浅谈核酸提取仪与手动核酸提取法在动物疫病检测中的优劣势

王向辉

长春市动物疫病预防控制中心，吉林长春 130000

近年来，分子生物学检测技术迅猛发展，已经渗透到了医学检验的各个角落[1]，其中荧光定量PCR技术应用较为广阔，动物疫病检测领域也借助其快速、灵敏和特异的优势，大大地提高了动物疫病检测的准确率，为常见动物疫病的诊断提供了强有力的技术支持和保证。核酸提取作为荧光定量PCR检测前期的一项普通操作，起着不可忽视的作用。本文将对比核酸提取仪和手动核酸提取法的优劣势，为动物疫病检测提供借鉴和参考。

1 核酸提取仪

核酸提取仪，是通过预设的电脑程序来自动化完成核酸提取任务的仪器。核酸提取仪分两类：一类是较大型的，自动化程度较高，称为自动液体工作站；另一类是体积较小的自动核酸提取仪，可以配合商品化试剂自动完成核酸提取过程。

大型自动液体工作站设备和耗材价格昂贵，维护成本高，能够一次提取大量检测样品，但是真正应用较少；而小型自动核酸提取仪具有运行成本低、体积小和操作简单等特点，受到很多实验室的欢迎，得到了广泛的应用。无论大型还是小型核酸提取仪，只需前期简单操作并按照预设的电脑程序下达指令，减少了操作者的提取过程，缩小了人工操作引起的误差，具有客观化和标准化特点。但对于检测数量极少的样品，显然成本稍高，并且每个样品的核酸含量不同，电脑程序对所有待检样品的纯化体积均已固定，不能适时机动地调节纯化体积。

2 手动核酸提取法

手动核酸提取法同样借助于商品化的试剂盒，操作者利用实验室常规仪器并参照说明书操作步骤便可进行核酸提取。

如果待检样品数量较少，从提取成本上考虑，手动核酸提取法表现出低成本的优势，并且对于一般的实验室设备要求不高。针对不同含量的样品，可以机动性的调节纯化体积[2]。但是手动核酸提取法操作过程中对于操作者的经验有一定要求，因为每个人的操作习惯与熟练程度不同，不确定性较大，直接决定了提取到的核酸浓度和提取核酸需要的时间，进而可能影响到后续检测样品的准确率与时效，以常见手动核酸提取法为例，操作过程中不可避免需要经历液体的弃去、离心管的反复开盖、移液器的公用等几个循环过程，因此极易产生交叉污染。

3 小结

提取到高质量的核酸是确保准确检测的重要前提，目前大多数动物疫病检测实验室使用的核酸样品是由手动核酸提取法获得的，受成本因素影响，通过核酸提取仪进行核酸提取的实验室占少数，由于核酸提取过程中不同样品核酸含量有差异，导致提取到的核酸浓度也不同，要保证检测结果准确，做到不漏检，提取的样品核酸含量必须达标，所以提取前要对样品的信息进行详细了解，可以针对不同的样品灵活选择不同的提取方式。无论采用核酸提取仪还是手动核酸提取法，操作人员的因素对于检验结果都有一定影响，因此平时对于实验室技术人员要加强理论和实际操作培训，增强实验室核酸污染的认识，严格规范试验操作，逐步提高使用的熟练程度。生产核酸提取仪的厂家都能生产与机器配套使用的试剂盒，不同品牌的试剂盒提取步骤大致相同，提取时间和提取效率相差不大。而市场上生产手动核酸提取试剂盒的厂家众多，手动核酸提取法使用的每一种试剂盒的提取步骤和提取效率也千差万别，所以手动核酸提取法在提取核酸时也尽量选取操作步骤简便、提取效率高的商品化试剂盒。综上，全自动核酸提取仪与手动核酸提取法均有各自的优劣势，没有一种提取方法能够适合任何实验室，实验室更应该本着自己的实际情况进行综合考虑，以最优的核酸提取方式，获得符合检测要求的核酸，更好的适用于动物疫病检测。