大黄侧柏散薄层色谱鉴别研究

李毓祺

(台山市中医院，台山 529200)

大黄侧柏散是台山市中医院的医院制剂，该制剂由大黄、黄柏、泽兰、侧柏叶、薄荷5味中药材组成的，具有活血祛瘀、消肿止痛功效。用于疮疡初起时红肿热痛、静脉炎和急慢性盆腔炎的治疗。治法以活血祛瘀、消肿止痛、清热凉血为主，而中药外敷可使外用药物有效成分直接作用于气血瘀滞的患处，是中医传统治法之一[1，2]。其方中重用生大黄，其功擅破积滞、行瘀血，又可泄热，唐宋《日华子本草》誉赞其可“通宣一切气，调血脉，利关节”，外敷可推陈致新，力破血瘀之陈。其性苦寒，归脾、胃、大肠、肝、心包经。具有泻下攻积，清热泻火，凉血解毒，逐瘀通经，利湿退黄之效，现代药理研究显示其具有抗菌抗感染作用，其中大黄含的羟基蒽醌衍生物对多种革兰阳性菌和阴性菌有抑制作用，抗炎效果显著[3-5]。侧柏叶，性苦寒，归肺、肝、脾经，具有凉血止血、清热解毒之效，药理研究表明其含的黄酮类物质具有镇静抗炎抗菌作用[6，7]，两者共为君药；黄柏苦寒沉降，可清热燥湿、泻火解毒，现代药理研究显示其抗炎效果显著，抑制炎性物质释放，其中黄柏所含小檗碱及少量黄柏碱物质能对疼痛信号进行阻碍，镇痛疗效显著[8，9]，为臣药；泽兰功可补气血、利血脉、散瘀血、生肌肉，又可活血祛瘀、消肿止痛。《日华子本草》载：“通九窍，利关脉，养血气，破宿血，消癥癖”，更有《太平圣惠方》用泽兰丸“治诸伤折，踠损蹉跌，筋骨疼痛”[10]，其疗效可见一斑，为佐药；薄荷辛凉，清热透疹行气，引诸药通窍，现代药理研究表明其在镇静解热、抗炎抗菌、抑制病毒方面有特效，同时其还有促进透皮吸收的作用[11-13]，为使药。诸药合用，功专活血祛瘀，消肿止痛，清热凉血。用于疮疡初起时红肿热痛、静脉炎和急慢性盆腔炎的治疗。又因其采用外敷用法，药物在患处发挥作用，无需经胃肠道代谢，药物安全性高。本制剂使用方便，临床疗效佳，患者依从性好，深受广大患者好评。本次研究对方中的大黄及黄柏进行薄层鉴别，建立起初步的质量控制方法，从而保证该制剂的质量。

1 仪器与试药

1.1 仪器

FA1604S电子天平(赛多利斯-季尔国际贸易(上海)有限公司);XMTD2888风热式电热恒温干燥箱(山东省禾雅实验科技有限公司)，GoodSeedⅡ型薄层色谱仪(上海科哲生化科技有限公司)。

1.2 药品试剂

大黄侧柏散(台山市中医院自制，批号：20190108，20190521，20191106)，大黄、黄柏对照药材(中国药品生物制品检定所)。薄层层析用硅胶G(中国青岛海洋化工集团公司)；甲醇、盐酸、石油醚(30～60℃)、甲酸乙酯、甲酸、冰醋酸、正丁醇等所用试剂均为分析纯。

2 实验方法与结果

2.1 大黄药材的薄层鉴别

2.1.1供试品制备

3个批号的大黄侧柏散各取5g，加10%盐酸溶液2mL和甲醇30mL，使用超声进行处理，时间为15min，并进行滤过处理了，之后将滤液进行蒸干处理，将残渣放入甲醇中，甲醇的量为2mL，将其进行充分的溶解，将制备液作为供试品溶液。

2.1.2对照药材溶液制备

取大黄对照药材，量为1g，制备方法同于2.1.1中的供试品制备方法。

2.1.3阴性对照溶液制备

取全部处方药材(不含大黄)，其制备方法参照大黄侧柏散的制备工艺方法及2.1.1的具体操作方法。

2.1.4灵敏度试验

将供试品溶液放入甲醇中进行稀释处理，以稀释10倍为宜。

2.1.5薄层鉴别

将上述制备的溶液各取出2μL，并在硅胶G薄层上进行滴点，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层液为展开剂，展开(展开缸预平衡15分钟)，完成后取出并进行晾干处理，使用紫外光灯进行检视。观察供试品的色谱在与对照药材相对应的位置上显现出相同的荧光斑点，且颜色为橙黄色。

2.2 黄柏药材的薄层鉴别

2.2.1供试品溶液制备

3个批号的大黄侧柏散各取5g，并加入1%醋酸甲醇溶液，量为40mL，进行超声处理，时间为20min，之后进行滤过并对滤液进行蒸干处理，把2mL甲醇放入残渣中进行溶解，制备所得的溶液为供试品溶液。

2.2.2对照药材溶液制备

取黄柏作为对照药材，量为0.5g，其制备的方法与2.2.1中供试品溶液制备方法相同。

2.2.3阴性对照溶液制备

取除了黄柏以外的全部处方药材，制备方法同于大黄侧柏散的工艺方法，具体的操作按照2.2.1中的方法。

2.2.4灵敏度试验

将供试品溶液放入甲醇中进行稀释处理，以稀释10倍为宜。

2.2.5薄层鉴别

将上述制备的溶液各取出2μL，并在硅胶G薄层板上进行滴点，展开剂为正丁醇-冰醋酸-水(7∶2∶2)，展开，并将制备液取出后进行晾干处理，使用紫外光灯进行照射检视。观察供试品色谱在与对照药材相应的位置中显现出相同的颜色的荧光斑点。

3 结果

3.1 大黄的薄层鉴别

从图1中可看出，供试品及对照药材的色谱荧光斑点均呈现出一一对应，能够清晰地看出色谱斑点，具有较好的分离度与灵敏度，阴性的对照物没有产生干扰。

3.2 黄柏的薄层鉴别

从图2可看出，供试品与黄柏对照药材的色谱均在相应的位置上呈现出，有相同的荧光斑点，且具有较高的清晰度、分离度与灵敏度，阴性的对照物没有产生干扰。

4 讨论

而薄层鉴别法是一种简便、可靠、快速的定性鉴别方法，本制剂所含药味多，成分复杂，对处方中具有抗炎镇痛消肿的大黄、黄柏进行薄层色谱检测，经反复试验阴性对照无干扰，薄层色谱分离效果好，可用于定性评价大黄侧柏散质量。