新型霉菌毒素吸附剂对母猪玉米赤霉烯酮中毒症缓解效果的研究

张宏宇，李 淼，孙得发，龙沈飞，朴香淑

（1.诺伟司国际贸易（上海）有限公司，上海 200080；2.中国农业大学动物科技学院，农业农村部饲料工业中心，北京 100193）

玉米赤霉烯酮是镰刀菌属的次生真菌代谢物，是一种2,4-二羟基苯甲酸内酯类化合物，属于非类固醇，能够与体内的雌激素受体发生结合，对动物造成类雌激素样影响。它广泛存在于许多谷类作物中，如玉米、小麦、大麦和高粱[1]。青年母猪和后备母猪对玉米赤霉烯酮极为敏感，饲料中玉米赤霉烯酮含量超标可引起母猪外阴道炎、卵巢萎缩、假孕、持续发情、窝产仔数减少、流产、死胎和无乳症[2-3]。怀孕母猪采食高浓度玉米赤霉烯酮日粮可导致胚胎早期死亡或胎儿畸形，引起流产、死胎、产仔数减少，同时伴随母猪采食量减少、泌乳量下降、仔猪断奶体重轻、抗病力低[4]。此外，研究表明玉米赤霉烯酮不仅可以导致动物繁殖性能下降，还可以引起慢性肝损伤和免疫抑制[5]。近年来，饲料行业对玉米赤霉烯酮的关注越来越多，控制玉米赤霉烯酮的影响极为重要。

黏土类蒙脱石是目前通常用来预防霉菌毒素中毒的有效方式。Wang 等[6]研究发现，日粮添加蒙脱石类黏土可以缓解玉米赤霉烯酮对断奶仔猪的负面作用，并加快仔猪霉菌毒素中毒症状的恢复速度。Chen 等研究发现，含1.1 mg/kg 玉米赤霉烯酮的日粮中添加1%的改性麦饭石可显著降低断奶母猪的外阴面积[7]。与高玉米赤霉烯酮组相比，日粮中同时添加5 kg/t 和10 kg/t 的肠道型黏土吸附剂可显著降低母猪的外阴长度、宽度和面积[8]。方解石是一种天然的具有强吸附作用的粘土，具有很特殊的晶体结构，而改性方解石相对于天然方解石，可更高效、广谱、快速吸附各种霉菌毒素[9]。

本试验通过建立母猪玉米赤霉烯酮攻毒模型，研究高浓度玉米赤霉烯酮对母猪生长性能、血清生化指标、直肠温度、外阴面积的影响，观测新型霉菌毒素吸附剂（米纳素，主要成分为改性方解石）对母猪玉米赤霉烯酮中毒症状的缓解作用，为其在母猪日粮中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计与饲养管理 试验选用24 头健康、体重（25.63±1.43）kg 的杜× 长× 大母猪，随机分为4 个处理组，每组6 个重复，每个重复1 头母猪。正对照组饲喂正常玉米-豆粕型日粮；负对照组饲喂含高玉米赤霉烯酮含量（2 mg/kg）的日粮，营养水平与正对照组一致；2 个吸附剂组分别在负对照组基础上添加2 kg/t 和4 kg/t 新型霉菌毒素吸附剂（主要成分为改性方解石）。试验期21 d。饲料配制参照猪的饲养标准NRC（2012），试验日粮组成及营养成分见表1；高浓度玉米赤霉烯酮日粮通过添加自然霉变玉米芯粉来实现，玉米芯粉及日粮中玉米赤霉烯酮含量见表2。试验于国家饲料工程技术研究中心/农业农村部饲料工业中心动物试验基地（河北丰宁）进行。采用全封闭式猪舍，舍内温度、湿度、通风强度、二氧化碳和氨浓度自动化控制。母猪被单独安置在代谢笼中，代谢笼安装了塑料板条地板、奶嘴饮水器和水槽，母猪可以自由进食和饮水。试验开始前，猪舍彻底清洁消毒。猪舍环境温度保持在25℃左右，相对湿度为65%。

1.2 检测指标与测定方法

1.2.1 生长性能 试验开始与试验结束时，分别称量猪个体重及饲料重量，计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和耗料增重比（F/G）。

1.2.2 直肠温度 每头猪每7 d 测一次直肠温度。温度计通过肛门插入猪直肠5 cm，直到听到警报声，指示读数结束。

1.2.3 外阴面积 每7 d 测量一次外阴长、宽、高，确定日粮玉米赤霉烯酮雌激素效应，将外阴面积近似计算为菱形，计算公式：外阴面积=（外阴长×外阴宽）/2。

1.2.4 血液生化和抗氧化指标 于试验结束时，从每个重复（圈）中随机选取2 头猪，每头猪前腔静脉采血10 mL，3 500 r/min 离心10 min 制备血清样品，分装后冷冻存放于-80℃待测。采用酶两点动力法测定血浆尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）。血清免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）和免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）根据定量测定试剂盒（R&D 公司，中国）的说明进行测定。血清超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平均按照试剂盒（南京建成生物工程所）说明书测定。

表1 试验日粮配方及营养成分

1.2.5 统计分析 数据采用SAS 9.1 统计软件MIXED模型进行方差分析。以各试验猪为统计单位，日粮处理为固定效应，猪和试验期为随机效应，使用LSMEANS计算平均值。结果用最小二乘法的均值及平均标准误表示，P＜0.05 为差异显著。

2 结果与分析

2.1 霉菌毒素吸附剂对母猪生长性能的影响 由表3 可知，各处理组间初始体重差异不显著，试验结果表明，各处理组间平均日采食量、平均日增重、耗料增重比均无显著差异。与其他试验组相比，正对照组母猪的平均日采食量有升高的趋势（P＜0.1）。

2.2 霉菌毒素吸附剂对母猪直肠温度的影响 由表4 可知，第7 天时试验2 组直肠温度显著低于负对照组。与正对照组相比，负对照组直肠温度在试验21 d 时显著升高。2 个吸附剂组均略低于负对照组，且2 组间无显著差异。

表2 玉米芯粉及试验日粮中玉米赤霉烯酮含量

表3 霉菌毒素吸附剂对母猪生长性能的影响

表4 霉菌毒素吸附剂对母猪直肠温度的影响

2.3 霉菌毒素吸附剂对母猪外阴面积的影响 由表5 可知，试验开始时，母猪外阴长度、宽度、高度和面积无显著性差异。与正对照组相比，负对照组在第7、14、21 天时外阴长、宽、高、面积均显著增加；试验第7 天，与负对照组相比，2 kg/t 和4 kg/t 吸附剂组母猪外阴高度显著降低；试验第14 天，2 kg/t 和4 kg/t 吸附剂组母猪的外阴长度、宽度和面积显著低于负对照组，但显著高于正对照组；试验第21 天，与正对照组相比，负对照组、2 kg/t 和4 kg/t 吸附剂组外阴长度、宽度和面积均显著升高。在第7、14、21 天，2 kg/t 和4 kg/t 吸附剂组的外阴长度、宽度、高度和面积均没有显著差异。

2.4 霉菌毒素吸附剂对母猪血清生化指标的影响 由表6 可知，负对照组母猪IgA 水平显著低于正对照组、2 kg/t 和4 kg/t 吸附剂组；与正对照组和负对照组相比，2 kg/t 和4 kg/t 吸附剂组母猪血清IgM 水平显著升高；负对照组母猪血清SOD 水平显著低于其他处理组；与负对照组相比，试验1 组和试验2 组母猪血清SOD 水平显著升高。

3 讨 论

本研究中，各处理组间母猪初始体重差异不显著，试验结束时各处理组母猪采食量、平均日增重及耗料增重比差异不显著，可见，高浓度玉米赤霉烯酮日粮对猪的生长性能影响不显著。原因可能是由于短期暴露一定剂量范围内的玉米赤霉烯酮主要影响繁殖系统，对生长性能影响不显著。也有文献报道，日粮中含2 mg/kg 玉米赤霉烯酮对仔猪的干物质、总能及蛋白消化率没有显著影响[10]。

研究表明，玉米赤霉烯酮及其代谢产物通过与雌激素受体结合表现出很强的类激素活性，导致雌性动物繁殖过程中激素大幅波动，典型的临床症状是外阴红肿[11]。已有研究发现，与对照组相比，日粮含1 mg/kg 的玉米赤霉烯酮显著增加了28 日龄仔猪的外阴长度、宽度、高度和面积[12]。Jiang 等[13]研究发现，后备母猪饲喂含1.3 mg/kg 玉米赤霉烯酮的日粮会增加外阴面积；日粮含1.1 mg/kg 玉米赤霉烯酮显著增加了后备母猪外阴长度、宽度、高度和面积[14]。这些研究结果与本试验结果一致。而添加新型霉菌毒素吸附剂减小了母猪外阴面积说明其在肠道中效吸附了玉米赤霉烯酮，从而降低了玉米赤霉烯酮的毒性。

玉米赤霉烯酮可引起肝细胞的氧化应激，导致脂质过氧化，从而引起肝脏损伤[15]。SOD 是抗氧化酶系中最重要的酶，SOD 酶活的降低会导致体内自由基增加，从而引起氧化应激损伤，影响细胞功能[16-17]。有研究表明，高浓度玉米赤霉烯酮（1.1～3.2 mg/kg）日粮可降低断奶母猪的血清SOD 活性[18]，添加蒙脱石会降低毒素对母猪的负面影响，提升血清SOD 活性[6]。本试验研究与前人结果一致，玉米赤霉烯酮显著降低了母猪血清SOD 活性，但添加新型霉菌毒素吸附剂后可有效吸附毒素，缓解日粮毒素对母猪肝脏的损伤作用，提升了血清SOD 活性。

表5 霉菌毒素吸附剂对母猪外阴面积的影响

表6 霉菌毒素吸附剂对母猪血清生化指标的影响

在抗原作用下，B 淋巴细胞可分化为能分泌免疫球蛋白的细胞，实现体液免疫，它在机体抗感染过程中起着重要保护作用。体液免疫主要指的是IgG、IgA 和IgM。Abbès 等[19]研究表明，日粮含40 mg/kg 玉米赤霉烯酮显著降低了大鼠血清IgA 和IgG 含量，从而抑制了淋巴细胞的分化。Swamy 等[20]也发现，玉米赤霉烯酮可降低肉鸡B 淋巴细胞的数量。由此可见，玉米赤霉烯酮可对动物免疫系统产生负面影响[21]。本试验中，负对照组猪血清IgA 水平显著降低，当添加了新型霉菌毒素吸附剂之后血清IgA 含量显著升高，说明新型霉菌毒素吸附剂可有效缓解玉米赤霉烯酮对母猪免疫抑制作用，改善母猪繁殖性能。

4 结 论

饲喂高浓度玉米赤霉烯酮日粮对生长期母猪外阴长度、宽度和面积等均有负面影响，新型霉菌毒素吸附剂对上述症状有缓解作用，并提高母猪的免疫及抗氧化能力。