青蒿素及其衍生物防治鸡球虫病的研究进展综述

郭全海，刘诗柱，王 留，刘中原，王中华

(1.商丘职业技术学院，河南 商丘 476100；2.商丘市农业农村局，河南 商丘 476000)

引言

青蒿是一年生的菊科蒿属草本植物.青蒿素是从黄花蒿茎叶中提取的.1971年，中国药学家屠呦呦研究团队发现青蒿素是含有过氧基团倍半萜内酯的晶体药物，具有很好的抗疟疾作用.因此，青蒿素成为人们研究青睐的对象[1].据中国古代医学书籍记载，青蒿具有治温病、暑热，抗疟疾、痢疾等功效.现代药理学研究表明，青蒿素的衍生物是目前疗效最好、抗药性最低、应用前景最好的抗疟药物[2].而且青蒿素在深度开发方面也有很好的市场前景.在青蒿素类衍生物的免疫抑制活性研究中发现，经过结构改造合成的新型青蒿素类衍生物的免疫抑制活性有大幅提高，同时这类青蒿素衍生物保留了在体内低毒的特性，有望发展成为一类新型免疫抑制剂[3].

青蒿素提取虽然已经有比较成熟的工艺，但将其制成成品的成本较高，再加上其特殊的生物学特性，临床利用效率较低，而青蒿素衍生物更容易利用，且效果优良.因此，青蒿素的衍生物从20 世纪 80 年代就成了研究的热点.如蒿甲醚、蒿乙醚、二氢青蒿素、青蒿琥酯等在临床上用于治疗疟疾,已经证实具有高效、速效、低毒的特点[4].大量的实际应用研究表明，青蒿素对改善由寄生虫病引起的病理变化和炎症反应效果明显，具有良好的抗寄生虫作用[5].国内外兽医临床研究发现，青蒿素在抗鸡球虫病方面也具有良好的效果.但是，青蒿素在控制鸡球虫病的用量方面还没有统一的标准，同时，抗鸡球虫病的机理还不十分清晰.本文主要就青蒿素及其衍生物在治疗鸡球虫病的效果及其作用机理做一综述，为相关科研提供参考.

1 鸡球虫病的流行及药物防治现状

球虫病是养鸡生产中的常见病，对鸡危害严重，尤其是雏鸡.目前，我国发现有9种鸡球虫，其中，毒力最强的柔嫩艾美耳球虫寄生于鸡肠上皮细胞，临床上引起鸡发病后，常导致鸡只生长受阻，同时也增加了沙门氏菌等病原的感染概率[6].15-40日龄的雏鸡发病，致死率可高达80%以上，给养鸡业带来难以估计的经济损失[7].

当今生物科技虽然已经很发达，但防治鸡球虫病仍然没有高效的疫苗，临床主要以化学药物进行干预，如聚醚类、地克珠利、尼卡巴嗪、氨丙啉、硝基苯酰胺类及喹啉类等药物.虽然西药的种类多、可选择性大，但由于频繁用药且药量不断加大，不仅对鸡肉食品安全威胁较大，而且还易产生耐药性.目前，虽说可以采用交替用药的方法有效防治鸡球虫病，但总体来说，其治疗效果在不断下滑.随着人们对身体健康的注重及国家对抗生素药物的使用限制，近年来，利用中药治疗鸡球虫病已经成为研究热点.国内外研究较多的中药主要有以下几种：青蒿、常山、姜黄素、甘蔗提取物、芦荟等单味中药或者其中几种组成的复方中药.也有一些学者将中药与西药结合防治鸡球虫病.如陈蒲丹[8]用青蒿、苦参提取物、黄芪多糖及连翘提取物等中药制备的复方青蒿制剂抗鸡球虫病，抗球虫指数为164.69，能有效减少鸡的死亡，加快康复.

黄杰[9]在研究青蒿素预防鸡艾美耳球虫过程中联用了癸氧喹酯，结果证明，两种药具有协同作用，比单药使用效果更突出，更明显.

承南[10]在青蒿素与复方磺胺间甲氧嘧啶联合应用抗鸡柔嫩艾美尔球虫的疗效试验中，分别单独用青蒿素、复方磺胺间甲氧嘧啶及联合用该两种药物并将其做了对比，结果发现联合用药治疗艾美尔球虫感染鸡具有明显的改善肠道病变、减轻肠道炎症的作用，而且用药量也比单独用药减半.宋萍等[11]的研究结果与此基本一致，而且青蒿素联合柳氮磺吡啶用药，效果会更加优良.研究发现，中药治疗鸡球虫病不但毒副作用小，而且不易使鸡球虫产生耐药性，因此，中药防治该病将会有很广阔的前景和巨大的市场[12-13].

2 青蒿素及其衍生物防治鸡球虫病

国内外研究资料表明，在防治鸡球虫病的过程中，青蒿素体现了优良效果，而其衍生物却没有体现出明显的作用.通常在饲料中以添加青蒿微粉、青蒿叶或青蒿提取物及它们的药物制剂等方式为主.黄鑫[14]在感染球虫卵鸡的饲料中加入青蒿粉，结果发现，感染鸡的盲肠病理变化及组织病变较对照组明显减轻，并且粪便中卵囊排出数量大大减少，感染鸡精神状态明显好于未用青蒿素的鸡,但这一结果与所用青蒿粉的量有正相关关系，这与牛彪等[15]、Thofner等[16]及焦金英[17]的研究结论一致.宋萍等[18]借助青蒿素类药物对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的防治试验表明，青蒿素对鸡球虫感染有较好的防治效果，能够有效降低卵囊值及盲肠病变值，但对蒿甲醚防治球虫的试验结果证实无效.王安源[19]的研究结果表明，青蒿素及其衍生物中，青蒿素防治鸡球虫病效果明显，不但使感染鸡盲肠病变削弱，也使卵囊量大量减少.同时，其在试验中也发现蒿甲醚及青蒿琥酯没有明显的抗球虫效果.Brisibe等[20]将青蒿叶添加到蛋鸡饲粮中，发现蛋鸡无论是采食量、产蛋量还是蛋重和蛋黄颜色均有显著改善，且具有良好的抗球虫效果.Del[21]在饲粮中分别添加10 mg/kg、17 mg/kg青蒿素，结果发现，可以显著降低鸡粪便中球虫卵囊的排泄数量，降低发病率，而且还会抑制肌浆内质网ATP酶的表达[22].但总的来说，要増强青蒿素类药物的抗球虫效果，还需在剂型、给药方式和联合用药方面做进一步研究.

虽然大部分国内外学者对青蒿素抗鸡球虫病的效果是肯定的，但是也有持不同观点的.宁长申等[23]用人工合成的青蒿素防治鸡艾美尔球虫的感染，测试结果表明，青蒿素能抑制感染鸡的死亡，但是会造成血便、卵囊的产生，并且降低鸡的增重.其依据抗球虫指数(ACI)(ACI≥180定为高效药；160≤ACI≤179定为中效药；ACI≤160为低效药)判定，认为青蒿素预防鸡球虫病无优良效果.李金贵等[24]的研究与此结论基本一致.国外学者Arab H[25]对青蒿素的研究表明，青蒿素是肉鸡生产中良好的添加剂，但量过高时会造成鸡的脑部染色质溶解、神经元坏死等不良反应.

3 青蒿素及其衍生物防治鸡球虫病的机理

目前，对于青蒿素及其衍生物防治鸡球虫病的机理，药物学家们已经从免疫学方面及抗炎抗应激方面做了大量研究，但非常明确的机理还有待进一步探索，尤其哪一方面的作用是抗球虫最主要的因素更需深入研究.

3.1 对鸡免疫力影响

青蒿作为中草药，比化学药物更有自身天然药物的优势，不仅可防治鸡球虫病，还可增强鸡群的免疫力[26].

研究表明，青蒿素及其衍生物能够直接作用于T淋巴细胞，可参与T淋巴细胞介导的免疫性反应[27-28].彭广辉[29]的研究结论证实，青蒿素中含的生物碱有促进单核巨噬细胞的吞噬功能增强的作用,并且有促进T淋巴细胞数量增加的功能,进而抑制鸡球虫病的发展.戴必胜等[30]用含有青蒿的中草药饲喂肉仔鸡，结果发现，肉仔鸡饲粮中添加含有青蒿的中草药后，不仅可以显著提高肉仔鸡的平均日增重、盲肠内双歧杆菌及乳酸菌杆菌浓度，增加回肠微绒毛的长度，显著降低料重比和盲肠内容物中的大肠杆菌数量，而且还能显著增加胸腺、法氏囊、脾脏等免疫器官的相对重量，从而提高了机体的免疫力.陈浦丹[8]在防治鸡球虫病的研究中发现，青蒿及其提取物可通过促进机体外周T淋巴细胞IL-2的基因表达，提高机体免疫力，抑制鸡柔嫩艾美尔球虫虫卵囊孢子化，增强杀菌作用，能有效预防和治疗鸡柔嫩艾美尔球虫对鸡的损伤.另外，在鸡的免疫应答中，IL-2能够促进B细胞的分化成熟并刺激它转化为浆细胞，进而增强机体针对鸡球虫的特异性抗体分泌.

3.2 对抗炎及其他方面的影响

青蒿在临床上能用来缓解鸡的热应激.Song等[31]研究发现，在热应激环境条件下，当饲粮中添加酶解青蒿后可以显著提高肉鸡对粗脂肪、粗蛋白和有机物的表观利用率，提高空肠中麦芽糖酶和蔗糖酶活性，能有效缓解鸡的热应激.Wan等[32]研究结果表明，在肉鸡饲粮中分别添加0.75 g/kg、1.00 g/kg、1.25 g/kg的酶解青蒿，可以有效缓解热应激引起的生产性能下降、血液pH值升高及血清中皮质酮、谷草转氨酶、谷丙转氨酶的升高，并且能够通过提高血清和肝脏中抗氧化酶活性及调节相关mRNA表达水平来增强抗氧化能力，从而有效缓解热应激.也有报道显示，青蒿素可产生自由基,该自由基与球虫蛋白形成共价键,导致球虫死亡,这与传统的抗球虫药物的作用机理完全不同[33].

国内学者莫平[34],焦金英等[17]的研究证实，青蒿素可通过抑制球虫卵囊壁的形成来减少卵囊排放量，同时能够降低卵囊的孢子化率，从而显示出一定的抗球虫效果.郭红斌等[35]在肉鸡饲粮中添加青蒿素，试验结果显示，该方法能降低肉鸡血清中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合成酶(NOS)的活性，对柔嫩艾美尔球虫有明显的清除疗效.莫平华[36]研究发现，被柔嫩艾美尔球虫感染鸡使用青蒿素后，能降低其第2代裂殖子线粒体的膜电位，进而诱导第2代裂殖子凋亡，从而达到减轻感染鸡盲肠组织病变、促使发病鸡症状减轻的作用.Emilio D C 等[37]研究钙离子对球虫的发育影响，结果发现，青蒿素能引起球虫配子肌浆内质网钙离子代谢的紊乱；同时，在宏观形态上，青蒿素还可以破坏球虫卵囊壁，显著降低卵囊数量，最终达到抗球虫的作用.

4 展望

截至目前，鸡球虫病的防控仍然是个世界难题.青蒿素具有化学药物不可比拟的优势，既可以防治鸡球虫病，同时也可以增强鸡的免疫力[38]；其高效、低毒的特点有望成为新型抗球虫药物[39].

大量文献证实，青蒿素及其衍生物在抗球虫、抗疟原虫、抗血吸虫、抗鞭毛虫等寄生虫方面效果良好.但青蒿素及其衍生物在抗这些寄生虫方面是否具有相似的作用机理，目前还没有学者证实，只是分别表述了抗某种寄生虫的机制[40]，这或许会成为今后研究的重要方向.为了防止滥用抗生素，国家规定，从2020年起，动物饲料中全面禁止加入抗生素.今后，利用中药控制鸡球虫病，将会是研究的热点和焦点.青蒿素及其衍生物在抗球虫方面的作用机理尚不十分清楚、用药剂量没有统一的标准.借助于分子生物学的高度发展，应该在青蒿素及其衍生物药物成分与球虫的生理、青蒿素及其衍生物与用药对象、球虫与寄生动物机体之间的相互作用关系等方面进行多角度综合研究.

根据中兽医理论和大量的临床试验不难发现，单一的中草药(如青蒿)治疗鸡球虫病效果相对有限，而多味中药配比使用效果会更好.李宏娟等[41]对由常山、青蒿、柴胡、苦参、苦楝根、黄芪等13种中草药按不同组成和配比配制的5个不同中药复方进行了抗球虫效果测试，结果发现，青蒿配比高的复方药可明显提高鸡球虫感染后的存活率，常山配比高的复方可明显降低鸡球虫感染后的卵囊值.结合临床实际应用的效果发现，单味中药对鸡球虫病作用效果相对低下，但与剂量相关性大.因此，可以结合临床试验进一步研究青蒿素及其衍生物合适的剂型、用药剂量、用药方式及用药时机等，进而探索科学的药物标准.

众所周知，中药成分非常复杂，而复方中药的成分更是复杂，甚至其有效成分作用原理都不能清楚的描述，因此，制定药物标准的难度是极其高的.开展单味中药作用鸡球虫机理研究的同时，也应进一步研究两味或多味中药治疗鸡球虫病的协同或增强作用的机理，如青蒿与常山共用治疗鸡球虫病的效果及机制研究等.