血清淀粉样蛋白A 等检测用于支原体肺炎与病毒感染鉴别诊断的价值分析

曹颖 曾连英( 通讯作者) 黄玉霞 蔡伟雄 胡春毓

( 博罗县人民医院检验科 广东 博罗 516100)

肺炎支原体（MP）是导致儿童发生气管炎、支气管炎和肺炎常见的病原体之一，在儿童社区获得性肺炎（CAP）感染中，约40%为MP 引起。肺炎支原体肺炎（MPP）常年均可发生，以冬春季常见[1]。尽管肺炎支原体可不导致感染，或导致感染后常常可以自限，但若迁延不愈，可最后发展成顽固性MPP，是导致儿童死亡率升高的重要原因之一[2]。临床上诊断MPP 的诊断目前的主要热点是寻求高敏感性和特异性的辅助诊断的生物标志物。血清淀粉样蛋白A（SAA）是近年来研究较多的一种急性时相反应蛋白，在诊断感染性疾病中有较高的敏感度和特异度。我院将SAA 的检测用于MPP 的辅助诊疗中，取得了较为理想的效果，现报道如下。

1.资料与方法

1.1 MPP 的诊断标准

参照《儿童支原体肺炎诊治专家共识》[3]对MPP 进行诊断，纳入标准为（1）有咳嗽、发热等临床症状；（2）有肺炎的影像学证据；（3）入院24 小时内MP 抗体滴度（IgM+IgG）≥1:160；（4）在疾病的急性期/恢复期观察到有双份血清抗体的滴度呈4 倍及以上的升高。排除标准：（1）既往慢性肺部疾病史；（2）反复呼吸道感染，但非MP 引起者。

1.2 病毒组和健康对照组的纳入

选择同期在我院进行就诊，经实验室诊断为病毒性感染者，纳入病毒组，同时选择在我院进行儿童入学健康体检的儿童作为对照组。三组在年龄和性别上具有同质性，不存在统计学上的差异性。

1.3 实验室检测

对纳入的所有研究对象，采集外周血，对血样进行血常规、PCT、CRP 和SAA 的检测，血常规中WBC 的检测采用深圳迈瑞的BC-5390 CRP 血球仪，其参考值范围是5 ～12×109/L；PCT 的检测采用电化学发光法，仪器和试剂采用罗氏诊断产品（上海）有限公司的降钙素原检测试剂盒，其阴性检测意义的参考值范围是0 ～0.05ng/ml；CRP 的检测采用化学发光法，仪器为日立7600，试剂购自北京华宇亿康生物工程技术有限公司，其阴性检测意义的参考值范围是＜5.0mg/L。SAA 的检测采用免疫荧光层析法，仪器采用广州蓝勃生物科技有限公司AFS—1000 仪，试剂购自广州市微米生物科技有限公司的血清淀粉样蛋白A 测定试剂，其阴性检测意义的参考值范围是＜5.0mg/L。甲型和乙型流感病毒检测采用金标法，试剂和仪器来自广州万孚科技有限公司。肺炎支原体的检测采用凝集法，以1:80 为判别阳性的滴度，MPP 判别标准见1.1。所有的血样在抽血后半小时内上机，仪器在检测样本前均进行定标，样本的变异系数在可控范围内，确保检验质量。

1.4 统计学方法

采用SPSS17.0 进行统计分析，采用One-way ANOVA 检验对年龄进行统计分析，WBC、PCT、CRP、SAA 和SAA/CRP，采用非参数检验的Kruskal-walls k 个样本独立检验法进行统计分析，数值以四分位间距（P25，P75）表示，卡方检验对纳入儿童的性别进行统计分析，使用受试者工作特征曲线（ROC）比较WBC、PCT、CRP、SAA 和SAA/CRP 的诊断效能，以曲线下面积（AUC）判断诊断效果，所有的检验结果以P ＜0.05为检测有统计学意义。

2.结果

2.1 一般人口学结果

本研究纳入了经临床诊断为MPP 的儿童227 例，年龄4.26±1.36岁，对照组101例，年龄4.51±0.93岁，鉴别诊断组（病毒组）的儿童206 例，年龄4.36±1.45 岁，三组差异无统计学意义（P ＜0.127）。对照组男童59 人（58.4%），MPP 组男童114 人（50.2%），病毒组男童101 人（49.0%），三组比较性别无显著性差异（P 值为0.276）。

2.2 MPP 组、病毒组和健康对照组WBC、PCT、CRP、SAA 和SAA/CRP 检测结果分析

MPP 组和病毒组的WBC、PCT、CRP、SAA 和SAA/CRP 的检测值均高于健康对照组，三组比较其差异具有统计学意义（所有P值均＜0.001），见表1。MPP 组的SAA 和SAA/CRP 的检测值均高于病毒组，两组比较其差异具有统计学意义（P 值均＜0.001）。

表1 三组感染指标的比较

2.3 WBC、PCT、CRP、SAA 和SAA/CRP 的诊断效能分析

WBC 诊断MPP 的截断值为7.89×109/L，其灵敏度和特异度分别为58.6%和80.2%，其诊断MPP 的AUC 为0.687。PCT 诊断MPP 的截断值为0.06ng/ml，其AUC 为0.910。CRP 诊断MPP 的截断值为8.83mg/L，其AUC 为0.970。SAA/CRP 诊断MPP 的截断值为0.78，其AUC 为0.979。SAA 诊断MPP 的截断值为11.49mg/L，其灵敏度和特异度可达94.3%和99.0%，其AUC 高达0.996，见表2 和图1。

表2 三种感染指标对MPP 的诊断效能比较

图1 WBC、PCT、CRP、SAA 和SAA/CRP 诊断MPP 的ROC 曲线

3.讨论

肺炎支原体是目前已检测到的，无细胞壁且能够在培养基上独立生活的最小病原微生物[4]，人们对支原体呼吸系统疾病的临床表现，传播方式和程度的表征以及血清学检测的发展始于40 多年前。但是，当时对于这种支原体如何与宿主细胞相互作用并破坏宿主细胞，影响免疫系统以及其在呼吸道以外介导疾病的程度知之甚少。

由于肺炎支原体感染的确诊依赖于收集急性期和恢复期双份血清检测抗体滴度[5]，加之肺炎支原体引起的感染临床表现与细菌或呼吸道病毒感染的临床表现相似，导致临床医师无法轻易的将支原体呼吸道感染与细菌或呼吸道病毒感染的临床表现区分开来[6]。因此无法了解肺炎支原体在患病人群中的发生频率，加上抗生素的使用不规范，使得未经系统治疗的患者继续在家庭、学校和社区传播感染，促进了肺炎支原体在易感人群中的传播[7]。因此，寻求一种高敏感性、特异度的生物标志物用于肺炎支原体感染的辅助诊断，迫在眉睫。

对于肺炎支原体轻症患者，全血细胞计数、电解质、肝功能和肾功能正常的患者可能正常，疾病无法判断，轻症者的CRP可出现轻度升高[8]。有研究表明，在出现严重感染的患者中，尤其当病情发展到重症难治性肺炎时，炎症标志物CRP 和中性粒细胞百分比可显著升高[9]。

血清淀粉样蛋白A 主要是一种由肝脏产生对促炎细胞因子反应的、由活化的单核细胞分泌的急性期蛋白，在机体身体健康时无法检测出，一旦发生感染后，SAA 的浓度与健康状态时相比，水平可快速升高至基线值的数千倍[10]。当炎症发生后3～6 小时，可监测到SAA 的水平呈快速升高，在炎症发生后的2 ～3 天内，达到血液中的峰度值，然后再缓慢恢复到基线水平。尽管SAA 和CRP 均为急性期的蛋白，代表了急性炎症最敏感的血浆生物标志物，但根据疾病的严重程度，SAA 的浓度可增加数千倍，在感染性疾病的诊断中应用非常广泛[11]。研究显示，CRP 恢复基线水平的速度远高于SAA，因此其敏感度和特异度不及SAA[12]。本研究结果与之类似，在所有的炎症标志物中，SAA 用于辅助诊断MPP 的敏感度和特异度最高，ROC 曲线下的面积达到了0.996，表明SAA 用于辅助诊断MPP 具有优越性，因此可视为MPP 辅助诊断和监测的最佳生物标志物，用于儿童MPP 感染的日常监测。