氟中毒绵羊血清肝功能指标的测定与分析

王勇，贺晓龙，向雪，卢福山

（青海大学农牧学院，青海 西宁 810003）

慢性氟中毒是由于动物长期摄取的氟化物超过正常的生理需要量而引起的中毒病。陈荣等［1］认为氟中毒非骨相损伤主要是累及肝脏、肾脏、神经系统、内分泌系统以及生殖系统。肝脏作为体内主要的代谢器官，在储存肝糖原、合成蛋白质、解毒等方面起着非常重要的作用。大量研究表明，当肝脏受损时，多项肝功能指标会有不同程度的改变，且多集中于人和鼠［2-7］，尤其天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶是反映肝细胞有无受损以及严重程度的最重要指标。有关慢性氟中毒绵羊肝功能指标的研究甚少，大多数集中在人和大鼠方面的研究。因此，本试验通过测定疑似慢性氟中毒绵羊的血清肝功能指标，了解氟对绵羊肝脏功能的损伤情况，为进一步诊断和治疗氟中毒病提供基本依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物 供试动物是来自青海省某地区的藏系绵羊。患病绵羊临床症状为精神沉郁，走动缓慢，被毛无光泽，牙齿表面出现黄色或黄褐色斑点，门牙有一定的磨损。部分绵羊精神萎靡，时不时卧地不起，被毛粗乱，采食费力，门齿磨损严重或缺失，臼齿齿面发黑，牙齿磨面凹凸不平。初步诊断为慢性氟中毒。

1.2 分组 将发病区绵羊根据牙齿状况分为严重组和轻微组，严重组为牙齿色泽发黑发暗，门齿磨损严重，上下臼齿异常，齿列不整，咀嚼面凹凸不平，甚至出现脱落；轻微组为牙齿表面出现黄色或黄褐色斑点，牙面有一定的磨损。健康组绵羊处于离发病区10 km以外的地区，临床健康，牙面白色且有光泽，牙齿完整无缺损。

1.3 血样采集 用真空管采集血样5 mL，立即送实验室，分离血清，备用。

1.4 测定项目与方法 采用南京建成生物工程研究所研制的试剂盒测定血清总蛋白（TP）和血清白蛋白含量（ALP），血清丙氨酸氨基转移酶活性（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶活性（AST）；血清球蛋白（GLB）含量以总蛋白含量减去白蛋白含量计算；A/G为白蛋白与球蛋白之比。

1.5 数据处理 采用SPSS 21.0软件对测定数据进行处理，以样本数（n）、平均数（x）±标准差（SD）表示，用t检验检测显著性。

2 结果

2.1 慢性氟中毒绵羊血清蛋白质指标的测定结果 由表1 可见，总蛋白在各组间差异不显著（P＞0.05），严重组和轻微组的白蛋白含量、A/G均显著低于健康组（P＜0.05），而球蛋白含量极显著高于健康组（P＜0.01）。

表1 血清蛋白质指标测定结果 g/L

2.2 慢性氟中毒绵羊血清转氨酶活性的测定结果 由表2 可知，健康组和轻微组的血清ALT 活性差异不显著（P＞0.05），但极显著低于严重组（P＜0.01），而AST活性在健康组和严重组间差异不显著，但高于轻微组（P＜0.05）。

表2 血清中肝损伤指标测定结果 U/L

3 讨论

3.1 肝脏是蛋白质代谢的主要器官，白蛋白由肝细胞合成。王昱等［6］认为，血清白蛋白含量降低程度与肝脏合成功能损害程度呈正相关，故血清白蛋白含量的高低可以作为诊断肝硬化及预后的判断指标。在本试验中，慢性氟中毒轻微组和严重组绵羊的白蛋白含量显著低于健康组（P＜0.05），提示患病绵羊肝脏受到损伤，肝细胞合成蛋白质的功能减退，导致白蛋白合成受阻。姬艳平［8］从体液免疫方面探讨了血清球蛋白检测对慢性重型肝炎预后的临床意义，发现血清球蛋白超出正常值范围或是低于正常值范围时，均意味着机体免疫力出现异常。侯红丽等［9］经细胞免疫实验证实，长时间氟暴露将会引起大鼠白细胞数量减少，功能下降，细胞的免疫功能受到抑制。本试验中，慢性氟中毒轻微组和严重组绵羊的球蛋白含量不仅没有降低，反而极显著高于健康组（P＜0.01），这是否与患病绵羊处于免疫应激状态有关还需要进一步探索。

3.2 ALT 和AST 是反映肝功能损伤的最敏感指标，测定血清中的转氨酶活性有助于病情估计、疗效观察和预后判断［8］。由本试验结果可见，慢性氟中毒绵羊轻微组和严重组的血清ALT活性明显高于健康组，意味着患病羊肝细胞被破坏，细胞膜通透性增加，导致肝细胞内ALT释放入血，引起血清ALT升高。AST活性在严重组与健康组绵羊间无差异性（P＞0.05），但均高于轻微组（P＜0.05）。出现此现象的可能原因是发病初期氟抑制了AST活性，随着病程发展，机体产生应答反应，使AST酶活性增强，加快谷氨酸和草酰乙酸之间的转氨作用，以维持肝细胞膜的正常功能。