血清HE4检测在乳腺浸润性导管癌中的临床应用

熊戌霞，蔡伟鹏，房绮梅，王英

(中山大学孙逸仙纪念医院检验科，广东 广州）

0 引言

乳腺癌是目前威胁全世界女性健康的恶性肿瘤之一，近年来乳腺癌在中国的发病率逐年上升并有年轻化趋势，严重危害女性健康，已成为当今社会重大公共卫生问题[1]。肿瘤标志物也广泛用于评价治疗疗效，早期诊断复发和评价预后中。在乳腺癌中，最常用肿瘤标志物CA153，但它的敏感性和特异性也相对较低，多种肿瘤标志物也被研究，但是没有在临床实践中应用[2,3]。

人附睾上皮分泌蛋白4（HE4）是近年来研究比较热门的一种新型肿瘤标志物，研究发现人附睾蛋白4（HE4）在乳腺癌组织中也表达[4]，但其在血清中的表达水平，以及其在乳腺浸润性导管癌中的临床应用价值研究甚少，本研究扩大了血清样本量，进一步探讨HE4在乳腺浸润性导管癌中的表达，并分析其临床应用价值。

1 材料和方法

1.1 一般资料

收集2016年12月至2017年8月在中山大学孙逸仙纪念医院初次诊断为乳腺肿物的住院女性患者的血清，所有患者全部经空心针穿刺或组织病理确诊，其中乳腺良性疾病患者77例（包括乳腺囊性增生症、乳腺纤维腺瘤、导管瘤、乳腺炎性病变等），平均（39.6±11.6）岁；乳腺浸润性导管癌患者200例，平均（50.2±10.9）岁，肿瘤分期均按NCCN2007年修订的标准进行TNM分期；另选取91例健康女性为健康对照组，平均（41.3±11.8）岁，均为随机选取健康女性。

通过病例系统以及病理系统查询诊断为乳腺浸润性导管癌患者的临床病理资料，包括患者年龄、绝经状态、肿瘤大小、TNM分期以及ER、PR、HER2状态。剔除标准：手术前进行过化疗放疗患者，合并其他癌症的患者以及资料不全者。

1.2 方法

所有研究对象均抽取清晨空腹静脉血3mL，待血凝固后分离血清（-20℃保存），采用电化学发光免疫检测法检测血清HE4水平。使用仪器为Cobas e602型全自动电化学发光免疫分析系统。以上所有操作步骤严格按照说明书进行。

1.3 统计学处理

采用SPSS 22.0统计学软件分析，呈偏态分布数据用中位数表示，3组数据间比较用非参数Kruskal-Wallis（H检验），两两之间的比较用Mann-Whitney （U检验），采用受试者工作特征（ROC）曲线确定临界值。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 乳腺浸润性导管癌组与乳腺良性疾病组及正常对照组血清HE4水平

乳腺浸润性导管癌组、乳腺良性疾病组和正常对照组间HE4水平（见表1），三组间HE4水平差异有统计学意义（H=39.213，P＜0.01），乳腺浸润性导管癌组HE4中位数明显高于正常对照组和乳腺良性疾病组，差异有统计学意义（P＜0.05）。经过两两比较，正常对照组与乳腺良性疾病组之间HE4水平，差异无统计学意义（P＞0.05）；正常对照组与乳腺浸润性导管癌之间HE4水平差异有统计学意义，乳腺浸润性导管癌组HE4含量明显高于正常对照组（P＜0.05）；乳腺良性疾病组与乳腺浸润性导管癌组之间HE4水平差异有统计学意义，乳腺浸润性导管癌组HE4含量明显高于乳腺良性疾病组（P＜0.05）。

表1 3组间HE4水平[中位数(四分位数)]

2.2 血清HE4水平与乳腺浸润性导管癌临床病理特征之间的关系

HE4的水平与患者年龄、月经状态、肿瘤大小、淋巴结状态、临床分期以及ER和PR状态有明显相关（P＜0.05）。HE4水平与HER2状态无关（P＞0.05）。

表2 乳腺浸润性导管癌临床病理特征与患者血清HE4水平的关系

2.3 确定Cut-off(临界值)

根据200例乳腺浸润性导管癌患者和168例非乳腺浸润性导管癌对照者血清HE4的检测结果，用ROC曲线计算约登指数最大时对应的值，即为Cut-off值。测得HE4的ROC曲线下方的区域为 0.672，临界值为 55.15pmol/L（P＜0.05），见图 1。

图1 乳腺浸润性导管癌癌患者HE4的ROC曲线

3 讨论

血清肿瘤标志物在恶性肿瘤的应用，除了可以协助诊断之外，对于恶性疾病的早期筛选，疗效评价，复发转移监测及预后评估等方面发挥着重要作用，对提高患者的生存率和生存质量上有极为重要的意义[5]。乳腺浸润性导管癌在乳腺癌发病中所占比例最高，它的复发和预后主要受临床病理分期和临床病理特征所影响，本文主要通过研究血清HE4水平在乳腺浸润性导管癌临床病理中表达，并探讨其在临床应用。

人附睾分泌蛋白4（HE4）属于乳清酸性4-二硫化中心（WFDC）蛋白家族，是新近提出的肿瘤标志物，首先由Kirchhoff等[6,7]学者在附睾组织中发现，是具有免疫保护作用的蛋白酶抑制剂家族，正常人中仅在附睾、呼吸道上皮细胞、唾液腺及生殖道表达。HE4也在众多肿瘤中高表达，对卵巢浆液性癌、子宫内膜癌、肺癌和乳腺癌等疾病早期诊断和检测复发具有重要作用[8,9]，多项研究表明[10,11]HE4是乳腺癌新的肿瘤标志物及预后监测指标。HE4的表达与乳腺癌淋巴结浸润有关，并且可能是乳腺癌复发的一个预测因素[12]。本研究发现乳腺浸润性导管癌患者HE4水平与患者年龄、月经状态相关（P＜0.05）且HE4高表达时，预示着乳腺浸润性导管癌患者肿瘤较大、淋巴结转移可能性高，临床分期较高（P＜0.05）,对患者进行HE4的监测，利于术后早期复发的检测，提高患者生存质量。

乳腺是ER、PR的靶器官，ER、PR是调节性器官细胞生长发育的雌激素和孕激素受体，在正常乳腺上皮细胞及乳腺癌细胞内均含有雌二醇受体和孕激素受体。ER、PR是乳腺癌重要预测激素。乳腺癌ER、PR阳性表达说明其分化程度高，恶性度低，淋巴结转移慢，预后好，对各种治疗尤其是内分泌治疗敏感性高[13]。本研究发现乳腺浸润性导管癌ER、PR阳性状态时HE4表达水平更低（P＜0.05），有利于乳腺癌的疗效及预后判断。

本研究用ROC曲线，以良性组及正常组为参照，发现HE4在55.15pmol/L时诊断指数最大，灵敏度和特异性分别为53.5%和74.4%，AUCROC为0.672。本研究结果与蔡徐山等[14,15]研究结果（以62.5pmol/L为界限值）相似，差异可能与研究对象和样本量有关。

综上所述，血清HE4检测在乳腺浸润性导管癌治疗及预后判断，术后早期复发以及高危人群随访等有重要的临床意义。