酶联法在家畜尿液及组织中检测瘦肉精的应用

2019-12-30 09:44杨丹
新农业 2019年12期
关键词:瘦肉精清液标准值

杨丹

“瘦肉精”是一种类似白色的结晶体粉末,味微苦,无臭。化学性质相对稳定,只有温度达到172℃才会分解。因此,普通的加热方法难以将其毒性破坏。它并不是一种特殊的物质,而是一类简单的化学用品,是一种能加快瘦肉生长的廉价药物添加剂,只要是增加瘦肉率的物质都可以称做“瘦肉精”。目前,检测瘦肉精的方法有高效液相色谱法、酶联免疫吸附法、液相色谱质谱联用法和气相色谱质谱联用法等。其中,酶联免疫吸附实验是目前检测家畜饲料、产品以及组织、尿液中瘦肉精的最常用、最快速的方法,即利用免疫学中的抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用,经过化学方法将植物辣根過氧化物酶与克伦特罗结合,结合成酶偶联克伦特罗。大多实验室采用“筛选”和“确证”相结合的方法进行测定,通常以前两种作为“确认”方法,后两种作为“筛选”方法,既可提高测试结果的准确性和可靠性,又可处理数量较多的待测样品。“瘦肉精”在不同组织中的残留程度不同,注意测定时选取残留量较高的组织。一般来说,眼睛等组织的样品中含有极少的残留量,肌肉中的脂肪量相对较高,留量较高且容易处理,切记所有试剂及样品在开始检测前必须回升至室温。

1 酶联法检测家畜血液、尿液中的瘦肉精含量的测定

取新鲜血液,将其加入15毫升离心管,4000转/分钟,离心5分钟,取上清液。取1毫升血清样品于50毫升离心管中,加入1毫升蒸馏水,振荡5分钟,4000转/分钟,离心5分钟,取上清液。

采集尿液,过滤或离心5分钟,4000转/分钟,取上清液。

测定结果判定。判定阴阳性标准是以浓度1微克/升标准液的OD值,当测定数据小于标准值时,判定为疑似阳性,当测定数据大于等于标准值标准值时,判定为疑似阴性。判定为疑似阳性的样品须通过气相色谱-质谱法进行确证。大量数据表明尿液中可能含有瘦肉精,但并不能够排除是否含有人为因素,而血液却大不相同,血液是生物体内的“根本”,可以大部分排除人为因素,防止“掉包”事件的发生。

2 酶联法检测家畜组织中的瘦肉精含量的测定

肉组织中瘦肉精的检测,肉眼可以看出含瘦肉精的猪肉颜色较为鲜艳,颜色一般呈现出鲜红色,但符合食品安全生产标准的猪肉的颜色则是淡红色。含有瘦肉精的猪肉皮下脂肪层比健康的猪肉要薄很多,基本小于1厘米,因此切下来的肉也相对较软。

毛发中瘦肉精的检测,毛发较于其他部位的取材比较容易,且药物代谢较慢可长期存在,因此为毛发分析提供了一种扩展的追溯性检测了可能性。猪毛样品在进行盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解后,以盐酸二苯拉林为内标物质,采用液相色谱串联质谱可检测定量。结果显示此方法高灵敏度、强特异性,对完善瘦肉精检测技术具有非凡意义。

肝脏中瘦肉精测定,肝脏中瘦肉精测定必须在室温下进行操作(23℃为最适温度)。对于处理样品中带有低脂肪的组织肝或肉时,需进行均质、离心、混合、再离心等一系列步骤才可以获得最终样品。若样品没有完全粉碎,可能与盐酸等试剂没有进行充分地混合,使提取的“瘦肉精”丢失了小部分,将会导致实验结果偏低;在肝等实质器官,若在采样时采取了吸收“瘦肉精”能力较弱部位的样本,也会导致最终实验结果偏低,由于操作过程的主观原因,也可造成各种误差。例如,加样试剂不完全,一些试剂残留在微孔的边缘上,在加抗体溶液时不完全,加入标准或处理好的样品或基质时,显色底物试剂不完全,也可使最终结果不准确。若在加样时将液体溅入另一孔中,洗涤液溅入另一个位置,可能也会造成的酶标板孔之间互相污染,会对检测结果产生影响。

综上所述,要想使在养殖环节中真正的不再使用瘦肉精,就必要加强生猪在被宰前进行尿检工作,并对不符合食品质量安全的养殖户进行严重的惩罚,以加强社会以及政府的大力支持。只有这样才能将私自添加瘦肉精的违法行为被彻底制止,使人们所食用的猪肉变得愈加健康、安全。

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