李志斌 何喆
一、材料与方法
1、动物
选用健康的家兔10只,體重1.50~2.00kg,性别不拘。(安徽科技学院实验动物中心提供)。
2、药材与试剂
(1)药材
黄柏购于凤阳县药材店,经安徽科技学院中药实验室鉴定为正品。
(2)黄柏水煎液、醇沉液的制备
黄柏汤上清液的制备:称取20g黄柏,浸泡30min,加水过药面2cm,分别煎煮60min、40min、20min三次,合并三次过滤回收,最后离心3800转10min,浓缩至100ml装瓶,灭菌消毒备用。
黄柏醇沉液的制备:另取黄柏水煎液50ml上清液,加无水乙醇75ml,使含醇量达60%,冰箱4~10℃静置24 h,离心3800转10min后,用旋转蒸发仪将乙醇回收。再加无水乙醇125ml, 使含醇量达80%,冰箱4~10℃静置24 h,用旋转蒸发仪将乙醇回收,离心3800转5min,蒸馏水定容至50ml(0.2g/ml)装瓶,灭菌消毒备用。
二、结果与分析
1、黄柏水煮上清液对兔离体十二指肠运动的影响
由表1可以看出,与用药前比较,0.2、0.4、0.6g·L-1浓度的黄柏水煎液处理的离体十二指肠的收缩张力、收缩振幅、收缩频率明显下降(P<0.01)。
2、黄柏醇沉液对兔离体十二指肠性能的影响
由表2可以看出,与给药前比较0.2、0.4、0.6 g·L-1浓度的黄柏醇沉液处理的离体十二指肠的收缩张力,收缩振幅,收缩频率均显著降低(P<0.01)。
三、黄柏水煎液及水煎醇沉液对兔离体十二指肠运动性能的作用
黄檗对家兔、豚鼠、小鼠离体肠道均有低浓度刺激和高浓度抑制作用。通过对家兔离体肠道进行黄檗实验,发现家兔离体肠道张力和振幅增大,松弛和收缩增强,这是黄檗、柠檬苦素、小檗碱效应的化学成分。实验结果表明,黄柏水煎液及水煎醇沉液能显著抑制兔离体十二指肠的平滑肌运动使其收缩张力,收缩振幅下降,频率变缓。钙离子是细胞间连接和信号传递的重要成分,影响细胞重要的生理功能,钙离子浓度变化对胃肠平滑肌的收缩与舒张起着决定性作用,游离钙在平滑肌细胞收缩过程中起着重要的“第二信使”作用。受刺激的细胞可通过细胞内信号转导途径引起细胞内钙池中钙离子的释放,使细胞内钙离子浓度([Ca2+]CYT)升高,并通过Ca2+-钙调素肌球蛋白轻链激酶依赖机制收缩平滑肌(MLCK通路)。黄柏水煎液及水煎醇沉液能显著抑制兔离体十二指肠的平滑肌运动使其收缩张力,收缩振幅下降,频率变缓。可能是因为离体小肠放置在适当的环境内,平滑肌收缩特性与壁内神经丛功能,其重要的原因是肌膜下陷形成腔洞,可吸收台式液中的钙离子。黄柏水煎液及水煎醇沉液能显著抑制兔离体十二指肠的平滑肌运动使其收缩张力,收缩振幅下降,频率变缓。可能是小檗碱的作用,也可能是肠平滑肌对化学、温度和机械刺激非常敏感。某些因素的改变会影响身体的消化和吸收功能,从而影响离体肠管的运动性能,这需要进一步的研究。
四、结论
黄柏水煎液及水煎醇沉液可以显著降低十二指肠的收缩张力,收缩振幅,收缩频率,且作用随着剂量的增加而增加。
(作者单位:1.245718安徽省黄山市黄山区新华乡农业综合服务站;2.245702安徽省黄山市黄山区耿城镇农业综合服务站)