乳腺癌患者进行两种蛋白检测的临床意义

祖珊珊 刘晓梅 王优良

【摘 要】目的：研究与分析乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白检测的临床意义。方法：选取在2017年12月至2018年12月来本院进行病理检测的良性乳腺疾病患者136例以及乳腺癌组织156例，在这156例患者乳腺癌组织中，分别采取ELIS法和EnVision二步法来对患者血清中的EGFL7及组织中的β-catenin蛋白水平进行检测。结果：良性乳腺疾病患者以及乳腺癌组织中的EGFL7和β-catenin蛋白表达水平对比，良性乳腺疾病患者显著低于乳腺癌组织中，数据对比差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：对于评估乳腺癌转移风险而言，检测EGFL7及β-catenin蛋白具有较高的参考价值。

【关键词】EGFL7;乳腺癌;β-catenin

文章编号：WHR2019021202

随着我国社会经济的发展，人们的生活习惯以及饮食习惯有了显著的改变，这些不健康的习惯导致了人们患有恶性肿瘤的概率大大增加[1]。乳腺癌是临床上最为常见的恶性肿瘤疾病之一，根据大量数据显示，我国乳腺癌疾病的发生率呈现逐年上升的趋势，已经成为危害女性身心健康的主要疾病之一。EGFL7是一类血管内皮特异性表达的基因，该类基因是一类分泌蛋白。β-catenin基因是一类Wnt信号通道的下游基因，该基因存在于细胞浆以及细胞膜上，可以参与肿瘤的发生以及进展等过程。本文研究与分析乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白检测的临床意义，以期为临床诊断乳腺癌疾病提供科学依据。现将具体的检测方法以及检测结果等情况总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取在2017年12月至2018年12月来本院进行病理检测的良性乳腺疾病患者136例以及乳腺癌组织156例，在这156例患者乳腺癌组织中，有103例为淋巴结转移病例，有53例为远处转移病例。选取组织的患者年龄为29～68岁，平均年龄为（43.14±7.09）岁;在156例乳腺癌患者中，Ⅰ期患者有26例，Ⅱ期患者有69例，Ⅲ期患者有49例，IV期患者有12例。本次研究通过道德伦理委员的批准。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学法 首先预试验，一抗EGFL7最佳浓度为1∶300，而β-catenin最佳浓度为1∶200;使用梯度酒精水化以及二甲苯脱腊等试剂进行组织切片;高温高压抗原热修复，采取EDTA抗原修复液修复2.5min;使用3%过氧化氢去离子阻断内源性过氧化物酶;滴加一抗，同时使用PBS洗涤3min，需要洗涤3次，滴加二抗，孵育30min;对组织进行显色，同时进行脱水，苏木精进行衬染，二甲苯进行透明，中性树胶进行封片等处理;

1.2.2 血清 EGFL7 ELISA 检测 需要收集5mL的空腹外周静脉全血，震荡完毕后促凝剂混合，放置4℃的冰箱内，将血清以及红细胞分离10min;加样，在每个设置的孔内加入100μL的标准品以及待测样本，将贴膜轻轻盖上，在室温下温育30min;将孔内液体弃去，冲洗包被板3次;在每个孔内加入100μL的辣根过氧化物酶标志物工作液;将吸除孔内的液体进行甩干，同时冲洗包被板5次，注意每次加入洗涤液200μL，浸泡3min，将洗涤液甩净;每孔内加入90μL的底物溶液，随后将其放置于温度为37℃下进行避光显色处理，时间为15min;在每孔内加入50μL反应终止液，随后使用分光光度仪来对各孔的吸光度值进行测定，测定时间为5～10min。

1.3 统计学科学处理

将相关数据记录于统计学软件SPSS 19.0中进行统计学科学处理，计数资料以率表示，以卡方检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

良性乳腺疾病与乳腺癌患者的EGFL7蛋白表达水平对比差异显著，前者显著低于后者，数据对比具有统计学意义（P<0.05）。且乳腺良性病变与乳腺癌患者的β-catenin蛋白表达水平对比差异显著，前者显著低于后者，数据对比具有统计学意义（P<0.05）。伴有淋巴结转移及远处转移乳腺癌与无淋巴转移的乳腺癌患者的β-catenin蛋白以及EGFL7蛋白水平表达水平差异显著，前者显著高于后者，数据对比具有统计学意义（P<0.05）。具体的情况见表1。

3 讨论

根据大量数据显示，乳腺癌疾病的发病率逐年上升，且呈现年轻化趋势，已经成为威胁妇女身心健康的主要疾病之一。在2003年发现的血管内皮特异性表达的基因EGFL7，是一种分泌蛋白，与患者机体内的细胞间黏附作用的调节有着密切的关系，而β-catenin基因是一种下游基因，该类基因主要存在于细胞浆以及细胞膜，主要参与肿瘤的发展等过程[2-3]。

本文研究与分析乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白检测的临床意义，结果显示良性乳腺疾病与乳腺癌患者的EGFL7蛋白表达水平差异显著，前者显著低于后者，数据对比具有统计学意义（P<0.05）。且乳腺良性病變与乳腺癌患者的β-catenin蛋白表达水平对比差异显著，前者显著低于后者，数据对比具有统计学意义（P<0.05）。伴有淋巴结转移及远处转移乳腺癌组织与无淋巴转移的乳腺癌组织中的β-catenin蛋白以及EGFL7蛋白水平表达水平差异显著，前者显著高于后者，数据对比具有统计学意义（P<0.05）。这些结果表明，在乳腺癌病变组织与血清中，EGFL7蛋白以及β-catenin蛋白的表达水平较高，且具有转移性，究其原因，EGFR-AKT-Snail信号通路可以被EGFL7所激活，对胃癌细胞上皮-间质转化进行有效调控，可以促进癌细胞的转移以及侵袭，而在此过程中，β-catenin蛋白与其具有协同作用。

综上所述，对于评估乳腺癌转移风险而言，检测EGFL7及β-catenin蛋白具有较高的参考价值。

参考文献

[1] 姜青明，周文文，肖觉.乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白检测的临床意义[J].临床与病理杂志，2018，38（03）：472-479.

[2] 姜青明，周文文，李光新.miR-126靶向EGFL7抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231上皮-间质转化[J].临床与病理杂志，2018，38（10）：10-17.

[3] 季晓辉.Wnt5a和β-catenin在乳腺癌中的表达及其临床意义[J].医学与哲学（B），2018，39（05）：48-50.