黄海皎,李 杨,高小丽,田朋佳,尼玛央宗,拉巴扎西,次 珍,魏新虹,曲 吉,廖文华
(西藏自治区农牧科学院农业研究所,西藏拉萨 850000)
青稞(Hordeumvulgarevar. nudum)属于禾本科大麦属作物,是青藏高原最有特色的一种作物[1]。西藏地区海拔高,太阳辐射强,且随海拔升高,气温不断降低;受气候影响,西藏有超过50%的耕地面积只能种植青稞[1]。青稞是西藏种植面积最大、总产量最高的重要粮食作物[2]。青稞是裸大麦,含有丰富的营养成分[3],其籽粒淀粉含量平均为59.25%[4];蛋白质含量在7.68%~17.52%之间,均值为11.31%,其含量高于小麦、水稻、玉米等粮食作物[5]; 富含β-葡聚糖,含量为4%~8%,在西藏青稞中甚至有β-葡聚糖含量高达8.62%的品种,远高于皮大麦[6-7];γ-氨基丁酸含量高于皮大麦籽粒[8];富含大量元素和微量元素(钙、磷、铁、锌、硒)[9-11]。
青稞富含营养成分及生物活性物质,具有降低胆固醇、提高免疫力、调节血糖等保健功能,被广泛用于人类食用以及动物饲养[12-14],如用于酿造啤酒、烘焙食品、加工青稞酒、糌粑、饼干、面条等[15]。目前,关于青稞的大量研究主要集中在遗传多样性分析,营养成分研究,海拔差异、加工方式对青稞品质的影响,分子生物学特征分析、品种改良等方面[3-11,16-22],而对大量青稞种质资源进行营养品质综合评价的研究较为有限。本研究以251个西藏青稞种质资源为材料,测定青稞籽粒粗蛋白、淀粉、β-葡聚糖、γ-氨基丁酸、大量元素(Ca、P)、微量元素(Fe、Zn、Se)的含量,运用Pearson相关分析、主成分分析对青稞营养品质进行综合评价,以期全面、客观地评价青稞籽粒营养品质,为青稞优异种质筛选和籽粒营养品质改良提供科学依据。
以来源于西藏地区的251份青稞种质为材料,其来源地点分别为扎达(17)、亚东(16)、普兰(15)、隆子(7)、定结(39)、措美(4)、乃东(1)、措那(1)、吉隆(19)、康马(35)、定日(65)、日土(9)、岗巴(18)、聂拉木(1),另有4个育成主品种藏青320、藏青690、喜马拉22号、藏青2000。
将供试种质在西藏自治区农牧科学院农业研究所4号试验地统一繁殖后,分别从每个收获青稞种质中选取适量饱满籽粒,放置在电热鼓风干燥箱中60 ℃恒温干燥至恒重。每个种质分别称取100 g,粉碎后过80目筛得青稞粉,用于青稞淀粉、粗蛋白、β-葡聚糖、γ-氨基丁酸、大量元素(Ca、P)、微量元素(Fe、Zn、Se)含量的测定。淀粉含量测定采用蒽酮比色法[25];粗蛋白含量使用凯氏定氮仪进行测定[25];β-葡聚糖测定采用刚果红比色法[26];测定γ-氨基丁酸的含量采用比色法[8];Ca、P、Fe、Zn、Se元素含量测定采用ICP-OES直接测定,Ca、P、Fe、Zn、Se的分析波长依次分别为 317.9、213.6、238.2、206.2、196.0 nm[27-28]。3 次重复。
利用Excel对数据进行整理。利用SPSS 19.0对数据进行Pearson相关性系数计算;使用R version 3.6.3的corrplot软件包绘制相关性分析图。9个品质性状存在不同的量纲、数量级,为了避免量纲、数量级的影响,对各指标数据进行标准化处理,将各指标数据转化成均值为0、标准差为1的无量纲数据,利用SPSS 19.0进行主成分分析,使用R version 3.6.3的FactoMineR软件包对主要成分进行层次聚类分析,构建综合评价模型评估青稞营养品质。
供试青稞种质的9项营养品质指标的测定结果见表1。251个青稞种质资源的淀粉含量为35.877%~73.638%,均值为63.370%,变异系数为10.803%,是所测定的9项营养品质指标中变异系数最小的指标,表明青稞淀粉含量在供试的251个青稞种质资源之间差异较小。粗蛋白含量在8.091%~22.552%之间,均值为14.024%,变异系数达19.387%。β-葡聚糖、γ-氨基丁酸、Ca、P含量的变异系数分别为20.749%、 33.618%、18.421%、27.526%。微量元素(Zn、Fe、Se)的变异系数都在29%以上,其中Se含量的变异系数达148.028%,表明不同青稞种质间微量元素含量差异较大。由此可见,不同青稞种质间的9项营养品质性状均存在不同程度的差异,表明西藏青稞种质资源存在丰富的遗传多样性。
表1 参试西藏青稞的营养品质
由表2可知,淀粉含量与β-葡聚糖含量呈极显著正相关,而与γ-氨基丁酸、Ca、P、Zn、Fe含量呈极显著负相关。粗蛋白含量与淀粉含量呈极显著负相关,与γ-氨基丁酸、Ca、P、Zn、Fe含量呈极显著正相关。由此可见,提高粗蛋白含量,适当调整淀粉含量,有助于青稞高营养品质改良。β-葡聚糖与γ-氨基丁酸含量呈极显著正相关,与P以外的矿质元素含量呈显著或不显著负相关。γ-氨基丁酸与Se以后的矿质素均呈极显著正相关。
表2 青稞各品质指标间的相关性
采用主成分分析法对251个青稞种质的粗蛋白、淀粉、β-葡聚糖、γ-氨基丁酸、Ca、P、Fe、Zn、Se含量进行分析,结果(表3)表明,前3个主成分的特征值及连续斜率较大,其贡献率分别为 48.0%、16.2%和10.3%,累计贡献率达74.5%,已能综合反映青稞营养品质的大部分信息。因此,可将青稞的9个品质性状综合成3个主成分。不同青稞种质营养品质主成分对应的载荷系数表明,主成分1在Zn、P、Ca、粗蛋白、γ-氨基丁酸、淀粉、Fe含量上的载荷值较大,主成分2在β-葡聚糖、Se含量上的载荷值较大(图1)。
图1 不同青稞种质营养品质主成分对应的载荷系数
表3 不同青稞种质营养成分主成分的总方差贡献率
基于不同青稞种质营养品质主成分(PC1和PC2)得分情况进行聚类(图2),可将251个青稞种质分为三大类(A、B、C),其中,聚集在C组的
BJX152:Lanqingke;BJX008:Kangmazongbai;BJX149:Heiqingke; BJX004:Yijiqingke; BJX003:Jilongqingke; BJX015:Paliqingke; BJX005:Erjiqingke; ZQ2000:Zangqing 2000; BJX227:Wenggaduanmang;XML22:Ximala 22.
青稞种质的营养品质较高。以特征向量为权重构建3个主成分与原来9项营养指标的线性方程,结果如下:
F1=0.199X1-0.165X2-0.024X3+ 0.170X4+0.189X5+0.210X6+0.104X7+ 0.210X8+0.017X9
F2= 0.158X1+0.195X2+0.548X3+ 0.246X4-0.091X5+0.050X6-0.322X7+ 0.087X8-0.374X9
F3= -0.058X1+0.325X2+0.448X3+ 0.143X4+0.130X5-0.034X6+0.033X7- 0.074X8+0.850X9
依据载荷系数矩阵累计贡献率提取的3个主成分分值及相应的贡献率,建立青稞营养品质综合评价的数学模型F综合= 0.480F1+0.162F2+0.103F3。根据综合评价模型计算不同青稞营养品质的综合得分,优选出10个营养品质高的青稞种质,分别为BJX152、BJX008、BJX149、BJX004、BJX003、BJX015、BJX005、藏青2000、BJX227、喜马拉22号(表4)。
表4 优选的高营养品质青稞种质
青稞是一种具有营养保健功能的特色粮食作物,符合当前人们追求营养、健康的需求,备受青睐。我国青稞资源遗传多样性丰富,西藏主要农区的青稞品种存在一定的遗传多样性,是研究重要性状遗传、基因挖掘和品质育种的宝贵资源库[16,29-30]。本研究中,来源于西藏251个青稞种质的9项营养品质性状间存在不同程度的差异,其中淀粉含量均值高达 63.370%,粗蛋白含量在 8.091%~22.552%之间,均值为 14.024%,与不同地区、不同品种的青稞的淀粉、蛋白质含量不同的结果一致[3-5]。也有研究发现,青稞籽粒淀粉平均含量为 59.25%[4],蛋白质含量在 6.35%~21.00%之间,均值为 11.31%[5],低于本研究参试青稞中淀粉及粗蛋白的平均含量。这些异同可能与供试材料基因型、数量及环境有关。青稞是麦类作物中β-葡聚糖含量最高的作物,其β-葡聚BJX152:蓝青稞; BJX008:康马宗白; BJX149:黑青稞;BJX004:一季青稞; BJX003:吉隆青稞; BJX015:帕里青稞; BJX005:二季青稞; ZQ2000:藏青2000 BJX227:翁嘎短芒;XML22:喜马拉22号。
糖含量在品种间、地区间、年度间均存在明显差异[6,31];青稞籽粒中的γ-氨基丁酸含量与品种类型及其来源有密切的关系[8]。本研究中,参试青稞种质的β-葡聚糖、γ-氨基丁酸含量的变异系数分别为20.749%、33.618%,表明了来源于西藏的不同青稞种质间β-葡聚糖、γ-氨基丁酸的含量也存在明显差异。青稞中微量元素(铁、铜、锰、锌)在品种间也存在很大差异[10],本研究中的251 个青稞种质的微量元素(Zn、Fe、Se)的变异系数都在 29%以上,Ca、P含量的变异系数分别为 18.421%、27.526%。说明251个西藏青稞种质资源营养品质具有丰富的遗传多样性。
本研究发现,来源于西藏的251个青稞种质资源的粗蛋白含量与淀粉含量呈极显著负相关,与γ-氨基丁酸、Ca、P、Zn、Fe含量间呈极显著正相关。唐亚伟[10]等研究表明,青稞中微量元素Fe、Zn、Cu 间呈极显著正相关,与本研究结果一致。主成分分析被广泛应用于小量样本的青稞秸秆[32]、水稻[33]、苹果[34]等资源评价中,本研究利用主成分分析对不同青稞种质资源品质性状进行综合评价,建立青稞种质资源的大规模综合评价模型,为青稞种质资源多性状综合评价提供了方法。鉴定出综合品质性状前10 的种质分别是BJX152、BJX008、BJX149、BJX004、BJX003、BJX015、BJX005、藏青2000、BJX227、喜马拉22号,其中藏青2000和喜马拉22号是西藏主推的优质高产品种。本研究通过综合评价模型,客观筛选获得10个优良青稞种质,可为青稞高品质新品种选育提供科学依据。