市售灯盏花药材及其提取物HPLC指纹图谱研究

张洪 武正才 黄春球 谢忠浪 腾利兵 郭昕

【摘 要】 目的：用高效液相色谱法建立市售灯盏花药材及其提取物的指纹图谱。方法：采用HPLC法，Agilent zorbax C18色谱柱（5μm，4.6mm×250mm）;乙腈-0.1% 醋酸铵水溶液（磷酸调PH至3）为流动相梯度洗脱;流速1mL/min;柱温25℃;检测波长为 335nm。结果：灯盏花药材有 10个共有峰;灯盏花提取物有12个共有峰。结论：此方法简便、准确、重复性好，可用于市售灯盏花药材及其提取物的HPLC指紋图谱测定，为今后其质量评价提供科学依据。

【关键词】 灯盏花药材;灯盏花提取物;HPLC指纹图谱

【中图分类号】R284.2 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2020）24-0039-04

Abstract：Objective To establish the HPLC fingerprint of erigeron breviscapus from market and erigeron extracts. Methods HPLC analysis was performed on aAgilent zorbax C18 column（5μm，4.6mm×250mm）with the eluting system of gradiant consisted of acetonitrile-0.1% ammonium acetate （H3PO4adjust PH to 3）.The flow ratewas 1mL/min;The column temperature was maintained at 25℃ and the detection wavelength was 335nm.Results 10 peaks were gained on the HPLC fingerprint of erigeron breviscapu and 12 peaks were gained on the HPLC fingerprint of erigeron extracts.Conclusion The method with good reproducibility is simple and accrute，which can be used for determination of HPLC fingerprint and quality control of erigeron breviscapus from market and erigeron extracts. It provides scientific basis of future study of erigeron breviscapus from market and erigeron extracts.

Keywords：Erigeron Breviscapus;Erigeron Extracts;HPLC Fingerprint

灯盏花为菊科植物短葶飞蓬 [Erigeron Breviscapul（Vent.）Hand- Mass.]的干燥全草[1]，又名灯盏细辛，是云南道地的民族药材。全草具有散寒解表、祛风除湿、活络止痛、消积的功效，临床上多用于治疗脑血栓、脑栓塞、中风等脑血管意外所致的瘫痪症、心绞痛等[2]。灯盏花主要成分为灯盏花乙素，此外还含有黄酮、吡喃酮、倍半萜、咖啡酸酯、酚酸类化合物等多种化学成分[3]。

2015版中国药典以灯盏花乙素的含量作为评价药材质量的指标。然而，仅控制灯盏花乙素的含量并不能反映灯盏花药材或提取物的整体质量。指纹图谱质量控制技术通过全面反映中药所含内在化学成分的种类与数量，能有效的反映中药质量[4]。本实验采用高效液相色谱分析方法对10批市售灯盏花药材和8批自提灯盏花提取物进行系统的指纹图谱研究，用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（版本2004A和B）”建立灯盏花药材及其提取物对照指纹图谱，对各批次的灯盏花药材及其提取物的指纹图谱相似度进行分析比较。近年来虽然有一些文献对灯盏花药材及其提取物HPLC指纹图谱进行研究[5-6]，但是这些指纹图谱仅仅指认了参照色谱峰的结构。笔者对生产用市售灯盏花药材及灯盏花提取物的HPLC指纹图谱进一步进行研究，标定其中3个指纹峰的结构，研究结果为市售灯盏花药材及其提取物的质量评价提供科学参考依据，为市售灯盏花药材及其提取物提供一种有效的质量控制方法，确保外购灯盏花药材及其提取物相关产品的稳定性和均一性。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent-1260高效液相色谱仪（四元梯度泵，自动恒温进样器，柱温箱，紫外检测器），超声波清洗仪，中药色谱指纹图谱相似度评价系统（版本2004A和B）的相关软件。

1.2 材料 乙腈（色谱纯），醋酸铵（分析纯），磷酸（分析纯），超纯水。灯盏花乙素、灯盏花甲素、野黄芩素对照品（云南植物药业有限公司研究院自制）。10批灯盏花药材（云南植物药业有限公司外购），8批灯盏花提取物（云南植物药业有限公司按2015版《中国药典》一部中灯盏细辛颗粒标准制法提取外购灯盏花所得的提取物）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱Agilent zorbax C18（5μm，4.6mm×250mm）;流动相：乙腈（A），0.1%的醋酸铵水溶液（磷酸条PH为3）（B），梯度洗脱比例见表1;检测波长：335nm;柱温：25℃;进样量：5μL;流速：1mL/min。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取灯盏花乙素对照品适量，加甲醇超声溶解制成含量为0.140mg/mL的溶液。精密称取灯盏花甲素对照品适量，加甲醇超声溶解制成含量为0.238mg/mL 的溶液。精密称取野黄芩素对照品适量，加甲醇超声溶解制成含量为 0.043mg/mL的溶液。