医学检验实验室临床化学自建检测方法的质量保证方案

吴培东

天津市第五中心医院 （天津 300450）

近年来，随着医学检验技术的进步和临床科研需求的增高，实验室自建检测方法已经逐渐进入医院检验科的实践范围。其中，临床化学自建检测方法开展的条件低，为保证自建检测方法数据的可靠性，必须建立适宜的质量保证方案。

1 我国开展医学检验实验室自建检测方法的现状

医学检验实验室自建检测方法是在独立的医学（检验）实验室内依据生物化学、细胞学、遗传学、分子生物学等原理，自行设计、生产、验证并使用的分析人体蛋白组分、酶类、抗体、DNA、RNA、线粒体和各类疾病的体外诊断检验方法，只作为内部使用而不作为商品出售[1-2]。目前，我国开展的实验室自建检测方法主要分为3类：（1）实验室自行购买国家批准对外销售的商品试剂，制作或对成品销售试剂盒组成、操作过程进行改良和变更；（2）购买成品试剂盒中的单组分，如酶、缓冲液、抗体、细胞探针、引物等配制新的试剂供实验使用；（3）开展此项目的实验室购买或使用未经批准的成品试剂。临床化学类自建检测方法以上3种类型均可涉及。

2 实验室自建检测方法的管理模式

近年来，各国在实验室自建检测方法管理上大致分为两类：（1）以美国为代表的明确监管模式；（2）以欧洲和日本为代表的无明确监管的模式。目前，我国法规层面尚未有针对实验室自建检测方法的准确定义及管理措施，能起到管理效能的行政法规有国务院颁布的《医疗器械监督管理条例》和原国家卫生与计划生育委员会发布的《关于临床检验项目管理有关问题的通知》，即便如此，我国仍有很多实验室以科研和研发为目的开展了许多实验室自建检测方法。但因为外部监管不具体，所以，做好内部质量管理是开展此类工作实验室的首要任务，尤其制定质量保证方案是前提。

在实验室自建检测方法中，临床化学自建检测方法的开展条件低，大多数三级医院检验科均可开展，因此，加强自我管理是关键，且临床化学类自建检测方法必须保证一定的灵敏度、精密度及正确度相对偏差，对比实验和线性范围均需达到一定的范围。目前，ISO 15189是检验程序的性能验证文件，要求临床实验室对自身使用的检验程序进行正确度、精密度、线性、可报告范围及参考区间等性能的验证[3-4]；另外，需参照美国临床和实验室标准协会（CLSI）颁布的相关文件（CLSI EP17-A2评价最低检测限文件、CLSI EP5-A2评价精密度文件、CLSI EP15-A3评价正确度相对偏差文件、CLSI EP9-A3评价对比实验文件、CLSI EP6-A评价线性范围文件[5]）进行评估。

3 实验室临床化学自建检测方法的质量保证方案

3.1 仪器设备的质量保证方案

3.1.1 检查仪器设备的摆放及安装

检查仪器设备的环境、安装、防尘、防潮、工作温度以及噪声是否符合厂商要求；检查仪器设备电源、稳压设施、UPS和地线是否符合安装要求，是否远离高频电源或高压线缆，以防电磁干扰对仪器设备的影响；检查仪器设备是否受阳光直接照射，是否远离腐蚀性、挥发性物体。

3.1.2 建立、完善仪器设备的使用规章制度

建立、完善仪器设备的使用岗位责任制度，将集中管理和分散管理相结合，贵重仪器设备由专人管理，维护责任制度的相关规定；建立、完善仪器设备的操作制度，严格遵守操作规程，严禁违规操作；建立、完善开机检查、使用、正常维护、报警排除及故障检修制度；建立、完善室内外质量控制等级和分析制度，保证仪器设备的运行稳定性。

3.1.3 加强仪器设备操作人员的培训

加强人员上岗前的培训，操作人员需充分了解仪器设备的结构、工作原理、维护知识，熟悉调试、校准、仪器设备参数和参数修改的正确方法及仪器设备报警的快速识别和故障排除方法，充分掌握质量管理方法和问题分析；此外，还需学习和掌握仪器设备涉及的物理、化学及电子方面的知识，提高外语阅读能力。

3.2 临床化学自建检测方法的质量管理体系

3.2.1 总分析误差的评估和排除

总分析误差包括随机误差和系统误差。参照CLSI推荐的方案，将临床化学自建检测方法同可溯源的参比方法相结合，直接测定总分析误差；根据防范要求测定自建方法120个样品，每个样品均需使用溯源的参比方法，重复10次后，计算总分析误差。

3.2.2 统计质量控制程序的选择

根据测量程序观察到的不精密度和偏倚以及不同质量控制规则和不同控制测量数的失控特征选择统计质量控制程序，为了选择适当的统计质量控制程序，可通过功效曲线或功效函数描述不同控制规则和不同质量控制测量数的失控特征。

3.3 临床化学自建检测方法分析性能的管理方案

3.3.1 最低检测限

参照CLSI推荐的EP17-A2文件，应用实验室自建的临床化学检测方法所使用的试剂，对零含量标准品重复实验20次后，计算均值和标准差，以此作为最低检测限。

3.3.2 精密度

参照CLSI推荐的EP5-A2文件，应用实验室自建的临床化学检测方法，通过测定两个不同浓度的质控品，每个质控品在同等条件下重复测定20次后，计算此方法的批内变异系数（CV），批内CV值低于6%作为合格标准；同时，两个不同浓度的质控品以此方法连续测定20 d，计算批间CV，批间CV值低于8%作为合格标准。

3.3.3 正确度相对偏差

正确度相对偏差的测定结果决定了是否能够购买和提供公认的质控物。参照CLSI推荐的EP15-A3文件，测定不同批次的标准品和公认的质控物，分别重复测定3次后，计算均值和参考值的相对偏差值，以低于8%作为合格标准。

3.3.4 对比实验

对比实验适用于自配替代检验试剂的自建临床化学检测方法。参照CLSI推荐的EP9-A3文件，选择40个自建临床化学检测方法测试范围内不同浓度的标本，与销售商品试剂同步检测，使用线性回归方程计算两种试剂的相关系数和测量值上限预期偏差。

3.3.5 线性范围

参照CLSI推荐的EP6-A文件，接近测量低限样本和接近测量高限样本各取1份，将低限样本和高限样本按照1:0、3:1、1:1、1:3、0:1 5个浓度比例配制梯度样本，每个浓度样本重复测定3次并计算均值；以理论值为自变量，以测量值为因变量，计算线性回归方程，求得变异系数；将按比例的稀释度作为理论值代入该线性回归方程，求出估算值，进而求出估算值与测量值偏差；最后得出相对偏差与绝对偏差。

4 小结

实验室临床化学自建检测项目由仪器、试剂、校准品、质控品等组成。目前，国内一些医学实验室已开展了自建检测系统的实验，因此，应建立完备的质量保证方案，为发展实验室临床化学自建检测方法提供可靠的质量保证。