小萼瓜馥木枝叶乙醇提取物石油醚部分的化学成分

宋 吉，戴伟锋，向 诚，张 敉，角仕云

(昆明理工大学生命科学与技术学院，云南 昆明 650500)

番荔枝科(Annonaceae)瓜馥木属(FissistigmaGriff.)中多种植物具有药用价值，民间常用于治疗关节炎、跌打损伤、风湿骨痛、手足麻木以及骨折水肿等[1]。瓜馥木属植物含有生物活性较高的生物碱类、黄酮类及有机酸类等化合物[2]。瓜馥木属植物小萼瓜馥木〔F.minuticalyx(McGr.et W.W.Sm.)Chatterjee〕为攀援灌木，主要分布于云南南部和西南部及贵州东南部的山地密林中。小萼瓜馥木是否具有同属其他植物类似的化学成分或生物活性成分，迄今尚未见相关报道。为此，作者对小萼瓜馥木枝叶乙醇提取物石油醚部位进行了初步的化学成分研究，以期为该种植物的进一步开发和利用提供基础资料。

1 材料和方法

1.1 材料

供试小萼瓜馥木枝叶于2017年4月采自云南省普洱市澜沧县发展河乡勐宋路边，经昆明理工大学生命科学与技术学院向诚副教授鉴定。

主要仪器：Bruker Avance Ⅲ HD核磁共振仪(600 MHz)(瑞士Bruker BioSpin公司)，Agilent 1200 Series液相色谱仪(美国Agilent公司)，Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)(美国Agilent公司)，LC3000型半制备液相色谱仪(北京创新通恒科技有限公司)，YMC-Pack ODS-A色谱柱(10 mm×250 mm，5 μm)(日本YMC公司)。

主要试剂：正向硅胶(100～200目，200～300目)和GF254薄层层析硅胶板(青岛海洋化工有限公司)，ODS-C18硅胶(40～63 μm)(美国Pharmacia公司)，硫酸(分析纯)(深圳市龙泰化工有限公司)，无水乙醇(分析纯)(南京南试化学试剂有限公司)，MCI GEL CHP 20P柱填料(75～150 μm)(日本Mitsubishi Chemical公司)，Sephadex LH-20柱填料(20～100 μm)(美国GE公司)。

1.2 方法

取10 kg小萼瓜馥木枝叶，自然风干后粉碎，用体积分数95%乙醇加热回流提取6次，每次6 h，合并提取液，减压浓缩后得到总浸膏920 g；用蒸馏水将总浸膏混悬，依次用等体积石油醚和乙酸乙酯萃取3次，萃取液合并后经减压浓缩，分别得到石油醚部分96.3 g和乙酸乙酯部分196.6 g。石油醚部分经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯溶液(体积比1∶0、5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5、0∶1)梯度洗脱得到Fr.1至Fr.8共8个部分，其中，Fr.5(5.3 g)经正相硅胶(石油醚-乙酸乙酯溶液，体积比1∶1至0∶1)、MCI(甲醇-水溶液，体积分数10%～100%)、Sephadex LH-20(甲醇)和半制备液相色谱(甲醇-水溶液，体积分数50%)分离得到化合物6(8.2 mg，保留时间12.4 min)、化合物7(2.7 mg，保留时间13.4 min)和化合物8(2.8 mg，保留时间18.2 min)，Fr.6(4.2 g)经MCI(甲醇)和半制备液相色谱(甲醇-水溶液，体积分数45%)分离得到化合物1(2.2 mg，保留时间18.6 min)、化合物2(2.3 mg，保留时间19.4 min)和化合物9(4.3 mg，保留时间21.6 min)，Fr.7(3.1 g)经ODS-C18(甲醇-水溶液，体积分数10%～100%)和半制备液相色谱(甲醇-水溶液，体积分数42%)分离得到化合物3(4.2 mg，保留时间15.5 min)和化合物4(2.1 mg，保留时间16.8 min)，Fr.8(2.4 g)经ODS-C18(甲醇-水溶液，体积分数10%～100%)和半制备液相色谱(甲醇-水溶液，体积分数35%)分离得到化合物5(2.6 mg，保留时间16.4 min)。以上化合物经1D NMR核磁分析及与相关参考文献比对核磁数据后确定各化合物结构。

2 结 果

化合物1：黄色无定形粉末；C15H10O6；薄层层析(TLC)经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为黄色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：6.54(1H，s，H-3)，6.21(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，6.44(1H，d，J=2.1 Hz，H-8)，7.38-7.40(2H，m，H-2′，6′)，6.90(1H，d，J=8.3 Hz，H-5′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：166.1(C-2)，103.9(C-3)，183.9(C-4)，163.2(C-5)，100.2(C-6)，166.4(C-7)，95.0(C-8)，159.4(C-9)，105.3(C-10)，120.3(C-1′)，114.2(C-2′)，147.1(C-3′)，151.0(C-4′)，116.8(C-5′)，123.7(C-6′)。结合文献[3]，鉴定该化合物为木犀草素(luteolin)。

化合物2：黄色无定形粉末；C15H10O5；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为黄色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：6.60(1H，s，H-3)，6.21(1H，d，J=1.6 Hz，H-6)，6.46(1H，d，J=1.6 Hz，H-8)，7.86(2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′)，6.93(2H，d，J=8.8 Hz，H-3′，5′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：166.3(C-2)，103.8(C-3)，183.9(C-4)，159.5(C-5)，100.2(C-6)，166.3(C-7)，95.1(C-8)，163.3(C-9)，105.3(C-10)，123.3(C-1′)，129.5(C-2′)，117.1(C-3′)，162.8(C-4′)，117.1(C-5′)，129.5(C-6′)。结合文献[4]，鉴定该化合物为芹菜素(apigenin)。

化合物3：黄色油状物；C14H18O3；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为黑色斑点；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：1.82(3H，dd，J=6.9，1.7 Hz，H-1)，6.35(1H，dq，J=15.8，6.9 Hz，H-2)，5.52(1H，brd，J=15.8 Hz，H-3)，4.29(1H，d，J=6.5 Hz，H-8)，4.12(1H，t，J=6.5 Hz，H-9)，5.56(1H，ddt，J=15.4，6.9，1.4 Hz，H-10)，5.87(1H，m，H-11)，2.18(2H，q，J=7.2 Hz，H-12)，1.68(2H，m，H-13)，3.67(2H，t，J=6.5 Hz，H-14)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：18.9(C-1)，144.6(C-2)，109.4(C-3)，79.2(C-4)，78.0(C-5)，71.4(C-6)，71.2(C-7)，66.7(C-8)，75.4(C-9)，127.5(C-10)，135.1(C-11)，28.8(C-12)，31.6(C-13)，62.2(C-14)。结合文献[5]，鉴定该化合物为党参炔醇(lobetyol)。

化合物4：黄色油状物；C14H18O3；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为黑色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：1.89(3H，dd，J=6.9，1.7 Hz，H-1)，6.21(1H，dq，J=10.9，6.9 Hz，H-2)，5.55(1H，brd，J=10.9 Hz，H-3)，4.25(1H，d，J=6.7 Hz，H-8)，4.00(1H，dd，J=6.9，6.7 Hz，H-9)，5.58(1H，ddt，J=15.4，6.9，1.4 Hz，H-10)，5.82(1H，dtd，J=15.4，6.9，0.9 Hz，H-11)，2.16(2H，q，J=7.3 Hz，H-12)，1.65(2H，m，H-13)，3.58(2H，t，J=6.5 Hz，H-14)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：16.5(C-1)，144.1(C-2)，109.7(C-3)，75.8(C-4)，78.5(C-5)，70.9(C-6)，83.0(C-7)，67.8(C-8)，76.6(C-9)，129.6(C-10)，135.2(C-11)，29.8(C-12)，33.1(C-13)，62.3(C-14)。结合文献[6]，鉴定该化合物为异党参炔醇(isolobetyol)。

化合物5：棕黄色油状物；C20H28O8；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为黑色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：3.58(2H，t，J=6.5 Hz，H-1)，1.66(2H，m，H-2)，2.18(2H，q，J=7.2 Hz，H-3)，5.91(1H，dt，J=15.4，6.9 Hz，H-4)，5.46(1H，ddt，J=15.4，8.3，1.2 Hz，H-5)，4.27(1H，brdd，J=8.0，6.2 Hz，H-6)，4.43(1H，brd，J=6.2 Hz，H-7)，5.58(1H，dqd，J=15.8，1.8，0.6 Hz，H-12)，6.33(1H，dq，J=15.8，6.9 Hz，H-13)，1.81(3H，dd，J=6.9，1.8 Hz，H-14)，4.31(1H，d，J=7.7 Hz，H-1′)，3.26(1H，dd，J=9.0，7.7 Hz，H-2′)，3.32(1H，dd，J=9.0，8.8 Hz，H-3′)，3.28(1H，dd，J=9.4，8.8 Hz，H-4′)，3.18(1H，ddd，J=9.4，6.0，2.2 Hz，H-5′)，3.85(1H，dd，J=12.0，6.0 Hz，H-6a′)，3.65(1H，dd，J=12.0，2.2 Hz，H-6b′)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：62.3(C-1)，33.0(C-2)，29.8(C-3)，138.9(C-4)，126.6(C-5)，81.2(C-6)，66.6(C-7)，81.8(C-8)，71.2(C-9)，72.5(C-10)，78.1(C-11)，110.5(C-12)，145.4(C-13)，18.9(C-14)，100.7(C-1′)，74.9(C-2′)，78.0(C-3′)，71.7(C-4′)，78.0(C-5′)，62.7(C-6′)。结合文献[7]，鉴定该化合物为党参炔苷(lobetyolin)。

化合物6：黄色油状物；C20H24O7；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为紫色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：7.01(1H，d，J=1.8 Hz，H-2)，6.72(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.82(1H，dd，J=8.1，1.8 Hz，H-6)，4.82(1H，d，J=5.7 Hz，H-7)，4.35(1H，td，J=5.7，3.7 Hz，H-8)，3.83(1H，dd，J=12.0，5.7 Hz，H-9a)，3.76(1H，dd，J=12.0，3.7 Hz，H-9b)，6.99(1H，brs，H-2′)，6.86(2H，brs，H-5，H-6′)，6.50(1H，dt，J=15.9，1.4 Hz，H-7′)，6.23(1H，dt，J=15.9，5.8 Hz，H-8′)，4.19(2H，dd，J=5.8，1.4 Hz，H-9′)，3.79(3H，s，OCH3)，3.80(3H，s，OCH3)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：134.1(C-1)，111.8(C-2)，148.7(C-3)，147.0(C-4)，115.6(C-5)，121.0(C-6)，74.1(C-7)，86.2(C-8)，62.2(C-9)，133.0(C-1′)，111.3(C-2′)，151.9(C-3′)，148.9(C-4′)，118.8(C-5′)，120.6(C-6′)，128.5(C-7′)，131.5(C-8′)，63.8(C-9′)，56.5(OCH3)，56.3(OCH3)。结合文献[8-9]，鉴定该化合物为赤式-愈创木基甘油-β-O-4′-松柏醇(erythro-guaiacylglycerol-β-O-4′-coniferyl ether)。

化合物7：白色无定形粉末；C20H22O6；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为黄色斑点；1H-NMR(CDCl3，600 MHz)δ：3.10(2H，m，H-1，5)，4.74(2H，d，J=3.9 Hz，H-2，6)，3.87(2H，dd，J=9.2，3.8 Hz，H-4a，8a)，4.24(2H，dd，J=9.2，6.8 Hz，H-4b，8b)，6.89(4H，m，H-2′，5′，2″，5″)，5.59(2H，brs，H-4′，4″)，6.82(2H，dd，J=8.1，1.9 Hz，H-6′，6″)，3.91(6H，s，2×OCH3)；13C-NMR(CDCl3，150 MHz)δ：54.1(C-1，5)，85.9(C-2，6)，71.6(C-4，8)，132.9(C-1′，1″)，108.6(C-2′，2″)，146.6(C-3′，3″)，145.2(C-4′，4″)，114.3(C-5′，5″)，118.9(C-6，6″)，55.9(2×OCH3)。结合文献[10]，鉴定该化合物为松脂醇(pinoresinol)。

化合物8：白色透明油状；C11H16O3；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为黄色斑点；1H-NMR(CD3OD，600 MHz)δ：1.99(1H，m，H-2a)，1.53(1H，m，H-2b)，4.22(1H，m，H-3)，2.42(1H，m，H-4a)，1.74(1H，m，H-4b)，5.75(1H，s，H-7)，1.76(3H，s，H-9)，1.47(3H，s，H-10)，1.28(3H，s，H-11)；13C-NMR(CD3OD，150 MHz)δ：37.2(C-1)，46.5(C-2)，67.3(C-3)，48.0(C-4)，89.0(C-5)，174.5(C-6)，113.4(C-7)，185.7(C-8)，31.1(C-9)，27.0(C-10)，27.5(C-11)。结合文献[11]，鉴定该化合物为黑麦草内酯(loliolide)。

化合物9：白色无定形粉末；C11H10O4；TLC经体积分数10%硫酸-乙醇溶液喷雾显色为蓝色斑点；1H-NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ：6.30(1H，d，J=9.4 Hz，H-3)，7.96(1H，d，J=9.4 Hz，H-4)，7.26(1H，s，H-5)，7.08(1H，s，H-8)，3.86(OCH3)，3.80(OCH3)；13C-NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ：161.0(C-2)，109.3(C-3)，144.8(C-4)，113.1(C-5)，146.3(C-6)，149.9(C-7)，100.5(C-8)，153.0(C-9)，111.6(C-10)，56.6(OCH3)，56.3(OCH3)。结合文献[12]，鉴定该化合物为滨蒿内酯(scoparone)。

本研究从小萼瓜馥木枝叶乙醇提取物的石油醚部分中分离并鉴定出2个黄酮类化合物(化合物1和2)、3个炔类化合物(化合物3、4和5)、2个木脂素类化合物(化合物6和7)、1个萜类化合物(化合物8)和1个香豆素类化合物(化合物9)，这9个化合物均首次从小萼瓜馥木中分离获得。