基于GC-MS分析接骨木3个品种果实中挥发油成分△

孙丹丹，姚俊修，刘富裕，王琳，韩子衍，郭庆梅*，吴德军*

1.山东中医药大学，山东 济南 250355； 2.山东省林业科学研究院，山东 济南 250014；3.平阴县环卫绿化中心，山东 济南 250400

接骨木SambucuswilliamsiiHance是忍冬科(Caprifoliaceae)接骨木属(Sambucus)落叶灌木或小乔木，又名公道老、接骨丹、大接骨丹、续骨木、铁骨散等[1]。接骨木在我国历史悠久，始载于《新修本草》，资源丰富，分布广泛，主要分布在东北、河北、山西、陕西、山东、江苏、安徽、浙江等地[2]。接骨木的根、茎、叶、花、果实均可入药，具有接骨续筋、活血祛瘀、祛风利湿的功效。目前对接骨木的研究主要集中在根皮、茎、叶、果实的化学成分和药理作用方面的研究[3-4]，其化学成分主要包括黄酮、三萜、酚酸、环烯醚萜等，具有促进骨折愈合、抗骨质疏松、抗炎、抗菌等作用，对接骨木中挥发油成分的研究较少[5-6]，接骨木籽油具有清除自由基、降血糖、降血脂等生物活性[7]。由于接骨木果实成熟期不一致，不利于果实收集利用，导致落果现象严重，为改善这一问题，研究人员培育出果实成熟期稳定的天然红1号和耐盐碱新品种，同时耐盐碱品种能更好地适应盐碱地等土壤环境，扩大接骨木的栽培范围。本实验采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对接骨木传统品种和2个新品种的果实挥发性成分进行鉴定分析，寻找其特征成分，为接骨木挥发油提取物的品种鉴别提供参考依据，为充分利用接骨木药材及相关产品的开发利用提供实验基础。

1 材料

1.1 试药

实验样品是由山东省林业科学研究院提供的接骨木3个品种药材，于2017年8月采摘。样品经山东中医药大学郭庆梅教授鉴定，均为忍冬科(Caprifoliaceae)接骨木属(Sambucus)植物接骨木SambucuswilliamsiiHance，见表1。水为蒸馏水，试剂均为分析纯。

表1 接骨木样品鉴定结果

1.2 仪器

GCMS-QP2010型气相色谱质谱联用仪(日本岛津公司)，色谱柱：DB-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，FA2004N型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)。

2 方法

2.1 挥发油的提取

将接骨木样品打粉，过40目筛，分别取约100 g，称质量，加入10倍量的水，参照2015年版《中华人民共和国药典》(四部)通则2204[8]，利用水蒸气蒸馏法直火加热8 h，分离出挥发油，加无水硫酸钠干燥后备用。

2.2 GC-MS分析

2.2.1气相色谱条件 进样口温度250 ℃，载气为高纯氦气(≥99.999%)，传输线温度250 ℃，分流比100∶1，进样量1 μL，程序升温(初始温度60 ℃，保持10 min；以速率3 ℃·min-1升至200 ℃，保持5 min)。

2.2.2质谱条件 电离方式为电子轰击离子源(EI)，电子轰击能量70 eV，接口温度200 ℃，离子源温度200 ℃；ACQ方式：scan；扫描速度：769 Da·s-1；扫描范围m/z50～400。

3 结果

挥发性油含量见表2，耐盐碱品种挥发油质量分数为0.46%，天然红1号品种挥发油质量分数为0.47%，青州15号品种挥发油质量分数为0.46%，按照上述分析条件进行测试，得接骨木3个品种果实的挥发性成分的总离子流图，见图1～3；鉴定结果见表3。从耐盐碱品种果实共分离出32个化合物，鉴定出30个化合物；从天然红1号品种果实共分离出62个化合物，鉴定出34个化合物；从青州15号品种果实共分离出26个化合物，鉴定出24个化合物。

表2 接骨木3个品种药材果实的挥发油GC-MS分析结果

续表2

续表2

续表2

注：—表示不含有此成分。

图1 耐盐碱品种果实挥发油GC-MS总离子流图

图2 天然红1号品种果实挥发油GC-MS总离子流图

图3 青州15号品种果实挥发油GC-MS总离子流图

4 小结与讨论

耐盐碱品种果实中挥发油的主要成分为棕榈酸乙酯(44.72%)、油酸乙酯(26.71%)、棕榈酸甲酯(4.71%)，现已鉴定的化合物占总成分的93.8%。天然红1号品种果实的挥发油主要成分为(+)-10-乙酰甲基-3-蒈烯(26.11%)、棕榈酸乙酯(13.40%)、6，10，14-三甲基-2-十五碳酮(9.47%)，许多含量高的挥发性化合物尚未鉴定出，现已鉴定的化合物占总成分的54.8%。青州15号品种果实的挥发油主要成分为反式-2，4-二甲基噻吩(38.66%)，2-(2-甲基丙基)-3，5-二(1-甲基乙基)吡啶(37.84%)，现已鉴定的化合物占总成分的92.3%。接骨木3个品种的果实中挥发油化学成分丰富，棕榈酸乙酯可用作软化剂、润滑剂；油酸乙酯主要用于润滑剂、抗水剂、树脂韧化剂的药用辅料，也用作香料；接骨木挥发油化学成分丰富，有待于开发其潜在的药理价值。

接骨木资源丰富，种类很多，全世界约有20种接骨木，有6种分布在我国，其中野生接骨木有5种，引种1种栽培品种。常见的接骨木属包括：接骨木SambucuswilliamsiiH.、陆英(接骨草)SambucuschinensisL.、西伯利亚接骨木Sambucussibirica N.、毛接骨木Sambucuswilliamsiivar. miquelii (Nakai) Y. C. Tang、血满草SambucusadnataW.及西洋接骨木Sambucusnigra L.等[9]。实验结果表明，不同品种的接骨木果实中所含挥发油种类差异较大，耐盐碱品种和青州15号品种中挥发油种类相同的有8种，与天然红1号品种有3种相同，天然红1号品种和青州15号品种有1种相同的挥发油。耐盐碱品种果实有21个特有成分，天然红1号品种果实有32个特有成分，青州15号品种果实有16个特有成分，为接骨木的品种鉴别提供了参考依据。耐盐碱品种中多为小分子量的挥发油成分，可能与其抗盐碱作用相关。