PCR检验法、细菌培养法对阴道细菌的检验价值

陆丽洁

细菌性阴道炎是由肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌等致病菌所引发的细菌性感染，患者患上此病后阴道内的有益菌会骤然减少，肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌显著增多，阴道内菌群因此而失调，进而出现细菌性炎症[1]。在我国，细菌性阴道炎约有1%的发病率，患者需要及时接受有效治疗，否则将有可能恶化为宫颈炎、子宫内膜炎，甚至是慢性盆腔炎，进而对其生殖系统带来较大的损害，严重者甚至可能不孕[2]。而及时有效的治疗，关键在于迅速准确的检验，目前检验阴道细菌的方法主要有细菌培养法和PCR 检验法，二者各有其优缺点。本文选取2018 年1 月—2019 年1 月期间于本院治疗细菌性阴道炎的50 例患者，试对比细菌培养法、PCR检验法对阴道细菌的阳性总检出率。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年1 月—2019 年1 月期间于笔者所在单位治疗细菌性阴道炎的50 例患者作为本次的研究对象，将随机数字表法作为分组方法，将患者分入对照组、研究组，每组25 例。研究组：年龄23～53 岁，平均（38.99±6.73）岁；病程4 个月～3 年，平均（1.76±0.34）年；已育者15 例，未育者10 例。对照组：年龄24～52 岁，平均（38.87±6.92）岁；病程5 个月～3 年，平均（1.79±0.32）年；已育者14 例，未育者11 例。将平均年龄、平均病程、生育与否等资料纳入统计学软件进行对比，结果为P＞0.05，即差异不存在统计学意义，两组之间具有可比性。

纳入标准：（1）年龄不低于18 岁；（2）均有白带异常、阴道瘙痒等症状表现，确诊为细菌性阴道炎；（3）2 周内未对阴道进行局部用药；（4）主要脏器未发生严重病变；（5）研究内容已经充分告知患者及其家属，其出于自愿参与本研究并签署协议，医院伦理部门也批准此次研究[3]。

排除标准：（1）合并有其他生殖系统疾病；（2）合并有恶性肿瘤、免疫系统疾病或其他传染病；（3）妊娠、哺乳、月经期女性；（4）近期有性生活；（5）存在视听障碍、神经疾病或精神异常等对配合完成研究有影响的疾病[4]。

1.2 方法

两组患者均以相同的方法采集阴道分泌物，即以无菌棉拭子旋转擦拭阴道后穹窿处，棉拭子将蘸取少量的阴道分泌物，将其分为2 份，放入3 mL 的无菌生理盐水中保存，随后及时送交实验室进行检验。

1.2.1 细菌培养法 取其中一份标本，接种到琼脂培养基中，放入含有5%二氧化碳的孵育保温箱中进行恒温（35℃）培养，时间为48 h，待菌落形成后取呈露滴状、光滑、呈灰色或半透明样的菌群进行鉴定。

1.2.2 PCR 检验法 取另一份标本，给予转速12 000 r/min、时间15 min 的离心操作，待离心完毕后去除上清液，加入适量的碱性裂解液，置入60℃水浴中加热15 min，或在98℃下加热10 min，随后给予转速12 000 r/min、时间10 min 的离心操作，取上清液，制作DNA 模板，最后将其放入荧光PCR 仪进行扩增、循环处理，分析标本中细菌的种类。

1.3 观察指标

比较两组对肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌的检出率以及阳性总检出率。其中，PCR 检验法阳性标准为：条带宽度边缘均非常整齐且不超过1 cm，背景中未发现引物二聚体；细菌培养法阳性标准为：培养基中形成的典型菌落即是目的菌落。

1.4 统计学方法

在SPSS 19.0 版统计学软件中纳入本研究中所有研究对象的临床数据，计量资料采用（）表示，行t检验；计数资料采用（%）表示，行χ2检验，通过统计分析后结果若为P＜0.05，则差异存在统计学意义。

2 结果

研究组对肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌的检出率分别为20.00%、20.00%、52.00%，均高于对照组的4.00%、8.00%、36.00%，研究组的阳性总检出率为92.00%，高于对照组的48.00%，差异存在统计学意义（P＜0.05），见表1。

3 讨论

由厌氧菌与加特纳菌等致病菌所引起的细菌性阴道炎是一种混合感染，正常情况下，阴道中虽然存在有大量的球菌或杆菌，但阴道分泌物是碱性的，可以抑制多种微生物的生长，使阴道内部环境保持平衡，而细菌性阴道炎的发生，会使大量致病菌滋生、大量有益菌死亡，诸如肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌等致病菌取代阴道中原本存在的大量益生菌，使阴道内微生态环境失去平衡，酸碱度紊乱，进而使阴道分泌出更多的分泌物，令患者出现白带异常、外阴瘙痒等症状表现。而在细菌性阴道炎发生后，患者需要及时进行有效的治疗，不要因为发病初期症状较轻而不加以重视，否则会延误最佳治疗时机，使病情加重，进而引发盆腔感染或是更严重的疾病[5-7]。

对于细菌性阴道炎而言，临床应在早期开展对阴道细菌的检验，以便能有效预防和控制阴道炎的发生。本文便为对照组采取了细菌培养法，为研究组采取了PCR 检验法，其中细菌培养法是一种非常传统的临床诊断方法，其在临床上应用非常早，至今为止都极为常用，但是随着医学技术不断发展，医学工作者们发现细菌培养法存在着很多的不足之处，例如：其操作步骤较为复杂、繁多，需要较长的时间才能得出结果；其容易受到环境的干扰，对设备及检验人员具有较高的要求，检出率较低，这些缺陷使得其愈加不适合在临床广泛应用，尤其是基层医院，很难轻松开展此项检查[8-11]。而PCR 检验法是一种新兴的检验技术，其兼有DNA 杂交特异性与PCR 敏感性两种优势，可以高效进行阴道细菌的检验，与传统的细菌培养法相比，其操作步骤较为简单，耗时较短，可以快速得出检验结果；其精度准、检出率高；其对设备和检验人员要求较低，不容易受到外界因素的干扰，检验结果更加准确；其检验费用较低，更加容易被广大医护人员、检验人员、患者所接受，可以说，PCR 检验法非常适合在临床中广泛开始，尤其是设备、环境均相对一般的基层医院，也可以放心开展，故PCR 检验法在阴道细菌的检验上具有比细菌培养法更高的临床价值[12-14]。

表1 对肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌检出率及阳性总检出率的组间对比（%）

见结果，研究组对肠球菌、加特纳菌、棒状杆菌的检出率均高于对照组（20.00%vs.4.00%、20.00%vs.8.00%、52.00%vs.36.00%），并且研究组的阳性总检出率也高于对照组（92.00%vs.48.00%），可以证明PCR 检验法具有比细菌培养法更高的诊断准确性。将张婷研究报告《阴道细菌检验应用PCR 检验法和细菌培养法的临床价值体会》中采取PCR 检验法的A 组89.13%的阳性总检出率与本文中研究组92% 的阳性总检出率进行对比，可以发现二者较为相近，可见“PCR 检验法对阴道细菌检验有显著临床价值”的结论真实可靠[15]。

对于细菌性阴道炎，临床应在治疗前给予快速准确的诊断，而PCR 检验法正是阴道细菌检验的最佳方法之一，其不仅操作简单方便，对设备人员要求低，其阳性总检出率也比细菌培养法更高。