1例肝内胆管结石手术患者抗-Fya的鉴定和备血策略分析

徐路琼，贺坤华，赵 瑜

云南省曲靖市第一人民医院输血科,云南曲靖 655000

Duffy血型系统是一种重要的血型系统，该血型系统中包括6种抗原，其中Fya和Fyb抗原的免疫原性不强，但其相应抗体可引起速发型或迟发型溶血性输血反应以及新生儿溶血病[1]。在中国人群中，Fy(a-b+)属于稀有血型，因此，抗-Fya并不常见。笔者在上海市血液中心进修期间，在1例肝内胆管结石手术备血的患者血清中检出抗-Fya，现将鉴定过程和备血策略分析如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 蒋某，女，71岁，汉族，江苏南京人，有妊娠史，无输血史，无药物过敏史。血常规结果显示，血红蛋白(Hb)130 g/L，血小板(PLT)计数185×109/L。肝胆结石手术备血时发现不规则抗体，故送至上海市血液中心鉴定抗体，要求备4个单位悬浮红细胞。

1.2试剂与仪器 抗-A、抗-B血型定型试剂(批号：20171227)，抗-D(IgM)血型定型试剂(批号:20171811)，Ac、Bc、Oc试剂(批号:20195312)，抗人球蛋白试剂、抗-IgG、抗-C3d，批号：20185001、20185102、20185201)，筛选细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(批号：20197016)，国产谱细胞1～10(批号：20190530)，聚凝胺试剂(批号：20197502)均由上海血液生物医药有限责任公司提供；Sanquin进口谱细胞1～16、IgG抗-Fya、IgG抗-Fyb(批号：8000256600、8000236190、8000232692)。离心机(KA-2200)为日本久保田公司产品；孵育器、离心机(Incubator 37 SⅠ，centrifuge12 SⅡ)为瑞士达亚美公司产品，电热恒温水浴箱(BHW2)由北京市医疗设备厂提供。

1.3方法 ABO、RhD血型鉴定采用试管法；Duffy血型鉴定采用微柱疑胶法;交叉配血试验采用经典抗人球蛋白试验、盐水法、凝聚胺法。均按文献[2]相关说明进行操作。

2 结 果

2.1血型鉴定 结果显示，患者血型为O型、RhD阳性、Fy(a-b+)。

2.2直接抗人球蛋白试验 结果显示，多抗、单抗-IgG、单抗-C3、ABs对照凝集强度均为阴性。质控试剂为阳性。因此，患者直接抗人球蛋白试验结果为阴性。

2.3抗体筛选试验 采用试管法在室温下用生理盐水直接离心，患者血清与筛选细胞均不凝集；经典抗人球蛋白法和聚凝胺法结果显示，患者血清与筛选细胞均出现凝集，提示患者血清中存在IgG性质的抗体。见表1。

表1 抗体筛选试验

注：+表示阳性，0表示阴性，/表示此项无数据。

2.4国产谱细胞对不规则抗体的鉴定 采用国产谱细胞对患者血清不规则抗体进行鉴定，在国产谱细胞中除6号谱细胞稍弱外，其他谱细胞出现强度一致的凝集，疑似抗-Fya，见表2。

2.5进口谱细胞对不规则抗体的鉴定 采用Sanquin进口谱细胞进一步对不规则抗体进行鉴定，Poly法结果显示，抗-Fya格局明显，可以排除其他的不规则抗体。结合抗原检测，可以确定血清中存在抗-Fya，见表3。

表2 国产谱细胞对不规则抗体的鉴定

注：+表示阳性；0表示阴性。

表3 采用Sanquin进口谱细胞对不规则抗体的鉴定

注：+表示阳性；0表示阴性；/表示此项无数据。

2.6抗体效价测定 结果显示，IgG抗-Fya效价为4。

2.7备血方案制订 由于短时间内无法找到相合血液，血液中心没有给患者备血；患者年龄较大，未采取术前自体备血；联系其他血站，也无Fy(a-b+)的血液库存；患者直系亲属距离较远，不具备在家系中筛查同型血液的条件。因此建议临床医生充分评估后改变手术方式，减少术中出血，避免输注血液。患者为肝内胆管结石(左肝管)，原定手术切肝取石，将手术方式改为胆囊切除、胆总管探查取石，手术顺利没有输血。

3 讨 论

截至2018年2月7日，国际输血协会(ISBT)确认血型系统共36个，血型抗原共332个。Duffy血型系统于1950年被发现，1995年，ISBT将该血型系统编号为008[3]。Duffy血型系统中包含6个抗原，分别为Fya、Fyb、Fy3、Fy4、Fy5、Fy6，Fya和Fyb是最常见的两个抗原，用血清学方法可以将Duffy血型系统分为4种表现型Fy(a+b-)、Fy(a-b+)、Fy(a+b+)和Fy(a-b-)，这4种血型在中国人群中的频率分别为90.8%、0.3%、8.9%、0.0%[4-5]。抗-Fy较为少见，大多是免疫过程产生，多数是妊娠刺激因素产生的抗-Fy，也存在其他原因产生的抗-Fy3[6]。

由于人种、民族、地域的不同，Duffy血型抗原的多态性存在较大差别[7]，因此商品化的抗筛细胞、谱细胞抗原也有差异。本例患者血清与国产谱细胞出现强度一致的全凝集，无法鉴定抗体的特异性，而Sanquin进口谱细胞抗-Fya格局明显，因此，对全凝集反应强度一致、无明确反应格局的抗体或弱抗体的检测，应选择不同的试剂谱细胞鉴定[8]。

绝大多数中国人群血液中存在Fya抗原，缺乏Fya抗原者为稀有血型，这类患者一旦免疫产生抗-Fya则很难找到相配合的血液[9]。目前，稀有血型患者输血途径有自体输血、亲属间的互助献血、求助稀有血型库。本例患者血清中检出IgG性质的抗-Fya，短时间内无法找到相配合的血液，血站没有备血。而患者的临床诊断结果为胆总管结石和肝内胆管结石(左肝管)，主治医师与家属详细沟通后家属考虑切肝出血风险较大，患者家属同意行胆囊切除，胆总管探查取石，手术顺利没有输血。可见对于存在IgG抗-Fya的患者，在无法提供Fy(a-b+)血液的情况下，肝胆结石手术可通过改变手术方式避免输血。

不规则抗体在缺乏相应抗原免疫再刺激时，在体内会逐渐减弱，直至效价为零，无法测得。不同性质的不规则抗体在体内的消减速度存在很大的差异[10]。国外有报道显示，个别病例抗-D在体内持续存在超过50年[11]。本例患者71岁，无输血史，有妊娠史，育有一子，现年46岁，如果该抗体是妊娠产生的，则该抗-Fya在体内持续超过40年。