申修贤 黄纯杨 于晓飞 商胜华 王秀琴 王小彦 刘明宏 杨茂发
摘 要:為筛选出对食蚜瘿蚊安全的生物农药,选用5种常用的生物农药对烟蚜及食蚜瘿蚊幼虫(喷雾法)和食蚜瘿蚊成虫(药膜法)进行了毒力测定和安全性评估。结果表明,无论处理24 h还是48 h,对烟蚜毒力较高的是甲维盐和苦参碱,LC50分别为2.166和3.695 mg/L(24 h),1.567和2.874 mg/L(48 h);对食蚜瘿蚊幼虫的毒力较高的是鱼藤酮,LC50为18.137 mg/L(24 h)、13.771 mg/L(48 h),对成虫的毒力较高的是多杀菌素,LC50为7.249 mg/L(24 h)、4.125 mg/L(48 h)。因此5种生物农药中苦参碱、甲维盐、苏云金杆菌对烟蚜和食蚜瘿蚊的选择性较高,适宜在田间与食蚜瘿蚊联合应用防控烟蚜。
关键词:烟蚜;食蚜瘿蚊;生物农药;毒力测定;安全性评价
Safety Evaluation and Toxicity Determination of 5 Biopesticides toMyzus persicae(Sulzer) andAphidoletes aphidimyza (Rondani)
SHEN Xiuxian1, HUANG Chunyang2, YU Xiaofei3, SHANG Shenghua4,
WANG Xiuqin1, WANG Xiaoyan2, LIU Minghong2*, YANG Maofa1,3*
(1. Institute of Entomology of Guizhou University, Provincial Key Laboratory for Agricultural Pest Management of the Mountainous Regions, Guiyang 550025, China; 2. Guizhou Tobacco Company, Zunyi Branch Company, Zunyi, Guizhou 563000, China; 3. College of Tobacco Science of Guizhou University, Guiyang 550025, China; 4. Guizhou Academy of Tobacco Sciences, Guiyang 550081, China)
Abstract: To screen for biopesticides safe toAphidoletes aphidimyza(Rondani) in tobacco fields, the toxicities of five kinds of biopesticides againstMyzus persicae, as well as three instars larvae (spray method) and adults ofA. aphidimyza were evaluated. The results showed that the highest toxicity onM. persicaewas from emamectin benzoate and matrine both at 24 h and 48 h after treatment, with LC502.166 and 3.695 mg/L (24 h), 1.567 and 2.874 mg/L (48 h), respectively. The highest toxicity on larva ofA. aphidimyzawas from rotenone, with LC5018.137 mg/L (24 h) and 13.771 mg/L (48 h). The highest toxicity on adults ofA. aphidimyzawas from spinosad, with LC507.249 mg/L (24 h) and 4.125 mg/L (48 h). Therefore, matrine, emamectin benzoate andBacillus thuringgiensisin the five biological pesticides have higher selectivity toM. persicaeandA. aphidimyza, so they are suitable for the combined application of biopesticides andA. aphidimyza in the field to controlM. persicae.
Keywords:Myzus persicae(Sulzer);Aphidoletes aphidimyza(Rondani); biopesticides; toxicity; safety evaluation
烟蚜Myzus persicae(Sulzer),属半翅目,蚜科,又名桃蚜、桃赤蚜,是一种重要的刺吸类害虫,其寄主范围广,可以危害茄科、十字花科、豆科等50多科400多种植物[1],烟蚜以群集方式刺吸植物汁液,不但造成植物的营养缺乏与组织破坏,严重时可使植物死亡[2],而且烟蚜及其分泌物还会导致多种植物病毒,严重为害农作物[3-4],每年桃蚜为害带来的经济损失为10%~15%,严重时达50%~80%[5]。
生物农药和天敌昆虫是防控烟蚜的重要措施。
利用白僵菌、青霉菌、苏云金杆菌、阿维菌素等微生物源生物农药对烟蚜有很好防治效果[6-10],利用苦参碱、鱼藤酮、印楝素、百部-川楝-苦参碱等植物源生物农药对烟蚜也有很好的控制作用[11-18]。利用天敌昆虫防治烟蚜同样具有很好的控制效果[19-22],其中食蚜瘿蚊Aphidoletes aphidimyza(Rondani)作为蚜虫的捕食性天敌,其幼虫能取食80多种蚜虫[23-25],尤其对烟蚜有很好的控制作用,1头幼虫一生可捕食28头小桃蚜[26],1头3龄幼虫对烟蚜最大日捕食量为10头[27]。在蔬菜温室、拱棚、大棚内以1∶20的益害比释放食蚜瘿蚊成虫,10 d后单株烟蚜量减退80%以上[25]。在烟田以1:15的益害比释放2次食蚜瘿蚊蛹,可以达到64%的防治效果[28]。与其他天敌相比,食蚜瘿蚊具有独特优点:繁殖、搜索和分散能力强;对蚜虫不但有取食作用,而且还有杀伤作用;适宜大批量繁殖,易于贮存和运输,便于生产应用等[29-30]。
由于任何防控措施均有各自的优点和不足,联合防控在害虫的防治实践中就越来越受到重视,特别是生物农药与天敌昆虫的联合防控。但若长期不正当使用生物农药会降低天敌昆虫的防治效果[14-16]。因此本文选用常用的5种生物农药,测定其对烟蚜以及烟蚜的捕食性天敌食蚜瘿蚊的毒力,评价其对食蚜瘿蚊的安全性,以期为烟田利用食蚜瘿蚊和生物农药联合防控烟蚜的提供技术指导。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试昆虫 在遵义市凤冈县烟草天敌昆虫繁育中心,于人工气候室中,饲养食蚜瘿蚊、烟蚜3代以上,备用。
1.1.2 人工气候室 温度(24±0.5) ℃、光周期L∶D=16 h∶8 h、相对湿度65%±5%。
1.1.3 供试药剂 70%甲维盐、98%鱼藤、50000 Iu/mg苏云金杆菌(中山凯中有限公司),98%苦参碱、99%多杀菌素(江苏长青农化股份有限公司),丙酮(分析纯,汕头市西陇化工有限公司)。
用适量的丙酮(1 g/L)将各生物农药原药配成以下相应的5个浓度梯度(表1),按照该生物农药对烟草害虫的田间推荐使用量计算而得。
1.2 试验方法
1.2.1 生物农药对烟蚜的毒力测定 采用喷雾法
进行测定。挑选体型一致的3~4龄无翅烟蚜,分别将不同浓度梯度的药剂喷洒于带蚜烟叶的正反两面,静置1 min;接入事先放入新鲜烟草叶片(60 mm×60 mm)的布丁盒中,烟叶下方放置湿润的吸水纸用于保湿。每盒烟蚜虫数为25头,4次重复。以清水喷雾的烟蚜处理为对照,盖上带孔的盖子(用昆虫1号针均匀扎9个孔)。置于人工气候室,分别于24 h和48 h后统计烟蚜的死亡数,在视频显微镜下观察,以小毛笔轻触无任何部位活动作为死亡标准。
1.2.2 生物农药对食蚜瘿蚊3龄幼虫的毒力测定 采用喷雾法进行测定。对带有食蚜瘿蚊幼虫的烟苗分别喷施不同浓度药液,然后挑选体型一致的浸药食蚜瘿蚊3龄幼虫,按照每盒25头的标准,分别放入布丁盒内,盖上带孔的盖子(用昆虫1号针均匀扎9个孔)。以喷施清水的相同数量食蚜瘿蚊幼虫为对照。每处理4次重复。置于人工气候室,分别于24 h和48 h后统计食蚜瘿蚊幼虫的死亡数,在视频显微镜下观察,以小毛笔轻触无任何部位活动作为死亡标准。
1.2.3 生物农药对食蚜瘿蚊成虫的毒力测定 采用药膜法进行测定。用小型滴管吸取足量的药剂注入玻璃试管中,摇匀后倒出多余的药剂,待药剂充分形成药膜后,挑选同一天羽化的體型一致的食蚜瘿蚊成虫10头放入其中,每处理重复5次;空白对照为清水。并用少量10%蜂蜜水湿润脱脂棉团封好管口,然后置于人工气候室。分别于24 h和48 h后统计食蚜瘿蚊成虫的死亡数,日光照射下轻敲试管不动即判定食蚜瘿蚊死亡。
1.3 数据分析
1.3.1 毒力回归方程 试验数据采用Microsoft Excel 2010统计,使用SPSS 24.0软件拟合毒力回归方程,计算5种生物农药对烟蚜及食蚜瘿蚊的LC50值。烟叶生产中常用苦参碱来防治烟蚜,故以苦参碱对食蚜瘿蚊的LC50值为参考标准,相对毒力指数为1。
相对毒力指数=测试药剂LC50/苦参碱LC50值。
1.3.2 安全性评价 以各种生物农药的田间推荐使用有效浓度与食蚜瘿蚊致死中浓度LC50相比,求得安全系数[31],安全系数(t)=天敌的LC50/田间推荐使用有效浓度。t≤0.05为极高风险性生物农药;0.05<t≤0.5为高风险性生物农药;0.5<t≤5为中等风险性生物农药;t>5为低风险性生物农药。
以毒性选择指数评价各生物农药对食蚜瘿蚊的安全性[32]。毒性选择指数(STR)为生物农药对天敌的致死中浓度(LC50)与对害虫的致死中浓度(LC50)的比值,即:毒性选择指数(STR)=天敌的LC50/害虫的LC50。毒性选择指数的值STR≤1时,则表明该生物农药对食蚜瘿蚊的毒性比烟蚜更高,属于非选择性农药;毒性选择指数的值STR>1时,则表明该生物农药对食蚜瘿蚊的毒性比烟蚜更低,属于选择性农药。
2 结 果
2.1 5种生物农药对烟蚜的毒力
5种生物农药对烟蚜的毒力测定结果如表2所示。当浸药24 h时,对烟蚜毒力大小次序为:甲维盐>苦参碱>苏云金杆菌>多杀菌素>鱼藤酮,其中甲维盐对烟蚜的毒力最高,LC50为2.166 mg/L,鱼藤酮对烟蚜的毒力最低,LC50为21.541 mg/L,其相对毒力指数是甲维盐的9.947倍。48 h时,对烟蚜毒力大小次序与24 h相同,其中甲维盐对烟蚜的毒力最高,LC50为1.567 mg/L,鱼藤酮对烟蚜的毒力最低,LC50为15.131 mg/L。较24 h相比,甲维盐毒力上升了27.65%,鱼藤酮毒力上升了29.76%。5种生物农药随着时间的延长对烟蚜的毒力都有一定程度的增强。
2.2 5种生物农药对食蚜瘿蚊幼虫的毒力
结果如表3所示。当浸药24 h时,所选药剂对食蚜瘿蚊幼虫的毒力大小次序为:鱼藤酮>多杀菌素>苦参碱>苏云金杆菌>甲维盐,敏感性水平依次减弱。其中鱼藤酮对食蚜瘿蚊幼虫的毒力最高,LC50为18.137 mg/L,相对毒力指数最小为0.900;甲维盐对食蚜瘿蚊幼虫的相对毒力指数最大为1.093,对应的LC50为22.014 mg/L。48 h时,对食蚜瘿蚊幼虫毒力大小次序:多杀菌素>鱼藤酮>苦参碱>苏云金杆菌>甲维盐。其中多杀菌素对食蚜瘿蚊幼虫的毒力超过了鱼藤酮,即多杀菌素对食蚜瘿蚊幼虫的毒力最高,LC50为13.606 mg/L,甲维盐对食蚜瘿蚊幼虫的毒力最低,LC50为15.975 mg/L。随着时间的增加,食蚜瘿蚊幼虫对5种生物农药的敏感性均增加。
2.3 5种生物农药对食蚜瘿蚊成虫的毒力测定
如表4所示。处理时间不同,食蚜瘿蚊成虫对生物农药的敏感性不相同。处理24 h时,食蚜瘿蚊成虫对5种生物农药的敏感性依次为:多杀菌素>鱼藤酮>甲维盐>苏云金杆菌>苦参碱。毒性最大的为多杀菌素,其LC50为7.249 mg/L。最低的是苦参碱,LC50为14.408 mg/L。处理 48 h 时,甲维盐对食蚜瘿蚊成虫的毒力超过了鱼藤酮,较24 h相比,甲维盐毒力上升了49.32%。随着时间的增加,5种生物农药对食蚜瘿蚊成虫的毒性均有增加。
2.4 5种生物农药对食蚜瘿蚊幼虫和成虫的安全性评价
从5种生物农药有效田间浓度对食蚜瘿蚊的安全系数来看(表5、6),苏云金杆菌和甲维盐对食蚜瘿蚊幼虫安全性最高,安全系数分别为2.766~4.149和7.862~10.483(24 h)、2.215~3.190和5.705~7.607(48 h);对瘿蚊成虫安全性较高的是甲维盐、苦参碱,分别为1.470~2.450和4.099~5.466(24 h)、1.118~1.864和2.078~2.270(48 h)。从5种生物农药有效田间浓度对食蚜瘿蚊的毒性选择指数来看(表5、6),苦参碱、甲维盐对食蚜瘿蚊幼虫选择性毒力指数较高,分别为5.452、10.163(24 h)和5.412、10.195(48 h);24 h时,苦参碱、甲维盐对食蚜瘿蚊成虫的选择性毒力指数较高,分别为3.889、5.299(24 h);48 h时,对食蚜瘿蚊成虫的选择性毒力指数较高的是苦参碱、苏云金杆菌,分别为3.814、2.272(48 h)。
结合安全系数和毒性选择指数的结果表明,甲维盐、苦参碱、苏云金杆菌对食蚜瘿蚊安全。
3 讨 论
苦参碱和鱼藤酮属于植物源生物农药,主要用于防治蚜虫和鳞翅目害虫[33-34]。多杀菌素、甲维盐和苏云金杆菌属于农用抗生素类生物农药,主要用于防治鳞翅目害虫[35]。烟田主要以烟蚜、小地老虎、烟青虫和斜纹夜蛾等为主要害虫[36],当喷施低毒、高效的生物農药防治烟田主要害虫时,是否会对烟蚜的天敌食蚜瘿蚊造成影响,目前少有报道。本试验结果表明,苦参碱、鱼藤酮、多杀菌素、甲维盐、苏云金杆菌5种生物农药对食蚜瘿蚊的幼虫和成虫LC50差异明显,24 h时,鱼藤酮对食蚜瘿蚊幼虫的杀伤力最大,相对毒力指数为0.900,这与尹园园等[37]研究结果一致;多杀菌素对成虫的毒性最大。有研究报道多杀菌素对小菜蛾的天敌菜蛾绒茧蜂有很强的毒性[38]。苏云金杆菌对烟蚜的防治效果不好,而报道苏云金杆菌对小菜蛾有很好的防治[39],这可能是不同类型的动物解毒机制不同,从而导致结果不同。但是无论是防治烟蚜还是防治小菜蛾,苏云金杆菌对天敌昆虫都是相对安全的,本研究结果也是。
由安全性系数可知,苦参碱、苏云金杆菌安全系数为5>t>0.5是中等风险,甲维盐的安全系数>5是低等风险,对食蚜瘿蚊影响较小。有研究报道苦参碱对蚜虫有很好的防治效果,对天敌昆虫也很安全[20-21,37]。也有研究报道甲维盐对花椒棉蚜有很好的防治效果[40],对异色瓢虫的幼虫、巴氏新小绥螨相对安全[41]。伍绍龙等[42]研究发现,甲维盐对烟青虫和斜纹夜蛾有很好的防治效果,但是对天敌蜘蛛、草蛉、隐翅虫有抑制作用。与本研究结果不同,这可能是不同天敌对药剂的敏感性不同。
本研究表明,5种生物农药对烟蚜毒力差异不同,无论24 h还是48 h,甲维盐和苦参碱对烟蚜的毒力相对较高,食蚜瘿蚊成虫对多杀菌素最敏感,幼虫对鱼藤酮最敏感。本试验只考虑了食蚜瘿蚊成虫或高龄幼虫,生物农药对其卵、蛹、低龄幼虫的毒性大小以及后代种群的影响还需进一步研究。
4 结 论
通过测定5种生物农药对烟蚜和食蚜瘿蚊的毒力,评价了它们对食蚜瘿蚊的安全性。结果表明,苦参碱、甲维盐和苏云金杆菌对食蚜瘿蚊幼虫和成虫安全系数较高,属于中等至低风险,且对烟蚜和食蚜瘿蚊的选择性较高,在田间可与食蚜瘿蚊联合应用防控烟蚜。
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