乳酸菌和水合铝硅酸钙钠对黄曲霉毒素B1脱毒及肉鸡的解毒作用

王亚欣，张 君，邱深本，刘思伽，戴志亮

（广东科贸职业学院，广东广州 510430）

黄曲霉毒素是由曲霉菌类真菌产生的，经常出现在饲料或食品中。黄曲霉毒素B1的毒性最大，可直接抑制动物生长和健康，诱发动物肝脏疾病和代谢紊乱，导致动物组织和产品中存在有毒残留物（左甜甜等，2019）。此外，被黄曲霉毒素B1污染的食品对人类有很强的致癌作用。从食品安全角度来看，开发更有效的方法来抵消黄曲霉毒素B1的毒性已成为最近动物营养的焦点。水合铝硅酸钙钠等粘土吸附剂在饲料工业中被广泛应用。但这些吸附剂容易对环境造成二次污染，随着对黄曲霉毒素B1的深入了解，微生物技术有望将这些有毒基团降解为零毒或低毒物质。因乳酸菌具有发酵食物和改善肠道菌群等功能被广泛应用。王晓伟等（2015）研究表明，乳酸菌可以作为天然生物拮抗剂来对抗霉菌及其高毒性代谢物。但在农场动物中，乳酸菌对黄曲霉毒素B1的脱毒作用研究非常有限，特别是与传统的硅土类产品相比。因此，本研究旨在探讨乳酸菌和水合钠钙铝硅酸盐对肉鸡日粮黄曲霉污染的解毒作用，同时评估其对肉鸡生长性能、养分消化率、免疫功能及黄曲霉毒素B1残留的影响。

1 材料与方法

1.1 试验设计 试验选择1日龄雌性肉鸡960只，根据体重一致性原则随机分为4组，每组8个重复，每个重复30只，分别饲喂阳性对照日粮（没有黄曲霉毒素B1污染，表1）、阴性对照日粮（阳性对照组日粮+45 μg/kg黄曲霉毒素B1）、乳酸菌日粮（阴性对照日粮+2.0×1010CFU/kg乳酸菌）和水合硅铝酸钙钠日粮（阴性对照日粮+3.5 g/kg水合硅铝酸钙钠），试验共开展21 d。试验鸡只按照常规饲养方法和免疫程序进行管理。

表1 阳性对照组配方组成及营养成分

1.2 生长性能和样品收集 每周称量肉鸡和饲料用量，并根据死亡率调整饲料用量。在试验结束前3 d，每个重复随机选择体重接近的6只鸡，收集并混合粪便，其中10%的样品冷冻干燥后测定养分消化率和黄曲霉毒素B1含量。试验第21天每个重复随机选择8只鸡翅下静脉采血后分离血清（-20℃保存），之后将鸡只屠宰，收集肝脏、肾脏、脾脏、法氏囊和胸腺，称重后-20℃保存。

1.3 样品分析 血清免疫球蛋白、样品黄曲霉毒素B1含量的测定采用ELISA试剂盒进行，淋巴细胞数量参考Liu等（2008）的研究方法。

1.4 数据分析 试验数据采用SAS软件单因素方差分析，采用Tukey’s honest进行显著性差异检验，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 生长性能和消化率 试验期间各处理肉鸡死亡率均正常（在5%以内），差异无统计学意义（数据未列出）。由表2可知，阴性处理组平均日增重和饲料报酬显著降低（P＜0.05），而与阴性对照组相比，乳酸菌、水合硅铝酸钙钠组和阳性对照组平均日增重显著提高8.92%、5.95%和6.69%（P＜0.05），饲料报酬分别显著提高7.94%、6.35%和6.35%（P＜0.05）。各处理组对肉鸡平均日采食量的影响无显著差异（P＞0.05）。与阳性对照组相比，阴性对照组干物质、粗蛋白质、粗脂肪、消化能的消化率显著降低，分别降低8.50%、10.63%、4.84% 和 3.85%（P ＜ 0.05），而乳酸菌组和水合硅铝酸钙钠组上述指标提高4.28%～15.3%（P＜0.05）。此外，乳酸菌组消化能的消化率较水合硅铝酸钙钠组显著提高1.56%（P＜0.05），而阳性对照组和乳酸菌组之间无显著差异（P＞0.05）。乳酸菌组钙和磷的消化率也显著高于其他各组（P＜0.05），其他组之间无显著差异（P＞0.05）。

表2 乳酸菌和水合硅铝酸钙钠对肉鸡生长性能和养分消化的影响

2.2 免疫器官相对重量及免疫指标 由表3可知，与阳性对照组相比，阴性对照组脾脏和肝脏相对重量显著提高（P＜0.05），法氏囊和胸腺相对重量显著降低（P＜0.05）。与阴性对照组相比，乳酸菌组脾脏和肝脏重量显著降低14.63%和6.38%（P＜0.05），而法氏囊和胸腺相对重量显著提高10.42%和5.23%（P＜0.05）。除胸腺相对重量外，乳酸菌组与水合硅铝酸钙钠组对其他免疫器官相对重量无显著影响（P＞0.05）。阳性对照组组、乳酸菌组和水合硅铝酸钙钠组较阴性对照组显著提高了T和B淋巴细胞数量（P＜0.05），但阳性对照组与乳酸菌组无显著差异（P＞0.05），但水合硅铝酸钙钠组较阳性对照组和乳酸菌组显著提高了这两个指标（P＜0.05）。与阴性对照组相比，乳酸菌组肉鸡血清IgA、IgM和IgG浓度显著提高214.84%、273.12%和95.33%（P＜0.05）。同时，水合硅铝酸钙钠组IgA和IgM浓度也较阴性对照组显著提高65.83%和50.34%（P＜0.05）。

表3 乳酸菌和水合硅铝酸钙钠对肉鸡免疫性能的影响

2.3 黄曲霉B1毒素残留 由表4可知，与阴性对照组相比，阳性对照组、乳酸菌组血清、肝脏、脾脏、肾脏、法氏囊和胸腺中黄曲霉毒素B1残留量显著降低49.93%～80.82%（P＜0.05），而水合硅铝酸钙钠组黄曲霉毒素B1残留量降低44.38%～66.12%（P＜0.05）。与阴性对照组相比，乳酸菌组粪中黄曲霉毒素B1残留量降低48.51%（P＜0.05），而水合硅铝酸钙钠组显著提高37.37%（P＜0.05）。

表4 乳酸菌和水合硅铝酸钙钠对肉鸡血清、器官和粪中黄曲霉B1毒素残留量的影响

3 讨论

本研究发现，黄曲霉毒素B1污染饲料会降低肉鸡平均日增重和饲料报酬，但不影响平均采日食量，水合硅铝酸钙钠提高了平均日采食量、饲料报酬和日增重。作为益生菌的乳酸菌被广泛用于改善肉鸡生长。Zuo等（2013）研究发现，在日粮中添加干酪乳杆菌、枯草杆菌、毕赤酵母和黄曲霉毒素B1降解酶组合后提高了43～73 d AA肉鸡的生长性能。在本研究中，乳酸菌可缓解黄曲霉毒素B1对肉鸡生长性能的毒副作用，其效果超过水合硅铝酸钙钠，达到与正常日粮相似的水平。在本研究中，日粮添加乳酸菌和水合硅铝酸钙钠可提高肉鸡干物质、粗蛋白质和粗脂肪的消化率，这与Gutierrez-Fuentes等（2013）的研究结果一致。乳酸菌对营养物质消化率的作用主要取决于所选菌株的特性，包括肠道繁殖能力、活性物质的产生、有机酸的产生、有益菌优化和肠道形态（Ahlberg等，2015）。由乳酸菌会降低肠道pH，有助于溶解和随后矿物质的吸收，而水合硅铝酸钙钠无这方面的作用。

在本研究中，黄曲霉毒素B1导致肝脏和脾脏肿大，但降低了法氏囊和胸腺的相对重量。Mavarez等（2005）报道，肉仔鸡暴露于70 μg/kg黄曲霉毒素B1下，肝脏和法氏囊损伤。此外，本研究中淋巴器官的组织病理学损伤导致黄曲霉毒素B1日粮中T淋巴细胞和B淋巴细胞比例降低。作者推测，黄曲霉毒素B1对鸡B、T淋巴细胞有免疫抑制作用。日粮添加乳酸菌和水合硅铝酸钙钠后减轻了黄曲霉毒素B1对器官和淋巴细胞的损伤，乳酸菌的保护作用比水合硅铝酸钙钠更明显，这与Hathout等（2011）的研究结果一致。

与阴性对照日粮组相比，水合硅铝酸钙钠组和乳酸菌组鸡血清中IgA、IgG、IgM浓度升高进一步证实了乳酸菌和水合硅铝酸钙钠对肉鸡免疫的有益作用。乳酸菌组和水合硅铝酸钙钠组分别使血清、肝脏、肾脏、脾脏、法氏囊和胸腺中黄曲霉毒素B1残留量降低了49.93%～80.82%和44.38%～66.12%，提示乳酸菌阻断了更多的黄曲霉毒素B1进入循环系统，这与Attia等（2013）的研究结果一致，其发现在减轻黄曲霉毒素B1对肝脏病变影响方面，嗜酸乳杆菌比水合硅铝酸钙钠和寡糖效果好。

4 结论

日粮中添加乳酸菌或水合硅铝酸钙钠可以改善肉鸡生长性能、养分消化率和免疫功能，降低黄曲霉毒素B1的毒副作用和组织残留量。但乳酸菌的改善效果比水合硅铝酸钙钠更明显。乳酸菌日粮中组织和粪中黄曲霉毒素B1残留的降低表明益生菌对毒素有生物降解作用。