添加生物活性多肽的抗衰老化妆品性能研究*

白耀辉，张优良，岑名迅，陈文杰，赖锐豪，丁 姣

(1 珠海安和生化科技有限公司，广东 珠海 519040；2 仲恺农业工程学院化学化工学院，广东 广州 510225)

随着科技的高速发展，人们的观念发生了巨大的变化，抗衰老化妆品在中国有着悠久的历史，早在唐朝就有武则天为了保持青春靓丽而用珍珠粉等敷面，以达到延缓皮肤衰老的目的[1]。如今，人口老龄化越来越严重，促使了抗衰老化妆品的飞速发展。抗衰老化妆品主要是在化妆品中添加抗衰老的功能性物质，以达到抗衰老的目的，目前，在化妆品中添加的主要是有生物活性的多肽类，如乙酰基六肽-8，棕榈酰三肽-1，肌肽[2]等。

多肽是肽类中的一部分，是构成生命的重要物质[3]。科学研究表明．活性生物多肽的形成，实际上是由20余种天然氨基酸通过肽链以不同的排列方式和形态构成。由于一些多肽具有美白，美容，抗衰老，祛疤痕，祛痘[4]等功能，在化妆品方面上越来越受到重视，在化妆品中添加生物活性多肽，以达到美白，抗衰老[5]的目的，在化妆品中应用越来越广泛，如抗衰老的面部原乳，抗衰老的面膜等[6-7]。

在抗衰老多肽的作用中，不同的多肽作用机理不同，有些多肽是神经递质抑制类，有些是信号类，还有是抗氧化类的，它们的作用机理不同，如果将不同的多肽复配起来，如信号类的多肽与神经递质抑制类的多肽复配，这样多种机理同时进行，互补互助，以达到更好的效果[8]。

本研究选用乙酰基六肽-8、棕榈酰三肽-1和肌肽作为添加剂，制备单多肽面部乳液和复配多肽面部乳液，探究不同多肽或复配多肽添加剂对面部乳液的理化性质、感官性质及抗衰老性质的影响。

1 实 验

1.1 仪器与试剂

1.1.1 实验仪器

电子天平；干燥箱/培养箱；电动离心机；旋转式粘度计；霉菌培养箱；高速分散均质机；电热恒温水浴锅；pH仪。

1.1.2 实验试剂

1%卡波姆；山梨坦硬脂酸酯/蔗糖椰油酸脂；出芽短梗酶多糖；霍霍巴蜡 PEG-120 酯类；丙二醇；氨基酸保湿剂；月桂氮卓酮//PEG-40/氢化蓖麻油；三乙醇胺；β-葡聚糖；1%透明质酸钠；1%聚谷氨酸钠；聚季铵盐-51；二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐；丙烯酸钠/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物；杰马BP；苯氧乙醇；乙酰基六肽-8；棕榈酰三肽-1；肌肽。

1.2 实验方法

1.2.1 面部乳液配方

表1 面部乳液的配方Table 1 The formula of facial lotion

1.2.2 面部乳液的制备

以200 g为乳液总量，按表1中称量山梨坦硬脂酸酯(和)蔗糖椰油酸脂，出芽短梗酶多糖，丙二醇于250 mL的烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀，再加入110.5 g的水，用玻璃棒搅拌均匀，用电热恒温水浴锅加热至90 ℃，后按表中加入A组的其他原料，用搅拌机以800 r/min转速搅拌至固体全部溶解，待固体溶解后以400 r/min的转速搅拌降温至45 ℃待用。取另一250 mL烧杯准确称量B组和C组的原料于烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。待A组原料溶液降温到45 ℃，A、B、C三组溶液混合，用均质机以3500 r/min转速均质三分钟，均质完成后再用搅拌机以400 r/min转速搅拌，并降温至室温。

1.2.3 单功能多肽乳液的制备

按照200 g面部乳液的6%添加功能性多肽。其中，分别选取乙酰基六肽-8、棕榈酰三肽-1和肌肽等三种功能性多肽，制备A、B、C号多肽乳液。

表2 单功能性多肽乳液中多肽种类和添加量Table 2 The types and additions of peptides in monofunctional polypeptide emulsions

1.2.4 复配多肽乳液的制备

按照1:1或1:1:1复配功能性多肽，并按照200 g面部乳液的6%添加复配功能性多肽，制备复配多肽乳液。分别对样品标志为样品E、F、G、H，具体复配方式如表3所示。

表3 复配多肽乳液中多肽复配类型和添加量Table 3 The types and additions of polypeptides in polypeptides emulsion

1.2.5 表征与测试

(1)乳液理化性质测定

根据GB/T13531.1-2008中的稀释法测量乳液的pH值；采用旋转式粘度计测量乳液的粘度；采用电动离心机，在2000～5000 r/min下离心30 min，观察离心后乳液是否发生油水分离现象，测量样品乳液的离心稳定性；采用高低温试验箱对乳液样品的热寒循环稳定性进行测定，程序变温方式为：先40 ℃下恒温24 h，然后-15 ℃恒温24 h，变温速率为10 ℃/min，如此循环7次，观察乳液油水分层现象变化。

根据化妆品安全技术规范(2015年版)国家微生物检验标准对乳液样品进行微生物检验。称取10 g乳液样品，加入装有玻璃珠和90 mL灭菌生理盐水的三角瓶里，充分振荡均匀，静置15 min后，加入样品上清液作为1:10的检液。

(2)乳液的感官性质测定

试样乳液基本的感官性质主要测试试样的铺展性，保湿性，光泽度，细腻性，黏滞感，清爽度，白皙度七个方面，具体感官测定方法如下：

①选取手臂干净，皮肤健康，无化妆品过敏反应20～23岁的志愿者87名，男生45名，女生42名。

②以双手前臂内侧为实验区，选取4 cm×4 cm的实验区域，并进行标记，每个标记区域将之分成四份等面积区域，双手总共有八份等面积区域。

③进行实验前需将手臂清洗干净，并用75%的乙醇溶液消毒清洗手臂内侧，3 min过后将八个试样固定份量分别涂抹在八个区域，轻轻涂抹15圈后进行评估打分。

④随后志愿者将每天按照上面1到3的步骤重复一遍，实验周期为一个月，在进行实验时手臂不能涂抹其他的任何化妆品，并将每次的表格收齐，最后统计平均值。本次实验采用的是十分制，8～10表示感觉很好，6～8分表示感觉良好，6分以下表示感觉一般或者不好。

(3)抗衰老效果评价

采用对比法对乳液样品的抗衰老效果进行测定，选取40名年龄在20～30岁的女性志愿者，她们拥有眼角纹，并大致相同，皮肤性质，皱纹程度，相差不大。将这些志愿者随机分成八组对应八个样品，分别为A组、B组、C组、D组、E组、F组、G组、H组，使用对应编号的样品。每组志愿者使用同一个样品。这些志愿者皮肤对化妆品不过敏，在实验期间禁止用其他化妆品。志愿者们每天早上八点与晚上九点，将眼角纹处擦洗干净，在室内晾干十五分钟，每次取固定的试样，轻轻涂抹在眼角纹处，再用指腹轻轻的按摩15圈，使试样更好的被皮肤吸。实验周期为三个月，三个月后观察志愿者的眼角纹减轻程度。

2 结果与讨论

2.1 乳液理化性质测定

2.1.1 pH值

在乳液基本性质的测定中，按照GB/T29665-2013对护肤乳液理化性质的测定方法测定，看是否符合GB/T29665-2013对护肤乳液理化性质的标准要求。A试样pH的测定结果如表4所示。由表4可以看出，实验中制备的试样pH的范围在6.5～7.0之间，pH相对变化较小，符合GB/T29665-2013对护肤乳液的要求。

2.1.2 粘 度

由表4可以看出试样乳液的粘度范围大致是7000～8000，粘度范围相对较小，各试样的粘度相差不大。

表4 样品乳液的pH值和粘度Table 4 The pH and viscosity of sample emulsion

2.1.3 微观形态

图1是各试样在400倍下的显微镜图像，由上面各图中可以看出试样乳液形状均匀，大都成圆球状或者椭圆状，粒径大小约为0.1～10 μm，故其结构细腻，使用肤感较好。

2.1.4 离心稳定性

图1 样品乳液的微观形态Fig.1 Micromorphology of sample emulsion

在离心稳定性的测定中，试样乳液都达到了GB/T29665-2013对护肤乳液的标准要求，由此可以知道试样乳液的稳定性较好。添加功能肽并不影响乳液样品的离心稳定性。

表5 样品乳液的离心稳定性Table 5 The centrifugal stability of sample emulsion

2.1.5 寒热循环稳定性

在耐寒耐热的测定中，试样乳液都达到了GB/T29665-2013对护肤乳液的标准要求，由此可以知道试样乳液的稳定性较好。添加功能肽并不影响乳液样品的寒热循环稳定性。

表6 样品乳液的寒热稳定性Table 6 The cold and thermal stability of sample emulsion

2.1.6 微生物检验

图2 样品乳液的微生物检测Fig.2 The microbial detection of sample emulsion

图2是样品微生物细菌及霉菌的检验，由图中的照片可以看出样品中几乎没有生长细菌与霉菌的菌落，由此可知样品乳液的防腐性好，乳液的稳定性好。

2.2 乳液的感官性质测定

因为试样乳液制作过程中未添加任何香料，所以不对香气指标等进行测试。在人体皮肤评价中，取每次评价的分值最后计算出平均值，试样乳液基本的感官性质评价的结果如表7所示。由表7可以看出，八个样品的各个感官性质评分都达到了良好以上，可知试样乳液的给人的感官好，其中八个样品中细腻性评价分值最高，可知试样乳液的细腻性较好。

表7 样品乳液的感官性质Table 7 The sensory properties of sample emulsion

2.3 抗衰老效果评价

2.3.1 单功能多肽乳液

抗衰老功效评价过程中，通过对比志愿者眼角纹皱纹程度的减轻状况和观察皮肤改善状况来得出结论，在连续三个月的观察对比中，使用样品A的志愿者眼角纹没有得到明显的改变，或者没有变化，而使用B组、C组和D组志愿者的眼角纹皱纹程度稍微减轻，皮肤的衰老程度得到了一定的改善。因此可以得出下面的结论。(1)普通乳液不具有祛皱抗衰老的能力；(2)使用添加抗衰老功效性多肽的乳液，其减轻皮肤的皱纹与抗衰老的能力明显比空白组的能力强，这也证明了抗衰老多肽在皮肤抗衰老过程中的具有的重大作用。

2.3.2 复配多肽乳液

经过连续三个月的使用，对比志愿者使用前后的眼角纹减轻程度，从连续观察对比中可以看出使用试样添加多肽乳液复配的志愿者的皱纹得到明显的改善，眼角纹有很大的减轻效果。对比添加单方功效性多肽乳液的B、C、D组的效果，E、F、G、H组的复配多肽乳液的能有效减轻志愿者的皱纹。因此可以得出下面两个结论。(1)使用添加功效性多肽复配的抗衰老效果比添加单方功效性多肽好；(2)不同作用机理的多肽，可以通过复配，协调各种机理同时进行，达到更理想的效果。

3 结 论

探究不同多肽在乳液中抗衰老的效果极其复配的效果。三种不同的功效性多肽，作用机理也不同，但是最后三种多肽复配的达到的效果最好，说明不同作用机理的多肽可以互补，共同作用。所制备的试样的基本理化性质和感官性质，都达到了GB/T29665-2013对护肤乳液理化性质的标准要求。添加功效性多肽乳液具有更好的抗衰老能力，且复配多肽乳液的抗衰老效果明显优于单多肽乳液。