晚期恶性肿瘤患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群水平变化分析

高乃姝，朱晓雪，王明迪

（北京大学首钢医院，北京 100144）

人体免疫系统中，细胞免疫可有效抗肿瘤，其中以T淋巴细胞亚群中的CD8+、CD4+最为关键，CD8+能够对靶细胞起到细胞介导细胞毒作用，对免疫反应具有抑制作用，而CD4+具有免疫监视功能，可辅助B细胞分泌抗体，增加白细胞介素Ⅱ含量，刺激自然杀伤细胞功能，杀灭肿瘤细胞[1]。二者之间的平衡，对机体免疫功能的维护具有重要作用。化疗是临床上对恶性肿瘤患者进行治疗的重要手段，其所使用药物大部分属于非特异性细胞毒药品，可降低机体免疫力，而T淋巴细胞亚群作为主要的人细胞免疫成分，亦会受到一定的影响[2]。为此，本研究分析了化疗前后晚期恶性肿瘤患者的T淋巴细胞亚群水平变化情况。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月～2018年12月我院肿瘤科及血液科住院病人进行TB淋巴细胞亚群检测的45例恶性肿瘤患者，其生存时间均超过3个月。入选者男26例，女19例；年龄29～70岁，平均（55.54±3.29）岁；肿瘤类型：胃癌9例，肺癌12例，乳腺癌12例，肝癌2例，结直肠癌5例，非霍奇金淋巴瘤5例。

1.2 方法

①主要仪器与试剂：流式细胞仪、蜗旋震荡器、台式离心机、加样枪（1000ul、200ul、20ul）流式细胞专用试管、鞘液；PBS。Simultest IMK Lymphocytes Kit检测试剂盒：A:CD3-FITC，CD8-PE，CD45-PerCP，CD4-APC；B:CD3-FITC，CD16+56-PE，CD45-PerCP，CD19-APC；FACS Lysing Solution红细胞裂解液；均自美国Becton-Dickinson（BD）公司购得。②实验步骤：取流式试管2支，依次编号为A和B，分别加入荧光抗体 A、B 10ul；收集抗凝血2-3ml，置于室温下＜6 h，摇匀，反向加样，将50 uL全血在不碰到管壁的前提下加入试管内，于室温下避光保存，时间为15 min；将试管取出，每管添加10倍稀释的450 uL FACS Lysing Solution，稍稍用力，混匀，避光放置10 min，待管内液体透亮；4℃避光，并于1 h之内上机检测。

1.3 评价指标

记录化疗前以及化疗后4 个月的患者总T 淋巴细胞百分比（T%）、辅助/诱导T淋巴细胞百分 比（ C D 4+T % ） 、 抑 制/细 胞 毒T淋 巴 细 胞 百分比（CD8+T%）、CD4+T%/CD8+T%。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件，计量资料采用“±s”表示，t检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

患者化疗后CD4+T%及CD4+T%/CD8+T%低于化疗前，T%、CD8+T%高于化疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 化疗前后患者T淋巴细胞亚群水平对比（±s）

表1 化疗前后患者T淋巴细胞亚群水平对比（±s）

时间 T%（%） CD4+T%（%） CD8+T%（%） CD4+T/CD8+T化疗前(n=45) 69.15±5.06 34.57±5.09 33.06±4.23 1.59±0.13化疗后(n=45) 87.62±3.54 22.63±3.41 47.52±5.09 0.43±0.22 t 20.064 13.073 14.657 30.451 P 0.000 0.000 0.000 0.000

3 讨 论

在肿瘤疾病的发生与进展过程中，机体免疫系统的作用不可忽视。相关研究指出，免疫系统可监测，并消除肿瘤细胞，而接受器官移植、存在获得性免疫缺陷或者免疫功能不全的患者身患肿瘤疾病的几率可能更高[3]。在人类机体中，完善的免疫系统可通过免疫监视，规避肿瘤的出现，抑制肿瘤疾病进展，故临床上亦可通过淋巴细胞水平的变化对恶性肿瘤患者病情进行评估。

T淋巴细胞作为人体免疫系统中功能强大的重要细胞群，可通过各T淋巴细胞亚群之间的相互作用，有效维持正常的机体免疫。而紫杉醇、顺铂、多柔比星等药物均可提高化疗杀伤敏感性，影响肿瘤患者机体免疫力。本研究结果显示，患者化疗后CD4+T%及CD4+T%/CD8+T%低于化疗前，T%、CD8+T%高于化疗前，提示化疗可在不同程度上影响晚期恶性肿瘤患者的外周血T淋巴细胞亚群水平。究其原因，化疗药物毕竟属于细胞毒类药物，具有毒性强、选择性差的特点，可对免疫系统造成损伤，干扰免疫功能的实现[4]。化疗后的肿瘤患者免疫功能受到抑制，机体识别或者杀伤突变细胞的功能减弱，但随着时间的推移，化疗药物在患者体内代谢完全后，其免疫功能可逐渐得到恢复，T淋巴细胞亚群水平也会随之恢复正常[5]。临床上可借此对化疗效果及患者病情进行观察，以及时进行调整，更好地维护患者健康。

综上所述，晚期恶性肿瘤患者在接受化疗后，外周血T淋巴细胞亚群水平改变，可为治疗方案的制定以及疗效评估提供依据。