大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型中光纤氧测量系统的应用和评估

宜 全，谭芳慧，张贵平

(广州医科大学药学院药理学教研室，广东 广州 511436)

心肌缺血/再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)损伤模型常用开胸结扎冠状动脉左前降支(left anterior descending artery，LAD)的方法建立[1-3]，而结扎是成模的关键，其确定方法以往文献报道均通过肉眼观察和心电图分析，本实验应用光纤氧测量系统，并在术后用B超和HE染色进行评估。

1 材料与方法

1.1 实验动物SPF级SD ♂大鼠(250±25) g，购自广州中医药大学实验动物中心[SCXK(粤)2013-0034]，获得广州医科大学动物伦理委员会的批准(2013-72)。

1.2 仪器光纤氧测量系统OXY-MICRO-AOT(美国World Precision Instruments公司)，小动物实时超声成像系统(加拿大Visual Sonic公司，Vevo2100高分辨，RMV 250探头)，15L8高频探头超声仪Acuson Sequoia 512(Siemens 公司)，动物呼吸机HX-100E(成都泰盟科技有限公司)。

1.3 心肌I/R模型建立大鼠麻醉开胸，将小硅胶管垫于冠状动脉行LAD结扎，1 h后取出硅胶管松解结扎线，分别在结扎前、结扎后和松解后插入光纤氧测量系统的探针于左心室前壁内，测量结扎部位下方心肌氧分压。

1.4 超声测量心功能大鼠麻醉仰卧固定于恒温超声操作面板上，于乳头肌水平记录左心室运动曲线，采图，测量软件自动生成心功能各项指标。取10个连续完整心动周期测量值的平均值为测定值。

1.5 心肌组织病理学检查大鼠开胸取心脏，甲醛固定，酒精梯度脱水、石蜡包埋、切片、脱腊、HE染色，光学显微镜下观察，拍照。

2 结果

2.1 大鼠LAD结扎后，左心室前壁心肌氧分压下降LAD结扎前氧分压为60～70mmHg，结扎后氧分压立刻下降≥50%，松开结扎线后，氧分压迅速回复至正常水平，说明LAD结扎成功。

2.2 大鼠急性心肌I/R后左心室收缩功能降低在缺血1 h，再灌注3 h和24 h，用B超检测心功能，结果显示，与Sham组比较，I/R(3 h)和I/R(24 h)模型组左室收缩末期内径(LVIDs)增大(P<0.05)，I/R(24 h)模型组左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)均降低(P<0.05)，说明左心室收缩功能降低，见Tab 1。

2.3 大鼠急性心肌I/R后心肌病理改变在缺血1 h，再灌3 h和24 h，取左心室前壁结扎线下进行HE染色。结果显示，Sham组着色均匀，心肌细胞排列整齐、结构完整，肌纤维横纹清晰；I/R模型组局部着色不均匀，染色变浅及发白，I/R(3 h)心肌细胞间隙水肿及心肌细胞周围炎性细胞浸润最为明显；I/R(24 h)肌纤维排列紊乱，局部呈波纹状改变或部分断裂，红细胞渗出增多。

Tab 1 Echocardiography indicators of rats in each group group n = 6，I/R model groups n=8)

3 讨论

本研究首次报道，采用光纤氧测量系统监测心肌I/R损伤时心肌氧分压的变化，判断LAD结扎成功与否，与用肉眼观察和心电图方法比较，在操作上更简单、直观和准确，明显提高了成模率。