35 ℃;③进样量：7 ?L;④流动相：A为乙酸铵（2 mmol/L， 含0.1%甲酸），B为甲醇;梯度洗脱程序见表1。

1.4 质谱条件

①离子化模式：电喷雾离子源（ESI），正离子模式;②喷雾电压：4 500 V;③离子源温度：600 ℃;④气帘气压力CUR：25 psi;⑤雾化气压力GS1：60 psi;⑥辅助加热气压力GS2：60 psi;⑦入口电压（EP）：10 V;⑧碰撞室出口电压（CXP）：10 V;⑨母离子、子离子和碰撞能量参照《农业部1077号公告-1-2008》。

1.5 提取和净化

取5.00 g样品加入到50 mL离心管中，加入50μL混合内标工作液（1.0 μg/mL），加入7 mL乙腈，涡旋混合1 min，超声10 min，4 000 r/min离心5 min，转移上清液至50 mL刻度管中。残渣重复上述提取过程一次，合并两次提取液，混匀，取8 mL上层清液至玻璃管中，氮吹至干，加入2.0 mL正己烷涡旋30 s，再加入1.0 mL 20%甲醇溶液，涡旋1 min，2000 r/min离心5 min，取下层溶液过0.2 μm水相滤膜，待用[2]。

1.6 标准溶液

①试剂标准溶液：在5个样品瓶中分别加入50 μL混合内标标准工作液（1.0 μg/mL），再分别加入1.0 μg/mL混合标准工作液50、100、150、200μL与250 μL，用20%甲醇溶液定容至1 mL，形成浓度为50、100、150、200 ng/mL与250 ng/mL的标准品。②基质标准溶液：称取5个空白样品，分别向样品中加入1.0 μg/mL混合标准工作液50、100、150、200 μL与250 μL，并依据“1.5提取和净化”步骤进行处理。处理后，以上述样品分别作为50、100、150、200 ng/mL以及250 ng/mL标准点绘制标准曲线[3]。

2 结果与讨论

由表2可以看出，上述两种标线的决定系数（R2）都在0.999以上，都满足对于实验的准确性要求。基质标线由于各个标准点都经过前处理，所以其离散程度即决定系数（R2）略差于试剂标线。此外，笔者认为氧氟沙星和恩诺沙星基质标线斜率小于试剂标线，即测定同一样品的结果会略有不同，经过T检验可知，两种标线配制方式没有显著差别，该项差别尚在误差允许范围内。

参考文献

[1]中华人民共和国农业部.农业部1077号公告-1-2008水产品中17种磺胺类及15种喹诺酮类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法[S].北京：中国标准出版社，2008.

[2]马立利，曹沅，姜于，等.基质工作曲线法和标准加入法测定鸡肝粉中的环丙沙星[J].分析试验室，2017，36（2）：154-159.

[3]黎天勇，蔡揚尧，陈永杰.水产品中孔雀石绿检测标准曲线法与标准加入法的比较分析[J].食品安全导刊，2016（18）：141-142.

作者简介：李春青（1981—），男，天津人，本科，高级工程师。研究方向：兽药残留检测和水产品质量安全。