沉降式宫颈液基细胞学制片技术常见问题研究

高亚娟 白洁 李佳 王建

【摘要】本文通過对临床中液基细胞学制片方法的总结汇总，分析常见制片过程中出现的问题，以及有可能造成该问题的原因及解决方法。以此希望能够更好的服务于临床患者。

【关键词】液基细胞学技术;宫颈筛查;沉降式

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌，居女性恶性肿瘤的第二位【1】。近年来随着社会的发展，宫颈癌的发生率呈显著上升和年轻化趋势，因此癌前筛查显得尤为重要。宫颈液基细胞学是基于对正常脱落的宫颈细胞进行分析诊断的一种诊断方法，其能够利用相关试剂有效去除标本中的非诊断所需成分，进而做出准确的判断。宫颈液基细胞学在提高宫颈病变诊断率方面发挥了重要作用。本文根据临床观察总结，现对沉降式宫颈液基细胞学制片技术过程中经常出现的问题进行总结分析。

1.材料与方法

1.1材料  

使用北京世纪众诺医疗器材有限公司提供的样本保存液、缓冲液、巴氏染液等试剂耗材。

1.2方法

在离心管里加入4ml密度分离液→将核对好的标本分别转移至对应的离心管→离心（200转离心2分钟15秒）→打开真空泵，压力调节至8±1in/Hg吸取上层废液→离心（800转离心10分钟）→迅速将管架倒置180度倾出上清液，震荡20秒左右→上全自动制片机→巴氏染色→环保透明剂（5min左右）→封片

2.结果

制片质量较好，染色鲜艳，不同层次细胞显色分明，细胞分布均匀，核质对比清晰，细胞核结构清晰，能够有效的提供诊断信息。

3.讨论

3.1细胞数量过少的问题：

3.1.1由于病人出血或者炎症等原因造成血性样本或黏液等杂质过多，无法获取足够的细胞数，处理时可将离心管内的细胞全部倒入制片舱制片，必要时应重新取材。

3.1.2细胞沉降时间不够，细胞不能充分沉降粘附在玻片上，适当增加沉降时间。

3.1.3玻片对于细胞的吸附性降低，更换玻片。同时控制玻片所处环境的湿度，使湿度不得大于70%。

3.2血液、黏液过多的标本制片效果不佳：

3.2.1将标本小瓶充分混匀后，吸出5ml液体，置于另一洁净容器内，向容器内加入5ml细胞保存液，充分混匀后，按照正常程序制片染色。

3.2.2向标本小瓶内加入1-2%冰乙酸溶液数滴，震荡混匀5分钟后，按正常程序制片染色。

3.2.3使用生理盐水将标本进行倍比稀释后，按照正常转移流程制片染色。

3.3染色异常：

3.3.1缓冲液的酸碱度不正确，应调至PH7.5-8.5之间左右。缓冲液主要用于调节玻片染色环境的pH值。染色环境PH值过低，即环境过酸，细胞质着色能力增强，会造成胞质深染。染色环境PH值过高即环境过碱，则会胞核深染的现象【2】。

3.3.2检查无水乙醇/异丙醇液使用时效，定期更换。

3.3.3染色过深或过浅：根据玻片显示的胞质和胞核的染色效果，适当调整苏木素或者EA/OG的染色时间。

3.3.4温度会对染色造成影响。低于15摄氏度影响苏木素染色，高于30摄氏度影响EA染色效果。

3.4细胞集散与边缘：

3.4.1样本细胞量过少，处理方式同3.1所列

3.4.2制片舱没有扣上，在扣制片舱的时候尽量扣紧。

3.5镜下细胞呈团问题：

3.5.1取材时力度过大。该原因引起的成团细胞一般排列整齐、层次分明，细胞团有极性。实验过程中可增加振荡时间，并与临床医生就取材问题进行沟通。

3.5.2转移量过多。该原因引起的成团细胞，一般杂乱无章，无排列规则。实验过程中增加振荡时间、调节转移量。

随着液基细胞学的发展，该技术的应用在临床中的重要性日益凸显，尤其在女性宫颈癌筛查方面。良好的制片质量是正确诊断的基础之一，希望通过此篇文章能够更好的服务于病理医生、更好的服务于患者。

【参考文献】

[1]  Bai H，Sung C J，Steinhoff M M. ThinPrep Pap Test pro-motes detection of glandular lesions of the endocervix[J]. Di-agn Cytopathol，2000，23（1）：19-22

[2]  梁英杰，凌启波，张威.临床病理学技术[M]. 北京：人民卫生出版社，2011：334-4