盐酸氨溴索关键杂质的制备和控制

梁富文 丁现帅

(陕西汉江药业集团股份有限公司，陕西 汉中 723000)

盐酸氨溴索是溴己新的代谢产物，祛痰作用强于溴己新，它可促进呼吸道内粘液分泌物的排除，因而显著促进排痰，改善呼吸状况。常用于急、慢性支气管炎及支气管哮喘、支气管扩张、肺气肿、肺结核、肺尘埃沉着病的治疗；术后肺部并发症的预发性治疗；早产儿及新生儿婴儿呼吸窘迫综合症(IRDS)的治疗。

现行EP92药典中收录有5个杂质，而CP2015中仅收录1个杂质(即EP中杂质B)，为了更好地控制盐酸氨溴索的质量，我们对这些杂质进行了定向合成，同时合理推断出他们的产生原因和机理。又以定量加入实验方式对工艺做了相应的优化，对相关杂质做出相应限量。相关物质结构式如图1。

图1 盐酸氨溴索及关键杂质结构式Fig. 1 The structure of Ambroxol hydrochloride and key impurities

1 仪器

液相色谱岛津LC-10AT VAP

气相色谱岛津 GC-2010

核磁共振仪Bruker 500 MHz NMR apparatus

质谱仪Waters Xevo G2-S QTof

2 实验部分

2.1 目标物质A的合成

工艺描述：反应瓶中加入甲醇200 ml，2-氨基-3,5-二溴苯甲醛27.8 g，50～55 ℃下，滴加硼氢化钠溶液(硼氢化钠7.56 g→75 ml水)，液相监控反应，至2-氨基-3,5-二溴苯甲醛<2.0%，降温，滴水150 ml析晶，过滤，得到目标物质A(图2)。HPLC纯度：100.0 %(面积归一化法)。MS(m/z): 281.9[M+H]; 1H NMR(500MHz,DMSO-d6): 4.400～4.411(d,2H); 5.215(s,2H); 5.335～5.357(m,1H); 7.283～7.287(s,1H); 7.472～7.476(s,1H)。

图2 目标物质A反应式Fig. 2 The reaction formula of Target substance A

2.2 目标物质B的合成

工艺描述：反应瓶中加入甲醇100 ml，氨溴索游离碱15.0 g、甲醛1.4 g，升温至回流，保温，液相监控反应，至氨溴索游离碱<5%，降温，滴加水析晶，过滤，得目标物质B(图3)。HPLC纯度：98.5%(面积归一化法)。MS(m/z): 391.0[M+H];1HNMR(500 MHz,DMSO-d6): 1.140～1.209(m,2H); 1.593(s,2H); 1.901～1.922(d,2H); 2.065～2.084(d,2H); 2.497～2.510(m,1H); 3.089(s,1H); 3.359～3.400(m,2H); 4.450～4.483(s,1H); 4.686(s,2H); 6.623(s,1H); 7.379(s,1H); 7.673(s,1H)。

图3 目标物质B反应式Fig. 3 The reaction formula of Target substance B

2.3 目标物质C的合成

工艺描述：反应瓶中加入乙醇100 ml，反式-4-氨基环己醇15.0 g、2-氨基-3,5-二溴苯甲醛23.0 g，升温至回流，液相监控反应，保温反应至2-氨基-3,5-二溴苯甲醛<3%，降温，滴加水析晶，过滤，得目标物质C(图4)。HPLC纯度：99.0%(面积归一化法)。MS(m/z):377.1[M+H]; 1HNMR(500 MHz,DMSO-d6): 1.46～1.72(m,4H); 1.94～2.19(m,4H); 3.08(m,1H); 3.17(m,1H); 3.58(s,1H); 6.27(s,2H); 7.66(d,1H); 7.73(d,1H); 8.18(s,1H)。

图4 目标物质C反应式Fig. 4 The reaction formula of Target substance C

2.4 目标物质D的合成

工艺描述：反应瓶中加入缩合物顺反混合物(顺反比例65∶35的油状物)12.0 g，甲醇28.0 g，升温溶解，50 ℃搅拌30 min，降温至35 ℃，滴加硼氢化钠水溶液12.0 g(NaBH41.2 g→水10.8 g，碱调pH=12～13)，滴加完，30 ℃保温，液相监控，至缩合物<2%，加入丙酮21.0 g(eq丙酮∶eqNaBH4=4∶1)，加入水30.0 g，二氯甲烷60.0 g，33 ℃保温30 min，分层，水层中加入二氯甲烷30.0 g，提取分层，合并有机相，加入水30.0 g，再重复水洗两次，蒸馏二氯甲烷，蒸干，加入丙酮36.0 g，升温溶解，33 ℃保温搅拌20 min，降温20 ℃，滴加盐酸3.6 g，至溶液颜色浅黄色为止，冰水浴，保温1 h，过滤，19.0 g丙酮洗滤饼，将上步析晶母液静置，析晶，过滤，上步析晶母液再次静置，析晶，过滤，得目标物质D(图5)。HPLC纯度：97.0%(面积归一化法)。MS(m/z):379.0[M+H]; 1HNMR(500 MHz,DMSO-d6): 1.386～1.436(m,2H);1.721～1.864(m,2H); 2.088(s,4H); 3.098(s,1H); 3.817(s,1H); 4.110(s,2H); 5.471(s,2H); 7.580～7.628(m,2H); 9.100～9.256(s,2H)。

3 检测及控制

通过在EP液相系统中的定性研究，得到药品中的相关物质的HPLC保留时间，如表1。

表1 盐酸氨溴索关键杂质保留时间Tab. 1 Retention time of key impurities of ambroxol hydrochloride

图5 目标物质D反应式Fig. 5 The reaction formula of Target substance D

对盐酸氨溴索中涉及到的杂质进行加入实验，模拟氨溴索成盐步骤，考察盐酸氨溴索最终步骤对该杂质的去除能力，见表2。

表2 盐酸氨溴索加入实验结果Tab. 2 Results of the addition of ambroxol hydrochloride

4 结论

通过上述对盐酸氨溴索中的5个相关物质的定向合成，在液相系统下，对上述物质进行了定性研究，得到了其相对保留时间。并通过加入实验研究，可以明确制定盐酸氨溴索中杂质的限量，保证单杂<0.05%，确保生产工艺有良好的收率和质量重现性。