吡拉西坦分散片设备验证的分析方法建立

魏巍 刘宇（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，辽宁 沈阳110027）

建立行之有效的设备残留检测的分析方法，非常重要。紫外法一般采用吸光度法，灵敏度不高，适用范围窄［1］，高效液相法的定量检测则灵敏度较高，适用于大多数化学类制剂产品。

1 仪器

日本岛津高效液相色谱仪（SPD-20A型紫外可见检测器）

分析天平：Sartorius 公司，型号：ME235S（量程230 g，可读性：0.01 mg）

数显恒温水浴锅：国华电器有限公司，型号：HH-4

紫外仪：北京市六一仪器厂，型号：WD-9403B

2 试剂试药及对照品

吡拉西坦对照品（来源：中国食品药品检定研究院，批号：100386-200706，含量：100%）

吡拉西坦（来源：东北制药集团股份有限公司，批号：0301308046，含量：99.84%）

30%过氧化氢、氢氧化钠（分析纯）、盐酸（分析纯）：国药集团化学试剂有限公司

甲醇（色谱纯）：赛默飞世尔科技（中国）有限公司

3 方法建立［2］

3.1色谱条件

流动相：以甲醇-水（10：90）为流动相；色谱柱：安捷伦品牌

TC-C18 4.6×250mm；

检测波长：210nm；流速：1.0ml/min；进样体积：10µl；柱温：30℃；理论板数按吡拉西坦峰计算不低于2000。

3.2专属性——光照、高温、氧化、酸碱破坏试验

称取吡拉西坦原料约0.03g，置100ml 量瓶中，加入空白辅料，加水溶解，分别在紫外灯下放置2小时、在60℃水浴中放置2小时、加0.3%过氧化氢溶液10ml 放置2 小时、加1.0mol/L 盐酸溶液10.0ml放置2小时、加1.0mol/L氢氧化钠溶液10.0ml放置2小时，用水至刻度，混匀后过滤处理。空白辅料同法操作，空白辅料和杂质均不干扰对本品的检测。

3.3 回收率

分别称取吡拉西坦原料12mg，15mg，18mg，每个称样量3份，分别置50ml 量瓶中，配以空白辅料，加水溶解并稀释至刻度，混匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，作为原液。分别取原液1ml均匀的注到已准备好的304L不锈钢板上，风干后，进行擦拭取样，将取样后的棉签剪断，分别溶于20ml水中，超声溶解，放至室温，滤过，作为被测溶液；精密称取吡拉西坦对照品约0.015g，置100ml 量瓶中，加水溶解至刻度，混匀，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，混匀作为对照品溶液。进样后按外标法计算回收率，9个回收率的数据均大于50%。满足回收率应≥50%的限度要求，准确度良好。

3.4 线性

称取吡拉西坦对照品约0.015g，精密称定，置500ml 量瓶中，加水溶解至刻度，混匀，作为母液，分别从储备液中取出体积制成最终浓度0.9ppm、1.2ppm、1.50ppm、1.80ppm、2.10ppm的样品溶液，以样品的浓度为横坐标，样品的峰面积为纵坐标绘制所需的曲线方程。吡拉西坦分散片样品在浓度0.92ppm 到2.15ppm 范围内与峰面积呈良好的线性关系，且相关系数为0.9992 ＞0.99。吡拉西坦在低浓度下也可准确的定量检出。

3.5 系统重复性

称取吡拉西坦对照品约0.015g精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解至刻度，混匀，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，在上述色谱条件下，连续进样5次，峰面积变化的RSD为0.15%，说明系统能满足检测的要求。

3.6 检测限与定量限

称取吡拉西坦对照品约0.015g，精密称定，置100ml 量瓶中，加水溶解至刻度，混匀，精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，混匀，作为母液。再用稀释剂（水）稀释制成不同浓度的稀溶液（在低浓度区）。各量取10µl检测，即可通过不同浓度的供试品测出的信号与空白品测出的信号进行比较。S/N≈3时为检测限，检测限为2.99ppb；S/N≈10 时为定量限，定量限为14.95ppb。

4 结语

吡拉西坦分散片杂质对检测无干扰，吡拉西坦分散片在浓度0.92ppm到2.15ppm范围内线性合格，系统重复性合格，准确度合格，检测限为2.99ppb，定量限为14.95ppb。本方法完全能够满足吡拉西坦分散片设备残留的检测。吡拉西坦对光、氧化、高温、酸、碱等环境均较稳定，在操作过程中仅需认真操作，避免出现较大的误差。