姚兴伟,林 英,杨 琦,马婧涵,张夺标,张 蕊,杨曦明
(北京中医药大学东直门医院,北京100700)
肠杆菌科细菌是临床上引起感染的最常见的革兰阴性杆菌之一,主要引起呼吸系统、泌尿系统、血流感染及医院内感染等。碳青霉烯类抗菌药物的抗菌谱广、抗菌活性强,对需氧、厌氧菌均具有抗菌作用,特别是对多重耐药革兰阴性杆菌,如产超广谱β—内酰胺酶(ESBL)肠杆菌科细菌具很强抗菌活性。随着碳青霉烯类抗生素的广泛应用,逐渐筛选出了对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌。这给临床治疗此类细菌引起的感染带来了极大的困难。本文收集了北京中医药大学东直门医院2016年1月-2018年12月间从临床标本中分离的CRE,并对其分布特征和标本来源进行了分析,为临床医院感染的预防和控制提供了参考依据。
1.1 菌株来源收集北京中医药大学东直门医院从临床标本中分离的CRE 248株,采用美国BD公司的PHOENIX-100全自动微生物鉴定药敏系统进行鉴定及药物敏感性试验。
1.2 方法采用改良Hodge试验对碳青霉烯酶产酶情况进行检测,使用无菌生理盐水将大肠埃希菌ATCC25922菌悬液调至0.5麦氏浊度,并用生理盐水进行1∶10稀释。用棉签将稀释后菌液均匀涂布于MH琼脂平板上,干燥10 min。将美罗培南纸片置于MH琼脂平板上。使用1 μl接种环挑取3-5个过夜生长待测菌落垂直于药敏纸片从纸片边缘开始划线,长度为20-25 mm。35±2℃培养16-20 h。如果在被测菌株与大肠埃希菌ATCC25922抑菌圈交汇处大肠埃希菌生长增强,即产碳青霉烯酶。阳性质控菌为肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705,阴性质控菌为肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1706。
1.3 统计学分析采用whonet5.6软件进行统计学分析,药敏结果参考CLSI2016年标准。
2.1 CRE的菌株分布2016年1月-2018年12月间从本院分离出的CRE菌株共248株,主要为肺炎克雷伯菌(180株)、大肠埃希菌(20株)和阴沟肠杆菌(10株),见表1。
表1 CRE菌株分布及构成比
2.2 CRE 标本来源分布2016年1月-2018年12月间从本院分离出的CRE菌株主要来自于痰液标本(105株),其次为尿液标本(63株)和脓液及分泌物标本(43株),见表2。
表2 CRE标本来源分布及构成比
2.3 CRE菌株的科室分布情况2016年1月-2018年12月间从本院分离出的CRE菌株主要来自于重症监护病房(117株),其次为脑病科(65株)和呼吸科(22株),见表3。
表3 CRE 科室分布及构成比
2.4 CRE 的耐药性分析本研究分离出的248株CRE对临床常用的18种抗生素的耐药率普遍较高,除阿米卡星的耐药率为41.9%外,其他抗生素的耐药率都在70%以上,β-内酰胺类抗生素的耐药率>85%,见表4。
表4 CRE耐药性情况
目前,肠杆菌科细菌仍然是引起感染性疾病的主要病原体,主要引起呼吸系统、泌尿系统、血流感染及医院内感染等。在过去的10年中,碳青霉烯类药物被认为是治疗耐药革兰阴性菌感染的最后一道防线。随着碳青霉烯类耐药菌株尤其是肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌检出率的快速上升,已成为当前临床抗感染治疗的难题[1]。
本研究中分离的CRE菌株主要为肺炎克雷伯菌肺炎亚种(180株,占72.58%)和大肠埃希菌(20株,占8.06%),这可能是由于检出CRE的主要标本来源为痰液标本(105株,占42.34%)和尿液标本(63株,占25.40%),而痰液和尿液中的主要病原菌为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌,这与国内的报道一致[2,3]。
本研究中分离的CRE主要来自于重症监护病房(ICU),共分离出117株,占比为47.18%。这与国内的诸多相关报道一致[4-8],这可能的原因是重症监护病房患者的病情严重,住院时间较长,常常使用呼吸机及侵入性操作,导致ICU患者的感染几率较高。同时,ICU患者常常使用高效广谱抗生素,容易导致多重耐药菌的出现。
耐药性分析显示,本研究中分离的CRE对临床常用的18种抗生素的耐药性普遍较高,除阿米卡星的耐药率为41.9%外,其他抗生素的耐药率都在70%以上,β-内酰胺类抗生素的耐药率>85%。导致肠杆菌科细菌对碳青霉烯耐药的主要原因是由于产生碳青霉烯酶、通道蛋白缺失和外排泵的过表达,其中产生碳青霉烯酶是引起肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制[9]。目前产KPC酶的肺炎克雷伯菌为CRE主要传播菌株,其他的还有VIM酶、NDM酶和0XA酶[10],在我国CRE的主要种类是产KPC 肺炎克雷伯菌,并以ST11 型菌株为主要流行ST 型[11]。
综上所述,CRE的耐药现象非常严重,同时,由于碳青霉烯酶的耐药基因可通过质粒在不同菌种间水平传播[12],临床应重视并加强对医院感染的预防和控制,防止耐药菌感染的爆发。