系统性红斑狼疮患者抗核抗体与抗可溶性抗原抗体谱检测结果分析

李 彦，贾燕午

（河南省三门峡市中心医院 检验科，河南 三门峡 472000）

系统性红斑狼疮是临床上常见的一种自身免疫性疾病，由于机体免疫功能失常，不能正确识别自身组织，产生大量抗体及免疫复合物而造成机体损伤，主要累及皮肤、关节、神经、血液及身体重要脏器［1-2］。患者早期常表现为发热、全身乏力及其他非特异性症状，在遭受感染、精神应激等情况可加重病情，青年女性为多发人群［3-4］。系统性红斑狼疮发病与遗传、感染、环境等因素均有相关性，但其发病原因仍未阐明，因此该病在临床上尚无治愈方法，只能通过早期诊断和治疗将伤害降至最低［5-6］。本研究分析系统性红斑狼疮患者抗核抗体（antinuclear antibodies,ANA）与抗可溶性抗原（extractable nuclear antigen,ENA）抗体谱检测结果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院2016年12月至2018年12月诊治的100例系统性红斑狼疮患者为A组，同期收集92例其他类型的自身免疫病患者为B组，86例体检正常健康者为C组。本研究开展前获得医院伦理委员会批准，且征得检测人员同意。A组纳入标准：①确诊为系统性红斑狼疮患者；②近3周内无阿片类药物使用史；③临床资料完整，对本研究配合者。A组排除标准：①合并心血管、糖尿病等慢性病患者；②患有肿瘤者；③合并全身性严重感染者。B组中干燥综合征17例，结缔组织疾病36例，硬皮病7例，类风湿性关节炎32例。三组年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 三组一般资料比较

1.2 标本采集与贮存

所有研究对象（A组、B组、C组）均在采血前一天晚23∶00以后禁食禁水，于检测当日8∶00～9∶00采取静脉血，静置15～20 min后分离血清。具体参数为：转速4 000 r/min，离心时间10 min。若当日未能检测完所有血清，须将未检测血清放置于-20℃环境保存，并于3 d内检测完毕。

1.3 抗体检测

1.3.1 ANA检测 将稀释后的血清（1/100、1/320、1/1 000）置入反应区，反应30 min，使用磷酸盐缓冲溶液进行冲洗并浸泡5 min，加入具有荧光标记的抗人免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）G抗体，反应30 min，再次使用磷酸盐缓冲溶液进行冲洗并浸泡5 min，取出使用甘油进行封片处理，在490 nm波长下观察ANA荧光及荧光核型，抗体滴度＞1/100即为阳性。

1.3.2 抗ENA抗体检测 检测三组血清内15中特异性抗体，使用EUROScan软件自动判别，灰度值＞10即为阳性。联合检测中只要有一种抗体阳性即判定为抗ENA抗体阳性。

1.4 统计学方法

本次研究应用SPSS 20.0统计学软件对相关数据进行统计学处理。计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用方差分析和t检验；计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组ANA与抗ENA抗体谱阳性率比较

A组和B组ANA与抗ENA抗体谱联合检测阳性率均高于C组（P＜0.05），且抗ENA抗体谱中dsDNA、His、Sm、nRNP/Sm、Rib和Nuc在A组的阳性率高于B组（P＜0.05），见表2。

2.2 三组ANA滴度检测结果比较

在ANA滴度为1/1 000、1/320、1/100时，A组和B组的阳性检出率均高于C组（P＜0.05），见表3。

2.3 各指标检测灵敏度、特异度比较

联合检测灵敏度为92.00%，特异度为89.74%，见表4。

表2 三组ANA与抗ENA抗体谱阳性率比较 例（%）

表3 三组ANA滴度检测结果比较 例（%）

表4 各指标检测灵敏度和特异度比较 %

3 讨论

ANA是抗核酸抗原抗体的简称，又被称为抗核抗体，属于体内一种自身抗体。ANA主要见于体内免疫球蛋白（IgM、IgMG、IgMD等）中，它能够识别组织中细胞核成分，常见于自身免疫性疾病患者血清中［7］。有研究指出，ANA可作为风湿性疾病病情进展和预后的观察指标，可根据其滴度水平对自身免疫性疾病做初步筛选［8］。抗ENA抗体是抗浆核糖核蛋白和核糖核蛋白的自身抗体，是由抗U1-RNP抗体、抗Sm抗体、抗r-RNP抗体及其他抗体组成的抗体谱，其与病情进展和活动性无明显关系，但对诊断结缔组织性疾病具有较大意义［9］。

本研究发现，A组和B组的ANA与抗ENA抗体检测阳性率均高于C组，提示患有自身免疫性疾病患者体内ANA与抗ENA抗体异常率较健康人群高，ANA与抗ENA抗体能有效分辨自身免疫性疾病和健康人群，具有较高的敏感度［10］。本次研究还发现，ANA滴度为1/320时，A组和B组检测阳性率均较高，提示ANA滴度为1/320时指标检测最为敏感，相较于其他滴度具有更高的检出率。本研究结果显示，在ENA抗体谱中，dsDNA、His、Sm、nRNP/Sm、Rib和Nuc在A组和B组间差异有统计学意义，提示ENA抗体谱能特异性分辨系统性红斑狼疮性自身免疫病和其他类型的自身免疫性疾病，具有较高的特异度。综合比较3组ANA与抗ENA抗体的灵敏度和特异度，可以发现ANA抗体特异度较低，仅可作为系统性红斑狼疮的初筛指标，抗ENA抗体特异度较高，可在系统性红斑狼疮患者初筛完成后作为确诊参考指标［11］。A组中也存在抗ENA抗体阴性情况，提示抗ENA抗体阴性不能确诊为健康人群，原因可能与血液中存在一定的DNA抗原有关，也可能与早期患者或病情程度较轻患者具有将抗体降至正常水平的能力有关［12］。

综上所述，自身抗体联合检测能提高系统性红斑狼疮的确诊率，有助于系统性红斑狼疮患者的早期诊断和病情监测。