诺氟沙星胶囊微生物限度检查方法研究

周永海

（甘肃省临夏回族自治州药品检验检测中心 731100）

诺氟沙星，又称为氟哌酸、淋克小星、淋沙星等。诺氟沙星由于其广谱抗菌性质，对需氧类细菌具有很好的抗菌性，但同时其弊端也很明显诺氟沙星它对真菌无抑菌作用[1]。因此，在临床上诺佛沙星多用来治疗因敏感菌所导致的疾病，比如肠炎、前列腺炎等的感染。我院开展此项研究，报道如下：

1 仪器与材料

1.1 仪器 培养箱；生物类安全柜；集菌仪；电子天平；电热恒温培养箱-隔水式 。

1.2 样品与试剂 本次实验采用的样品为诺氟沙星胶囊；干粉培养基： 氯化钠蛋白胨缓冲液pH 值7.0、蛋白胨水溶液（浓度0.1%）、胰酪大豆胨培养基两种分别为液体及琼脂、沙氏葡萄糖培养基分别为液体及琼脂、麦康凯培养基分别为液体及琼脂；分析纯：氯化钠、硫酸镁[2]

2 试验方法

首先将枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌置于30℃ ～35℃的胰酪大豆胨液体培养基中，将其培养 18～24 h 后静置，以备试验时使用。在进行试验时，先将上述培养物各取 1 mL，再使用 0.9% 无菌氯化钠溶液进行稀释，稀释保持在10 倍稀释液至 10-6 或10-3 的菌悬液。再将白色念珠菌在 20℃ ～25℃沙氏葡萄糖液体培养基中培养 2 ～3 d ，实验开始取该培养基培养物1mL，同样使用0.9%的无菌氯化钠溶液保持10倍稀释至 10-4 ～10-2 的菌悬液。然后在20℃ ～25℃的沙氏葡萄糖琼脂斜面上培养黑曲霉，5-7 小时后取出该培养物。随之加入5ml 的无菌氯化钠溶液，将黑曲霉进行清洗。最后将清洗的孢子悬液取出1 ml，并用浓度为0.05 %的无菌氯化钠溶液进行10 倍稀释，直至稀释到10-4 ～10-2 的孢子悬液[3]。

2.1 微生物计数方法适用性试验

2.1.1 需氧菌总数计数

试验组：取1ml 1 ∶10 的供试液，使用薄膜过滤法，使用800 ml无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（pH7.0）进行冲洗，分8 次冲洗，每次取100mL 进行冲洗；冲洗之后滤干，随之将滤膜菌进行转移，并将滤膜菌正面朝上贴在胰酪大豆胨琼脂培养基平板上。上述操作后，接着将其置于培养箱中，进行约为72 小时的培养，并每天观察实验变化结果[4]。

其中实验需氧菌总数计数适用性试验结果见表1。

表1 需氧菌总数计数适用性试验结果

2.2.1 霉菌和酵母菌总数计数

试验组： 取9.9mL 的1：10 供试液，在供试液中加入0.1 ml上述配制的试验菌液，并混合均匀。取混合均匀的供试液1ml 注入平皿，随之将其倒入沙氏葡萄糖琼脂培养基中。然后将经过培养基培养的供试液置于20℃ ～25℃的培养箱中，培养约24 到120 小时之间，并做好每日实验结果的记录。

供试品对照组：将试验组的操作进行重复操作，随之进行培养计数。

菌液对照组： 将供试品对照组和试验组中配备的菌液取适量，随后用稀释剂进行稀释，并进行培养计数。霉菌和酵母菌总数计数适用性试验结果如下：菌液对照组中的白色念珠菌有80 菌、试验组有白色念珠菌75 菌、供试品对照组的白色念珠菌有0 菌，回收比值为1.0；菌液对照组中的黑曲霉有79 菌、试验组中有黑曲霉69 菌、供试品对照组有黑曲霉0 菌，回收比值为：1.1。

3⋅讨论

根据临床试验显示，诺氟沙星胶囊抑菌性较强，若单独采取薄膜过滤法，会导致最终试验结果的回收效果不理想。为了研究微生物限度检查方法的成效，我院对诺氟沙星胶囊进行生物限度检查进行研究。

本次研究结果显示：所实验的各试验菌其回收比值需要符合药典规定，而大肠埃希菌则需要在控制菌检查的阳性对照试验检中被检出。诺氟沙星胶囊的抗菌活性则由中和剂硫酸镁来去除。各项试验数据表明，试验方法可用于诺氟沙星胶囊的微生物限度检查。

因此，对诺氟沙星胶囊进行微生物限度检查，该方法价值较高，可大力推广。