油菜种子内生菌的检测及杀菌消毒处理方法

王健斌

摘 要 油菜内部的内生菌类型较多，且在不同品种的油菜中都能够检测到比率不同的带菌率，这说明在油菜内部容易形成产生细菌的环境，所以对于这种情况需要通过探索有效的油菜内生菌抑制处理方法来提升油菜种子的培育效果，对于种子的内生菌控制达到了预期目标后，种子才能够进入市场培育阶段形成有效的育苗机制，为蔬菜市场供应提供有力的保障。

关键词 油菜种子；内生菌；检测杀菌；消毒处理

在植物内部存在内生菌是较为常见的问题，尤其在种子阶段，对于植物生活是的某些阶段可能会在内部组织器官当中存在真菌、细菌，进而造成植物主体被感染，但是这种感染在初期阶段经常处于不可探知的状态，不过我们可以通过组织分离法从中找出内生菌的存在，同时通过对于植物不同时期的菌落状况进行了解在何种时期最容易出现对应的菌落生成环境，从而通过有效的杀菌消毒方法进行处理，提升种子存活率以及良品率，保证投放到市场的作物种子具备良好的成活率。

1 油菜种子内生菌的发现及杀菌现状

内生菌的存在在百余年前就已经在农业种植实验当中被发现，其主要是生活在没有外在感染状况的植物组织当中，所以在以往农业化学研究并未达到一定深度的情况下难以发现和进行处理，并且在发现之后也缺乏有效的应对措施，导致内生菌虽然存在并且对于种子种植良品率有较大影响，但在相当长一段时间内缺乏有效的应对措施。

在上世纪80年代，针对于内生菌的杀菌处理方式通过理论实践得到了证实，这才将农业种植过程中这一重要影响因素进行了有效的整治，内生菌的存在会导致抗病虫害药物的使用效果严重下降，所以在针对抗菌抑菌方面，需要投入针对性的药剂和化学配方才能够达到预期效果。当前，国内主要采用组织分离法来进行发现和杀菌的操作。对于油菜种子而言，需要使用不同的处理方法来检验杀菌效果，为培育无菌植苗带来有效的市场成果[1]。

2 通过种皮种胚带检测确定带菌率

对于油菜种子这种容易携带内生菌的支柱类型，我们可以采用对于种皮、种胚带菌率的检测来达到初步了解的目的。对此需要首先进行前期处理操作，将待检测种子进行蒸馏水清洗之后再通过无菌水浸泡达到24小时以上，保证种子泡软，方便进行种皮的获取。在剥离过程中，需要对种子的处理步骤进行精细的划分，同时对于过程中的温度计量也需要有足够的科学认知，一般以25摄氏度为最佳环境效果，这样对于后续统计带菌率也有较大的影响[2]。

在初步通过种皮剥离获得带菌率的数据之后，需要通过对不同的杀菌试剂进行使用来观测具体效果。一般农业种植采用升汞试剂较多，对于不同类型的油菜种子内生菌杀灭效果也相对较好，通过实验可以发现，对于不同类型的油菜种子，不同试剂的杀菌效果也存在较大的变化。在过程中除了杀菌操作之外，也需要对杀菌剂的使用有足够的专业意识，例如升汞本身并非直接加入杀菌剂，而是通过先后两个阶段的分开加入以实现最好的处理效果。

在完成杀菌剂投放之前首先要对已经取出种皮的种子内部菌落进行观察，计量数字和种类之后再行进行杀菌操作，对于培养器皿添加杀菌剂之后，应该进行有效标记并使用高分子膜封口避免外接细菌真菌进入影响实验数据准确性。培养过程一般以5天为单位，在完成培养后再行观察菌落状况才能最终确定杀菌剂对于油菜种子的具體除菌效果。

3 油菜种子内生菌杀灭率统计

在市场常见油菜种子类型的针对实验当中，对于种皮带菌率以及种胚的带菌率是存在较大差别的，种皮因为直接接触外界环境，所以在其中存在的内生菌较多，种胚直接接触种皮的部分也存在带菌率相对较高的状况。而在使用升汞进行处理之后，常见的油菜种子类型都能够在带菌率上有较好的处理结果，菌落种类和数量都会极大幅度的下降，另外代森锰锌也具有较好的处理效果，针对于原始带菌率较高的甘油5号效果更加明显，能够将菌落数量控制在较低的范围内，在部分实验培养皿中甚至能够实现带菌率0的效果，这充分说明了对应杀菌剂在应对油菜种子内生菌的情况下能够产生良好的处理效果[3]。

油菜种子本身因为带菌率较高，并且不同种类之间的带菌率也存在一定的差异，所以需要在处理和杀菌过程中使用相对浓度较高的药剂，保证带菌率状况能够得到良好的调控，同时需要注意的是油菜种子的内生菌可能同时存在于种皮和种胚内，对于种子后续的成长和根苗的发育都会形成严重的影响，因此在杀菌防虫方面必须要保证喷洒对应效果的除菌剂，以保证最终种植效果。

4 油菜种子内生菌的负面影响预防

除了影响生长之外，油菜种子内生菌对于种子的自发接种和繁殖也会产生严重的影响，因此在进行杀菌处理过程中务必要保证药剂的用法用量符合操作规范，要做到不盲目用药也不为了节约成本减少药剂量，这样才能够真正从种植角度保证实际效果。

当前农业种植在科学化管理方面所进行的努力重点就体现在种子发苗率以及生长效果方面，所以在油菜种子的种植方面，同样需要予以极大的关注，因为内生菌的存在不仅影响种植效果和最终的成品产出量，同时对于后续种植过程中的繁殖培育也存在较大的影响，通过对于升汞等杀菌剂的正确剂量应用，达到最佳的内生菌灭杀效果，才能够促进后续种植不会产生减产或者出现良品率不高的情况，保证农业种植能够收获相应的成果。同时对于农业科学的研究也产生相应的推动作用[4]。

综合而言，对于杀菌实验首先要从生物和化学角度进行测试是否能够保证杀灭细菌的效果，其中最有效的方法主要集中在提高汞含量来提升杀菌效果，每0.1%的浓度提升就能够产生良好的促进效果，而且对于市面上一些杀菌抑菌制剂也可以有针对性的进行融合使用，能够达到更好的综合杀菌效果，对于油菜种子内生菌能够产生良好的针对性，提升无菌苗的出产率，对于农业种植以及市场供应都会产生巨大的促进效果。

参考文献

[1]陈利军，等.油菜内生球毛壳菌抑菌作用初步测定[J].河南农业科学，2005（07）：56-58.

[2]张献芳，等，2株内生细菌在油菜体内的定殖、促生长及抗虫性检测[J].华中农业大学学报，2011，030（002）：143-147.

[3]李宁.油菜内生拮抗细菌的筛选及对菌核病菌的抑制作用研究[D].安徽农业大学，2013.

[4]夏娟娟，等.植物促生内生细菌强化油菜富集土壤铅镉重金属的研究[J].2006.11