核酸检测在延边地区无偿献血者血液筛查中的应用

王蕊

（吉林省延吉市延边中心血站，吉林 延吉 133000）

1 材料与方法

1.1 标本来源于处理 研究过程中使用的样本对象来自于2018年延边无偿献血人员，在确定样本之后，采取ELISA对血液样本进行处理，对于检测过程中发现的不合格血液，进行淘汰处理。检测合格的血液样本则继续进行核算检测。考虑到核酸检测的需求，对于相关样本进行无菌处理，并进行4 h的离心处理，处理后，将标本保存在4oC的环境之中。

1.2 试剂及仪器

1.2.1 检测试剂 在整个检测环节，主要涉及到ELISA检验方法，以及在此方法下所使用的的各类检测试剂；相关抗原，抗-HCV（上海科华有限公司和北京万泰有限公司）和HIV（厦门新创有限公司和北京万泰生物药业公司4代），梅毒螺旋体抗体（上海科华有限公司和厦门新创有限公司），丙氨酸转氨酶ALT（深圳迈瑞有限公司）。核酸检测试剂HBV、HCV、HIV-1型由上海科华公司提供。

1.2.2 检测仪器 在进行相关检验的过程中，根据不同的检测项目，针对性地选择相对应的检测设备，例如对于酶联免疫检测，选择全自动酶联免疫分析设备，并在操作过程中，严格遵循相关要求，确保检测质效。核酸检测：所用仪器上海科华核酸检测系统；Hamilton TAR汇集提取仪ABI 7500实时荧光扩增分析仪；全自动脱盖机。

1.3 方法

1.3.1 标志物的ELISA法 分别使用两个不同厂家的试剂，并由两位不同的人员，根据试剂使用说明，进行两次检测。其中对于酶联免疫4项检测，两种试剂的检测结果均显示为阳性，具体来看，在使用单试剂进行初次筛选的过程中，出现双孔复试反应，反应结果呈现为阳性。双试剂检测过程中，检测结果为阴性。

1.3.2 HBV、HCV、HIV-1型核酸多人份检测（NAT） 对于通过血清检测的血液标本进行核酸检测，在整个检测环节，待检核算样本应当放置于生物安全柜之中，借助于相关设备，对核酸进行提取处理，在完成提取处理的基础上，通过PCR法，对提取到的核算进行扩增处理，对于扩增后的核算，进行HBV、HCV和HIV3等项目的检测。

1.4 统计学处理 为确保研究结果的有效性，在整个研究过程中，使用SPSS 13.2数据处理软件，对整个实验过程中获取的数据信息进行全面梳理以及检验。

2 结果

2017-2018 年无偿献血ELISA法检测阴性NAT检测阳性统计中，HBV检出率较高，目前HCV、HIV检出率低，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 检测结果

3 讨论

为进一步提升临床输血的安全性，需要开展必要的血液筛查工作，通过筛查增强血液制品的安全系数以及临床使用价值。ELISA检测的是抗原抗体，其会造成病毒检测的失效，无法满足实际的输血需求。从临床来看，NAT具有极强的敏感性，通过NAT能够对血液中含有的病毒核酸进行准确的检测评估，缩短病毒检测的周期，从而大大增强了整个检测工作的准确性以及有效性，避免了病毒隐秘的风险，实现了遗漏项的科学高效排除。在这种情况下，不断增强临床输血的安全性以及管理能力，从而有效阻断各类血液性疾病的传播路径，构建成熟高效的血液筛查机制，为各类临床质量工作的开展奠定坚实基础。