丹参的活性成分筛选及体外活性测试

计雅佳 强围 那文钰 孔书悦 祝霖露（西北民族大学化工学院，兰州榆中730124）

随着人们生活水平的提高和生活习惯的改变，高血脂症的发病率明显增加，受到人们广泛关注，降低血脂，抑制动脉硬化的发展是防止由心脑血管等疾病引起死亡的重要手段。丹参是一种天然植物，具有降血脂的功效，本文章主要研究丹参的主要成分丹酚酸的降血脂功效，利用紫外分光光度法测定丹酚酸对脂肪酶的降血脂活性，并与市售药物奥利司他相比较。

1 筛选部分

1.1 用ADME筛选筛选成分

如果一个分子符合Lipinski 的“五定律”，那么它具有良好的吸收和渗透性。从TCMSP 数据库中筛选符合条件的成分，OB被用来确定生物活性分子作为治疗剂的类药物性质。用DL参数估计了预期化合物的溶解度和化学稳定性本文筛选出OB≥50%，DL≥0.18，ALog P≤5，Caco-2≥0.40，MW≤500 的SDC 有效化学成分。然后，Pubchem 数据库（https：//Pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）进一步规范了结构和名称。所得分子如表1所示。

通过上述表格，我们了解在丹酚酸中活性较好的成分是丹酚酸B，所以我们选择丹酚酸B来进行如下实验。

2 体外活性测试部分

2.1 胰脂肪酶活力的测定

称取PNP 标准品70mg，使用二甲基亚砜溶解，定容到100ml，制成浓度为5mmol/L的母液。使用上述母液配制不同浓度的pnp溶液，以缓冲液做对照，使用紫外分光光度法在405nm波长处测吸光度，每个浓度下测定三次，做出A-c 的浓度坐标图。

配制不同浓度的丹酚酸B和奥利司他溶液，吸取不同浓度的以上溶液0.5ml、Tris-HCL 缓冲液3ml 和脂肪酶溶液1.5ml 于37℃下保温10min，加入已预热的PNPP 底物溶液起始反应，37℃反应10min后加入6ml乙醇和0.5ml 浓盐酸终止反应，在紫外分光光度计405nm下测定其吸光度。根据标准曲线，计算抑制率，以奥利司他为对照，测定。

抑制率计算：抑制率%=（Aa-Ab）/Ae（Ae：不加样品时吸光度 Ab：加入样品但未加底物和酶时 Aa：加入样品时吸光度）

3 结果及讨论

3.1 4-硝基苯酚的标准曲线

将PNP稀释成不同浓度，利用紫外分光光度计在405nm处测定其吸光度，以不同浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，如图

图1 4-硝基苯酚的标准曲线

表1 SDC中选定候选化合物的信息

获得的曲线方程为y=13.307x+0.0908，此标准曲线的相关性为0.9707，证明实验相关性很好，实验可行性高。

3.2 不同浓度抑制剂对胰脂肪酶的影响

由图2可知，对丹酚酸B来说，浓度越大，抑制率越高，抑制效果越好。图3随着奥利司他浓度的增加，抑制率在不断提高，但之后随着浓度的增加，抑制效果趋于平缓，这说明抑制剂对脂肪酶抑制作用具有浓度依赖性，证明奥利司他对胰脂肪酶具有一定的抑制作用，但是抑制效果有待进一步提高。由图2图3对比可知，丹酚酸B与奥利司他相比，丹酚酸B的抑制效果明显比奥利司他要好

图2丹酚酸B对胰脂肪酶抑制作用的影响

图3奥利司他对胰脂肪酶抑制作用的影响